下列是产品的订购信息:
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产品名称
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A549人肺癌细胞系
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规格
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T25m2
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货号
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YS-X9865
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描述:(1)公司可提供新鲜或冻存细胞株;(2)细胞株数量约 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
发货:客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右完全培养基;2、说明书及注意事项;3、公司售后服务标准。
保存和应用:客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜细胞株,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研,不得用于临床应用。
A549人肺癌细胞系细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
A549人肺癌细胞系细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
猪主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ)免疫试剂盒 直销 英文名称: Porcine MHC Ⅲ ELISA Kit
猪主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ)免疫试剂盒 进口、组装 英文名称: Porcine MHC Ⅱ ELISA Kit
猪主要急性期蛋白(MAP)免疫试剂盒 进口、分装 英文名称: Pig major acute phase protein,MAP ELISA Kit
猪肿瘤坏死因子α(TNF-α)免疫试剂盒 现货供应 英文名称: Porcine TNF-α ELISA Kit
猪中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)免疫试剂盒 直销 英文名称: Pig neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL ELISA Kit
猪脂联素受体2(ADIPOR2)免疫试剂盒 进口、组装 英文名称: Pig adipo
nectin receptor 2,ADIPOR2 ELISA kit
猪脂联素受体1(ADIPOR1)免疫试剂盒 进口、分装 英文名称: Pig adipo
nectin receptor 1,ADIPOR1 ELISA kit
猪脂联素(ADP)免疫试剂盒 现货供应 英文名称: Porcine ADP ELISA Kit
猪脂肪酸合成酶(FAS)免疫试剂盒 直销 英文名称: Pig fatty acid synthase,FAS ELISA kit
猪脂多糖结合蛋白(LBP)免疫试剂盒 进口、组装 英文名称: Pig lipolysaccharide binding protein,LBP ELISA Kit
猪脂蛋白脂酶(LPL)免疫试剂盒 进口、分装 英文名称: Pig lipoprotein lipase,LPL ELISA kit
猪脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)免疫试剂盒 现货供应 英文名称: Pig lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PLA2 ELISA Kit
猪脂蛋白α(Lp-α)免疫试剂盒 直销 英文名称: Porcine Lp-α ELISA Kit
猪正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)免疫试剂盒 进口、组装 英文名称: Pig regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted,RANTES ELISA Kit
猪粘膜血管地址素细胞黏附分子1(MADCAM1)免疫试剂盒 进口、分装 英文名称: Pig mucosal vascular addressin cell adhesion molecule 1,MADCAM1 ELISA kit
猪粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)免疫试剂盒 现货供应 英文名称: Pig mucin-5 subtype B,MUC5B ELISA Kit
猪粘蛋白/粘液素C(MUCC)免疫试剂盒 直销 英文名称: Pig mucin-5 subtype AC,MUCC ELISA Kit
猪粘蛋白/粘液素2(MUC2)免疫试剂盒 进口、组装 英文名称: Pig Mucin-2,MUC2 ELISA Kit
猪粘蛋白/粘液素1(MUC1)免疫试剂盒 进口、分装 英文名称: Pig Mucin-1,MUC1 ELISA Kit
猪早老素2(PS-2)免疫试剂盒 现货供应 英文名称: Pig Presenilin 2,PS-2 ELISA Kit
猪早老素1(PS-1)免疫试剂盒 直销 英文名称: Pig Presenilin 1,PS-1 ELISA Kitγ2肌动蛋白抗体 英文名称: ACTG2 规格: 0.2ml
gp130结合蛋白GAM抗体 英文名称: AES 规格: 0.2ml
缪勒激素2型受体抗体 英文名称: AMHR2 规格: 0.1ml
激活素受体1A抗体 英文名称: ACTR1 规格: 0.2ml
激活素受体2A抗体 英文名称: ACTR2 规格: 0.2ml
激活素受体2B抗体 英文名称: Activin Receptor Type IIB 规格: 0.2ml
2号染色体开放阅读框88抗体 英文名称: C2orf88 规格: 0.2ml
G蛋白偶联受体ARHGEF18抗体 英文名称: ARHGEF18 规格: 0.2ml
激活素受体1B抗体 英文名称: Activin A Receptor Type IB 规格: 0.2ml
雄激素受体相关蛋白24抗体 英文名称: ARA24 规格: 0.2ml
淀粉样肽前体蛋白抗体(C端) 英文名称: Amyloid Precursor Protein 规格: 0.1ml
腺苷酸环化酶2抗体 英文名称: ADCY2 规格: 0.2ml
A549人肺癌细胞系载脂蛋白C3抗体 英文名称: APOC3 规格: 0.2ml
载脂蛋白E4抗体 英文名称: Apolipoprotein E4 规格: 0.2ml
自噬相关基因AMBRA1抗体 英文名称: AMBRA1 规格: 0.2ml
磷酸化自噬相关蛋白4C抗体 英文名称: Phospho-ATG4C(Ser177) 规格: 0.1ml
磷酸化自噬相关蛋白4C抗体 英文名称: Phospho-ATG4C(Ser398) 规格: 0.1ml
磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体 英文名称: phospho-ASK1 (Ser966) 规格: 0.1ml
操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
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