特别提示:包括代谢性骨疾病固定液(pH7.35)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:代谢性骨疾病固定液(pH7.35)
产品货号:GL0546
产品规格:500ml
用途:
代谢性骨疾病组织的固定
注意事项:
主要由甲醛、磷酸盐缓冲液组成。
储存条件:室温,避光,12个月
根据您的关注的
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名称:Western一抗二抗清除剂(酸性)
货号:YT074
规格:250ml
本品用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后,有时还需要检测tubulin、actin等表达量相对稳定的蛋白作为参照,或检测其它蛋白进行比较。通过使用一抗二抗去除液,充分去除一抗二抗,可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个SDS-PAGE胶相比,不仅省时省力,而且可以消除重新上样而带来的误差,使可比性更强。
使用Western一抗二抗去除液多次重复使用同一张膜,会导致蛋白信号的减弱。但是,本Western一抗二抗去除液,经过多个抗体的检测试验,通常可以重复利用膜3-5次。使用本试剂只需大约40-80分钟即可实现蛋白膜的重复使用,然后可以进行封闭等后续的Western操作。
百奥莱博的不同的Western一抗二抗去除液主要在去除结合的一抗二抗的原理方面略有不同。分别依靠去垢剂、酸性、碱性、还原剂、螯合剂、盐浓度以及一些特殊试剂等的不同组合来解除一抗二抗的结合,同时又不会导致转移到膜上的蛋白的损失。
抗体清除剂选型表:
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产品编号
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YT071
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YT072
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YT073
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YT074
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产品名称
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Western一抗二抗清除剂(强碱性)
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Western一抗二抗清除剂(弱碱性)
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Western一抗二抗清除剂(中性)
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Western一抗二抗清除剂(酸性)
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产品包装
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250ml
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250ml
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250ml
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250ml
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pH
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强碱性
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弱碱性
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中性
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酸性
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对于膜上蛋白的保留效果
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好
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好
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好
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好
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对于一抗二抗的去除效果
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好
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好
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好
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好
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去除一抗二抗所需时间
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15-20分钟
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20-30分钟
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20-30分钟
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40-80分钟
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适用膜的类型
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PVDF和NC
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PVDF和NC
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仅PVDF
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PVDF和NC
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腐蚀性
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强
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弱
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无
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弱
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用于普通的Western检测时蛋白膜上一抗二抗的去除可以任选一种去除液。如果是NC膜,即硝酸纤维素膜时,不宜选用YT071N。从时间角度考虑,强碱性、弱碱性和中性的去除液所需的时间都比较短,可以优先考虑。从价格因素考虑,强碱性的去除液zuì高。从安全性考虑,中性的去除液由于没有腐蚀性而表现出更高的安全性。弱碱性和弱酸性一抗二抗去除液的安全性次之。但只要正确操作,并进行适当防护,使用强碱性的一抗二抗去除液也是完全可行的。
对于特定的抗原和抗体,很难说哪一种Western一抗二抗去除液的效果zuì好。在遇到一抗二抗去除效果欠佳时,可以考虑适当延长一抗二抗去除液的孵育时间,同时确保孵育时的温度不低于20℃。温度过低时一抗二抗的去除效果会下降。同时也可以考虑尝试其它的一抗二抗去除液,以摸索出zuì佳的适合您实验条件的Western一抗二抗去除液。
注意事项:
1. 使用辣根过氧化物酶(HRP),任何一次封闭(blocking)都应当使用5%脱脂牛奶,如果使用碱性磷酸酯酶,任何一次封闭都应当使用酪蛋白(casein)。
2. 为取得zuì佳效果,推荐使用PVDF膜。但硝酸纤维素膜也可以使用本Western一抗二抗去除液。
3. 使用化学发光试剂进行的Western检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的Western检测,例如DAB,NBT/BCIP,不适用于本试剂。
4. 本Western一抗二抗去除液有轻微腐蚀性,使用时请注意防护。
储存条件:室温,有效期一年。
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