人受磷蛋白(PLN)ELISA试剂盒
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人受磷蛋白(PLN)ELISA试剂盒
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人受磷蛋白(PLN)ELISA试剂盒
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本试剂盒仅供课题研究使用
自备材料:
1. 蒸馏水。
2. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3. 振荡器及磁力搅拌器等。
样品收集、处理及保存方法:
1、 血清……操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆……EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液……1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆……将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。
5、 保存……如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
操作注意事项:
● 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
● 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
● 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
● 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
● 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
● 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
● 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
● 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
安全性:
1. 避免直接接触终止液和底物A、B,一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2. 实难中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
试剂的准备:
1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:
500pg/ml(6号标准品) 原倍浓度不用稀释直接加入50ul
250pg/ml(5号标准品) 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液
125pg/ml(4号标准品) 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液
62.5pg/ml(3号标准品) 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液
31.2pg/ml(2号标准品) 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液
15.6pg/ml(1号标准品) 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液
0pg/ml (空白对照) 原倍浓度不用稀释直接加入50ul
2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。
试剂盒性能:
1. 灵敏度:zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
操作步骤:
1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育45分钟。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入100ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育5分钟。避免光照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断与分析:
1、 仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、 以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的LTB4标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的LTB4含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度,再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
人受磷蛋白(PLN)ELISA试剂盒
arginine vasopressin,AVP ELISA Kit AVP 96 Tests/kit 1box 齐一QYBIO
anti-zana pellucida antibody Azp 96 Tests/kit 1box 齐一QYBIO
azurocidin AZU 96 Tests/kit 1box 齐一QYBIO
total amyloid beta peptide Aβ 96 Tests/kit 1box 齐一QYBIO
amyloid beta peptide 1-40 Aβ1-40 96 Tests/kit 1box 齐一QYBIO
amyloid beta peptide 1-42 Aβ1-42 96 Tests/kit 1box 齐一QYBIO
Acetyl Coenzyme A Carboxylase ACC 96 Tests/kit 1box 齐一QYBIO
β Defensins Elisa Kit BDF 96 Tests/kit 1box 齐一QYBIO
Beclin 1 Elisa Kit Beclin 1 96 Tests/kit 1box 齐一QYBIO
B7.H3 gene elisa kit 96 Tests/kit 1box 齐一QYBIO
Brain Derived Neurotrophic Factor ELISA KIT BDNF 96 Tests/kit 1box 齐一QYBIO
antiimmunobulin Binding Protein antibody ELISA KIT BIP.Ab 96 Tests/kit 1box 齐一QYBIO
BCL2 Assacciated X Protein ELISA KIT BAX 96 Tests/kit 1box 齐一QYBIO
Beta Cell Leukemia/Lymphoma2 elisa kit BCL-2 96 Tests/kit 1box 齐一QYBIO
Basic Fibroldast Growth Factor Elisa Kit BFGF 96 Tests/kit 1box 齐一QYBIO
Benzo Pyrene Dihydrodiol Epoxide Elisa Kit BPDE 96 Tests/kit 1box 齐一QYBIO
BZLF1/EBV Zebra gene ELISA Kit BZLF1 96 Tests/kit 1box 齐一QYBIO
BONE Gamma-carboxyglutamic-acid-containing Proteins Elisa Kit BGP 96 Tests/kit 1box 齐一QYBIO
Bone Alkaline Phosphatase Elisa Kit BAP 96 Tests/kit 1box 齐一QYBIO
Brain specific Angiogenesis inhibitor 3 ELISA Kit BAI3 96 Tests/kit 1box 齐一QYBIO
proBrain Natriuretic Peptide Elisa Kit proBNP 96 Tests/kit 1box 齐一QYBIO
BH3 Interacting Domain Death Agonist Elisa Kit (Bid) Bid 96 Tests/kit 1box 齐一QYBIO
B-Lymphocyte Chemoattractant 1 Elisa Kit (BLC1) BLC1 96 Tests/kit 1box 齐一QYBIO
B-Cell Activation Factor Receptor Elisa Kit (BAFFR) BAFFR 96 Tests/kit 1box 齐一QYBIO
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