KFS205 Caspase 6荧光法检测试剂

北京百奥莱博供应的Caspase 6荧光法检测试剂用于科学研究，我公司专注于细胞凋亡与增殖产品的研发、生产和供应，为您提供的Caspase 6荧光法检测试剂质量可靠，批间差小，且价格公道，热切盼望您选购我们的产品。

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特别提示：包括Caspase 6荧光法检测试剂盒(AFC)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：Caspase 6荧光法检测试剂盒(AFC)
英文名称：Caspase-6 Fluorescence Metric Assay
产品货号：KFS205
产品规格：20T|50T|100T

本试剂盒适用于培养细胞及新鲜组织Caspase-6 检测。Caspase 家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用，其中Caspase-6 为关键分子，与DNA 断裂、染色质凝聚和凋亡小体形成有关。Caspase-6 在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中，没有活性；但在细胞发生凋亡阶段，它被激活，活化的Caspase-6 裂解相应的胞浆胞核底物，导致细胞凋亡。Caspase-6荧光检测试剂盒就是将Caspase-6 序列特异性的多肽偶联至发色基团。当底物被Caspase-6 剪切后，发色基团即游离出来，可通过荧光酶标仪测定其荧光强度（激发波长=485nm,发射波长=535nm）。

注意事项
1. Caspase-6 Substrate 避光保存及使用。
2. 对某些凋亡诱导剂引起的细胞凋亡可能存在非依赖于Caspase-6 活化的机制，这种情况时利用本试剂盒检测Caspase-6 活性无明显改变，需要考虑凋亡机制中的其他信号通路。
3. 细胞数量需达到3~5×106 个或新鲜组织50~100mg，以便能达到测定需要的100~200μg 蛋白的要求，因为Caspase-6 的活性与细胞裂解液的蛋白含量有关，如测定的RFU 值偏低，可以通过适当延长反应的时间，如果值还是不高，可通过增加细胞数量或组织量的方法来提高蛋白量。

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名称：细胞凋亡DNA Ladder提取试剂盒(柱式吸附)
货号：YT121
规格：50次
本试剂盒是目前zuì的DNA Ladder抽提试剂盒之一。本试剂盒是针对细胞凋亡过程中产生的核小体间DNA链断裂而设计的。可以非常有效地抽提zuì小片段为180-200bp的DNA ladder，同时又可以抽提到zuì大50kb左右的基因组DNA。本试剂盒可以抽提50个样品。

DNA ladder也称DNA fragmentation，是细胞凋亡的一个重要指标。通常观察到DNA ladder，就可以判定细胞发生了凋亡。

样品先被蛋白酶K消化，随后加入适合DNA结合到纯化柱上的缓冲液，然后加入到纯化柱内。通过高速离心，使DNA在穿过纯化柱的瞬间，结合到纯化柱上，随后通过两次洗涤去除各种杂质，zuì后通过洗脱液把DNA洗脱下来。整个过程无需酚氯fǎng抽提，无需酒精沉淀，样品裂解后仅需约15分钟即可完成。

通过DNA纯化柱方式抽提DNA ladder比用传统的酚氯fǎng抽提酒精沉淀方法更加便捷，小片段DNA不容易损失。试剂盒提供了RNase A，可以获得不含RNA的高纯度总DNA，排除了RNA对DNA ladder观察造成的干扰。

本试剂盒每次zuì多可以抽提20mg组织或200-350万个培养细胞。样品用量过多，反而会影响抽提效果。纯化柱对于DNA的zuì大容量约为30微克。通常每200万Hela细胞或500万淋巴细胞可以抽提得到15-25微克总DNA，每25mg肝、脑、肾组织可以抽提得到10-30微克总DNA，每25毫克心、肺组织可以抽提得到5-10微克总DNA，每10mg脾组织可以抽提得到5-30微克总DNA。样品的用量请勿超过纯化柱的容量，样品用量zuì好能保持在纯化柱容量的70%或以下。当然过少的样品也不利于检测到DNA ladder。

对于培养细胞的凋亡检测，通常6孔板一个孔的细胞就足够用于DNA ladder的抽提和检测。

试剂盒组份：
样品裂解液A——————10ml
样品裂解液B——————11ml
洗涤液I——————21ml(次使用前加入7ml无水乙醇)
洗涤液II——————16ml (次使用前加入24ml无水乙醇)
洗脱液——————22ml
蛋白酶K——————1.1ml
RNase A——————220μl
DNA纯化柱及废液收集管——————50套

注意事项：
1. 温度较低时样品裂解液A或样品裂解液B中可能会有沉淀产生，属正常现象。使用前必须检查一遍。如有沉淀，55℃水浴孵育使沉淀溶解，混匀后使用。
2. 次使用前洗涤液I需添加7ml无水乙醇，洗涤液II需添加24ml无水乙醇，混匀，并在瓶上做好标记。
3. 本试剂盒需使用55℃或70℃水浴，请提前作好准备。
4. 除特别说明外，每次Vortex应控制在5-10秒左右。
5. 本试剂盒所有操作均在室温进行，操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。
6. 废液收集管在一次抽提中需多次使用，切勿中途丢弃。

储存条件：室温，有效期一年。( 蛋白酶K需-20℃保存)

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