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PK401 FD快速高尔基染色试剂盒中文说明书

北京启维益成科技有限公司

会员指数：

企业认证：

价格：电议

所在地：北京

型号：PK401

更新时间：2020-08-26

浏览次数：2712

公司地址：北京市海淀区西三旗悦秀路99号通厦公元99一号楼305室

刘桂山(先生)

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产品简介

FD Rapid GolgiStainTM KitFD快速高尔基染色试剂盒神经元和胶质细胞形态学研究的完整Golgi-Cox染色体系使用手册中文版PK401/PK401A仅用于体外研究不能用于诊断或其它用途

公司简介

北京启维益成科技有限公司（Beijing QiWei YiCheng Tech Co.,Ltd.）
北京启维益成科技有限公司成立于2005年12月，由从事生物领域多年销售经验人士创立。目前我公司已经与几十家著名的试剂供应商建立了长期稳定的合作关系，已成为众多国际知名品牌的中国总代理或一级代理商；并且为满足国内客户的最新需求，我们也与时俱进地不断与世界上更多的知名品牌洽谈合作代理事宜；企业的主要目标是把国外有特点的生物前沿产品引进中国，让国内科学研究机构和制药企业尽早使用上最新型的科研产品。

我们代理的产品覆盖细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。
--细胞生物学包含细胞培养，细胞迁移，细胞信号转导等。
--植物学包含植物抗体，植物抗生素，植物组织培养试剂等。
--分子生物学包含表观遗传试剂盒，核酸提取，转染试剂等。
--免疫学包含抗体，各类检测试剂盒等。
--生物化学包含各类生化试剂，化学小分子，常规试剂等。
--蛋白组学包含不同种属的重组蛋白，天然提取蛋白，细胞因子等。
--生物制药与诊断试剂研发方面的试剂包含各类蛋白抑制剂，酶类等。

在公司全体员工的共同努力和国外生产商的支持下，在业务上实现了迅猛发展，相继在上海、武汉、广州、长春、石家庄、哈尔滨等重点城市建立了分支机构或授权服务商，并以专业和优质的服务成为多家世界500强企业的中国区产品供应商，以及中国科学院科研采购平台的中标供货商。2008年以后业务的迅猛发展促进了启维益成内部组织架构的不断优化，我们建立了自己的网络销售平台，业务代表销售平台，针对科研客户与企业客户的不同需求，综合网络平台和业务代表平台的优点，启维益成创建了科研用户与工业客户两支独立的营销团队，分别配备不同的专业技术支持和客服人员，通过网络和业务代表，力求为不同类型的客户提供前沿专业的解决方案。

公司客户遍布中国生命科学基础研究、开发应用、制药、疾病诊断与控制、商品检验检疫、生物技术公司、食品安全以及农林畜牧业等诸多领域。

我们追求目的是与研究机构及合作伙伴之间诚信而专业的对话，力求建立长久合作。我们相信我们精心提供的高效、优质的产品和技术服务，会使您实验设计更有效，实验操作更简便，研究结果更可靠。

放眼未来，公司将努力实现更大的突破，将国外优秀产品不断引进国内，同时积极推动国内的产品销往世界各地。

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产品说明

FD快速高尔基染色试剂盒中文说明书

FD快速高尔基染色试剂盒中文介绍、试剂盒组成、保存温度；FD快速高尔基染色试剂盒中文版使用手册、FD快速高尔基染色试剂盒安全操作注意事项。

注意：以下翻译仅供参考，终使用者请以英文原文说明书为准！

FD Rapid GolgiStain^TMKit

FD快速高尔基染色试剂盒

神经元和胶质细胞形态学研究的完整Golgi-Cox染色体系

使用手册中文版

PK401/PK401A

仅用于体外研究

不能用于诊断或其它用途

I.介绍

Golgi-Cox浸染法是研究神经元和胶质细胞正常和非正常形态有效的方法之一。使用Golgi技术，在药物处理过的动物脑中和因神经疾病死亡的病人脑中发现了神经树突和树突微小的形态改变。然而Golgi染色法的不可靠性且费时已成为这种方法广泛应用的障碍。

