特别提示:包括PCR试剂盒(含YT Taq酶,Buffer,dNTP,上样液)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:PCR试剂盒(含YT Taq酶,Buffer,dNTP,上样液)
英文名称:PCR Kit with YT Taq
产品货号:YT381
产品规格:400次
本PCR试剂盒带有YT Taq DNA Polymerase(YT373)、PCR buffer、dNTP和上样缓冲液,自备模板和引物即可进行PCR反应,适合用于各种常规PCR以及T载体克隆、点突变等,能在扩增DNA模板的情况下同时保证高保真性。本试剂盒用于50微升的PCR反应体系,足够用于160个反应,用于20微升的PCR反应体系,足够用于400个反应。
产品组份:
YT Taq DNA Polymerase (5U/μl)————200U
10×Taq Buffer (with Mg2+)——————1ml
dNTP (2.5mM each)——————————0.7ml
6×DNA Loading Buffer————————1ml×2
储存条件:-20℃
根据您的关注的
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名称:PCR级海藻糖溶液
货号:BTN130506
规格:1.5mL
本产品为浓度为5M的海藻糖的水溶液,可以直接添加到PCR反应体系或逆转录反应中提高酶的热稳定性和活性。
产品特点:
1.在反应体系中加入海藻糖,可以增加热敏感的酶在高温下的稳定性和活性。
2. 海藻糖能增加鼠白血病病毒逆转录酶(Reverse Transcripatase)的热稳定和热激活特性,使其在60℃仍具有全部活性,足以在mRNA二级结构诱导终止反应之前合成全长的cDNA,反应效率大大提高。
3. 有助于提高干燥保存的酶的活性。
储存条件:低温运输,4℃保存,保存期一年
使用方法:按照1/3体积,将本产品加入到PCR体系中即可。
名称:PCR级甲酰胺
货号:BTN100839
规格:250mg
本产品为PCR级的甲酰胺,其可以促进某些引物、模板退火,降低带有二级结构的DNA的变性温度,是一种常用的PCR增强剂。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
名称:dNTP套装(100mM)
货号:YT389
规格:4×50μl
本品为包装的dATP、dCTP、dGTP和dTTP共4种溶液套装,每种的浓度均为100mM,适合用于PCR、real-time PCR、RT-PCR、cDNA或普通DNA合成、引物延伸反应、DNA测序、DNA标记等各种常规分子生物学反应。
本套装中的dATP、dCTP、dGTP和dTTP溶液均用超纯水配制,并用高纯度NaOH溶液调节pH值至7.0,浓度为100mM,即100mmol/L。
本套装中的dATP、dCTP、dGTP和dTTP溶液不含DNase、RNase、phosphatase和蛋白酶。
本套装中的dATP、dCTP、dGTP和dTTP溶液经测试,可以直接用于PCR等各种常规分子生物学反应。
储存条件:-20℃。
名称:2×BAmp MasterMix(含染料)
货号:WE0106
规格:5ml
BAmp MasterMix由BAmp DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系,浓度为2×。BAmp DNA Polymerase是一种兼具高扩增效率和高保真性的耐热聚合酶。其主要特点是可以扩增长片段DNA,尤其在扩增>10 kb的DNA片段方面,其更加明显,所扩增的片段zuì长可以达到40 kb。该酶具有高度的延伸和校对能力,保真度高于普通Taq酶。预配好的PCR混合液使操作更加简单快捷,可zuì大限度地减少人为误差和污染。的MasterMix配方使整个反应体系非常稳定,重复性好。本产品已加入染料(蓝色),反应结束后可直接进行电泳检测,无需再使用上样缓冲液。扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。适用于构建基因图谱、序列测定及分子遗传学研究等。
产品组成:
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组份
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1ml
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5ml
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2×BAmp MasterMix(With Dye)
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1ml
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5×1ml
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ddH2O
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1ml
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5×1ml
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注意:2×BAmp MasterMix含有BAmp DNA Polymerase,3 mM MgCl2 和400μM each dNTP。
质量控制:
1、经检验无外源核酸酶活性;
2、PCR方法检测无宿主残余DNA;
3、能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因。
使用方法:
以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
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试剂
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50μl反应体系
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终浓度
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2×BAmp MasterMix(With Dye)
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25μl
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1×
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Forward Primer,10μM
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2μl
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0.4μM
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Reverse Primer,10μM
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2μl
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0.4μM
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Template DNA
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<0.5μg
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<0.5μg/50μl
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ddH2O
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up to 50μl
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注意:引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2、PCR反应条件
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步骤
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温度
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时间
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循环数
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预变性
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94℃
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2 min
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变性
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94℃
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30 s
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25-35 个循环
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退火
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55-65℃
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30 s
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延伸
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72℃
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30 s
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终延伸
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72℃
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5 min
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注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,BAmp DNA Polymerase的扩增效率为2.0 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。

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