BD-EL-H1523 人巨噬细胞刺激蛋白(MSP)酶联免疫吸附测定试剂盒

1．  标准品的稀释：（本试剂系统提供原倍标准品一支，用户请按照说明自行在小试管中倍比稀释）按下表格执行：

2．  根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

3．  加样：1）空白孔：（空白对照孔不加样品，生物素标记的抗GLP-7-37抗体，链霉亲和素-HRP，其余各步操作相同 ；2）标准品孔:加入标准品50μl，链霉亲和素-HRP50μl（标准品中已事先整合好生物素标记抗体，故在操作时不加，只加链霉素-HRP）；3）样本反应孔：加入样本40μl，然后各加入抗- GLP-7-37抗体10μl、链霉亲和素-HRP（空白孔除外）50μl。盖上封板膜，轻轻振荡混匀，37℃温育60分钟。

4．  配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释备用。

5．  洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6．  显色：每孔先加入显色剂A 50μl，再加入显色剂B 50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟。

7．  终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

8．  测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后10分钟以内进行。