FD Rapid GolgiStain^TM Kit(FD快速高尔基染色法)是根据Ramón-Moliner，Glaser和Van der Loos所阐述的方法原理设计的。该试剂盒不仅大地改进并简化了Golgi-Cox技术，而且被证实在显示神经元和胶质细胞，尤其是树突棘的形态细节为灵敏可靠。启维益成的FD Rapid GolgiStain^TM Kit已被广泛测试并用于数种动物脑及去世病人的脑。

结果图片

II.试剂盒组分

室温保存

	PK401A	PK401
溶液A	125 ml	250 ml
溶液B	125 ml	250 ml
溶液C	125 ml x 2	250 ml x 2
溶液D	125 ml	250 ml
溶液E	125 ml	250 ml
琉璃样品回收器	2	2
天然毛画笔	2	2
滴瓶	1	1
塑料镊子	1	1
使用手册	1	1

III.需要但未包括在试剂盒里的物品

1.双蒸水或Milli-Q水

2.塑料/玻璃管或瓶

3.组织学耗材：

明胶包被的显微镜载玻片（Cat.#PO101）

盖玻片

染色罐

乙醇

二甲苯

树胶封片剂Permount®

光学显微镜

IV.安全操作注意事项

1.FD Rapid GolgiStain^TM Kit仅用于体外研究，不能用于诊断或其它应用。

2.试剂盒所包含有试剂是有毒的，吸入或接触皮肤是有害的，如果吞咽可能是致命的。不要用嘴吸。避免吸入和接触皮肤和眼睛。如果接触，立即用大量的水冲洗并求助医生。

3.在化学通风橱下完成实验。操作这些试剂时须穿戴合适的防护服，手套和眼睛和面部防护罩，完成实验之后把手彻底冲洗干净。

V.组织制备

使用此试剂盒前必须仔细阅读以下说明！！

&&所用容器（为塑料材质）必须用蒸馏水冲洗干净。

&&当溶液A和溶液B存在时不能使用金属器具。

&&保持容器密封。

&&用溶液A和溶液B处理的组织和切片，应该避光。

&&除非特别指出，以下流程需在室温下完成。

1.杀死动物之前对实验动物进行深度麻醉。应尽快地从颅骨中取出动物的脑（或死去病人的脑），但操作时必须非常小心以免损伤或压迫组织。

注意

&&除非完全必要，不要对动物进行灌注。如果确实需要对动物进行灌注（用4%的多聚甲醛处理不要超过5分钟），一定不要对组织进行后固定处理。

&&体积较大的脑部样本包括大鼠脑部应该用锋利的刀片切成大约10mm厚的块状。重要提示！

2.用双蒸水或Milli-Q水快速冲掉组织表面的血液。

3.把组织浸泡在由溶液A和B等体积混合的浸渍液中，室温下黑暗保存两周*。浸泡6个小时以后或次日更换新的浸渍液。

*对于大多数情况浸泡2周是足够的。然而，不同的组织类型及组织的大小不同可能需要延长或缩短浸泡时间来达到效果。对于每种类型的组织的浸泡时间应该通过试验获得，但是对于大多数组织浸泡3周是足够的。注意，延长浸泡时间可能增加染色背景。

注意

&&溶液A和溶液B的混合液至少在用之前24小时配制，并不能搅拌。

&&采用以上方案则不会产生沉淀是关键的。

&&制备好的浸泡液在用之前室温黑暗保存可长达一个月。

&&每m³待研究组织至少用5ml浸泡液。注意用较少的浸泡液可能降低染色的灵敏性和可靠性。

&&为取得结果，在浸泡期间每周两次对装有组织的容器可轻轻地左右旋涡（一定不要晃动！）几秒钟。

警告

溶液A和B （含有升汞，重铬酸钾和铬酸钾）接触皮肤是有毒的，如果吞咽可能是致命的。实验应该在化学通风橱中完成。当操作这些试剂时应穿戴防护服，手套和防护面具/眼镜。不要把溶液A和B的废弃物倒进水槽中！把溶液A和B的废弃物收集起来放到一个瓶子中，致电安全办公室或有执照的专业废物处理服务的部门处理些材料。

