产品中文名称:猪流行性腹泻病毒抗体ELISA试剂盒
产品英文名称:Porcine PEDV ELISA Kit
实验方法:酶联免疫法/酶免法(ELISA)
酶联免疫分析(ELISA试剂盒)组成:
| 试剂盒组成 |
48孔配置 |
96孔配置 |
保存 |
| 说明书 |
1份 |
1份 |
|
| 封板膜 |
2片(48) |
2片(96) |
|
| 密封袋 |
1个 |
1个 |
|
| 酶标包被板 |
1×48 |
1×96 |
2-8℃保存 |
| 标准品 |
0.5ml×1瓶 |
0.5ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
| 标准品稀释液 |
1.5ml×1瓶 |
1.5ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
| 酶标试剂 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
| 样品稀释液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
| 显色剂A液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
| 显色剂B液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
| 终止液 |
3ml×1瓶 |
6ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
| 20倍浓缩洗涤液 |
20ml×1瓶 |
30ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
ELISA操作步骤
方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法:
1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。
2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、 “-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的 阴性对 照OD值的2.1倍,即为阳性。
方法二 用于检测未知抗体的间接法:
用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。
↓
加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)
↓
于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,后一遍用DDW洗涤。
参照说明书(具体说明书请发邮件:Email:shjmswkj@163.com或登录上海劲马生物网站www.shkit.net)
灵敏度:具体请查看说明书.
猪流行性腹泻病毒抗体ELISA试剂盒用途: 科研ELISA检测试剂盒.提供实验代测服务.
科研样品ELISA 检测服务:
凡购买本公司目录任何一种检测试剂盒,您只需将需要检测的动物种类和检测指标(如
传染病系列类、细胞因子类)及标本数量(48T/96T )通知公司业务员即可。在接到客户标本当日起,现货产品一周内将检测报告交到客户手中!欢迎临床医学界和各科研单位在各种项目上与我们开展不同层次的密切合作,以双赢求发展,共同进步,为检测事业的发展积累经验。
人,小鼠,大鼠,猪,兔,犬,其它动物细胞因子;细胞凋亡,活性多肽、自身抗体,血栓与止血,
骨代谢,肝纤维化,肿瘤,激素内分泌、自身抗体科研ELISA检测试剂盒
产品详细情况请来电咨询
品种齐全:人,小,鼠,大鼠,豚鼠,猪,狗,牛,羊,猴,兔,等动物种属
样本齐全:可以为细胞培养上清液,血清,血浆,尿液,组织液,心房水,体液标本等
细胞因子系列检测试剂盒 肿瘤标志物系列检测试剂盒 自身免疫系列检测试剂盒
心脏病系列检测试剂盒 内分泌系列检测试剂盒 心肌梗塞系列检测试剂盒
肝纤维化系列检测试剂盒 传染病系列检测试剂盒 微生物传染病系列检测试剂盒
细胞免疫系列检测试剂盒 优生优育系列检测 特种蛋白系列检测
猪流行性腹泻病毒抗体ELISA试剂盒标本收集注意事项:
1)在收集标本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。
2)我们提倡新鲜标本尽早检测,对收集后及时进行检测。说明:
样品类型:标本必须为液体,不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血浆。每 个标本量收集体积=100ul×检测种类。取材前须向销售人员索要说明书。样品采集:收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测 的标本,储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小 时,-20℃可保存1个月。-70度可保存2个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。四、液体类标本:
包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
1)血清:
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4)细胞培养上清:
A、检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/ 分)。仔细收集上清。
B、检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5)组织标本:
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的 PBS(PH7.4), 用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
猪流行性腹泻病毒抗体ELISA试剂盒标本要求
1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
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