4.转移组织到溶液C中室温黑暗至少72小时（可长达1周）。24小时后或次日至少更换一次溶液。

5.在-20℃到-22℃的条件下用冷冻切片机将组织切成100-200 um厚的薄片（进行切片之前请仔细阅读第4和5页的信息）。也可用其它型号的显微镜薄片切片机包括滑动切片机和振动切片机（具体细节参看第4和5页）。用样本回收器（试剂盒提供）把样本转移到含有溶液C（试剂盒所提供的滴瓶是方便溶液C滴到载玻片上）的明胶包被的显微镜载玻片上（Cat#PO101）。载玻片上多余的溶液用吸管吸走并用滤纸吸干（载玻片上的溶液必须尽可能地吸干否则切片将从载玻片上脱落下来）。切片可以室温下自然风干（不能用电风扇或电热板使其干燥）。为取得结果，应尽快地完成切片，制备好的切片如果保存于载玻片盒中，室温黑暗条件下长可保存3天。

注意

&&为避免组织受冷冻切片机的损害，并尽可能地保持细胞形态学，组织在进行冷冻切片之前应快速冰冻。比如，组织应按以下描述尽可能地快速冰冻：把组织放在一个塑料匙中慢慢地浸入含有干冰的异戊烷中预冷（为取得结果，温度应保持在-70℃以下并且浸入过程用时1分钟，越慢越好）。组织完全浸入异戊烷之后，使组织在异戊烷中浸几秒钟，然后再放置干冰上1分钟以确保组织能很好地冰冻。进行切片之前不要让组织融化。

&&切片机的型号可能会有不同，但所用的型号确保能切厚的切片（比如100 um）。

&&如果冰冻切片机只有一个温度设置，那么在进行切片之前把温度设置在-22℃至少4个小时。如果有两个温度设置，那么设置槽内温度比样本温度低1℃。请注意大多数情况下-22℃是的温度，然而，为了更顺利地切出切片并没有破碎，不同型号的切片机和不同的组织可能需要更高或更低的槽内温度。

&&对于用冰冻切片机切片，以下几点提示是有益的：1）用蒸馏水把组织固定于样本盘上，但必须确保组织没有融化（可以在干冰上完成）。组织可以被固定在任何类型的组织冰冻介质上包括OCT，但要避免切断介质。不要在OCT中包埋组织，如果组织确实需要包埋，用TFM替代OCT。2）组织固定到样本盘后，放置组织于干冰上10分钟，然后立即把固定有样本的样本盘安装到冰冻切片机上，等5分钟之后进行切片。3）切好的一些切片（不要使用防卷板），如果组织温度过低比如切片显示出与刀片平行的裂缝，先等几分钟再进行下一个切片，否则可继续切。

&&浸泡的脑可用琼脂糖或明胶包埋然后用冰冻切片机切片。然而收集切片时（充满切片槽），必须使用溶液C。否则切片易干燥裂纹。

&&如果用滑动切片机切浸泡的组织，样本盘和刀片都需维持在较低的温度（0℃以下）按照操作手册的描述切片固定在含有溶液C的载玻片上是重要的。

VI.染色步骤

在染色过程中和盖盖玻片之前的任何一步都不要让切片变干

1.用双蒸水或Milli-Q水冲洗切片两次，每次4分钟。

2.把切片置于由1份溶液D，1份溶液E和2份的双蒸水或Milli-Q水组成的混合液中10分钟。

比如：溶液D 10ml

溶液E 10ml

双蒸水 20ml

注意

&&工作液现配现用，每100ml工作液多用于100张切片（比如小鼠脑），根据切片的大小。

&&盛有工作液的瓶子或染色罐必须盖好盖子防止试剂蒸发。