产品编号: HLM2256
产品名称: 脱硫弧菌培养基基础
英文名称: Desulfovibrio Medium Base(DSMZ Medium 63)
生产厂家: 上海哈灵生物科技有限公司
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产品用途: 用于脱硫弧菌的培养
参考标准:
规格: 250g/瓶
储存条件: 常温
保存期限: 3年
培养基配方(每升):
MgSO4(无水硫酸镁) 0.98g
Yeast extract(酵母浸粉) 1.0g
NH4Cl(氯化铵) 1.0g
Na2SO4(硫酸钠) 1.0g
K2HPO4(磷酸氢二钾) 0.5g
CaCl2·2H2O(二水氯化钙) 0.1g
Resazurin(刃天青) 1.0mg
FeSO4·7H2O(七水硫酸亚铁) 0.5g
Na-thioglycolate(巯基乙酸钠) 0.1g
Ascorbic acid(抗坏血酸) 0.1g
pH7.8±0.2(25℃)
使用说明: 称取本品5.28g于1L蒸馏水或去离子水中,每100ml添加20%乳酸钠溶液1ml(1支HLS2212),加热煮沸,充入无氧氮气,分装,121℃高压灭菌15分钟,备用。
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脱硫弧菌培养基基础是什么?
培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素。按所用原料不同,可分为两类:应用肉汤、马铃薯汁等天然成分配制的,称为天然培养基;应用化学药品配成并标明成分的,称为合成培养基或综合培养基。化学试剂中的培养基,大多为合成培养基。由于液体培养基不易长期保管,现在均改制成粉末。培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基(如组织培养基),较长时间的贮存,必须放在2~6。C的冰箱内。
脱硫弧菌培养基基础相关试剂:
中文名称: 盐酸托妥霉素
中文别名: 盐酸均霉素; 盐酸潮霉素; 盐酸潮霉素 A; 盐酸四环素; 四环素盐酸盐; 四环素 盐酸盐; 四环素盐酸盐
英文名称: Tetracycline Hydrochloride
英文别名: [4S-(4alpha,4aalpha,5aalpha,6beta,12aalpha)]-4-(Dimethylamino)-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-octahydro-3,6,10,12,12a-pentahydroxy-6-methyl-1,11-dioxo-2-naphthacenecarboxamide hydrochloride; Tetracycline hcl;
CAS号: 64-75-5;1170-81-6
EINECS号: 200-593-8
分子式: C22H25ClN2O8
分子量: 480.8955
熔点: 223℃
沸点: 799.4°C at 760 mmHg
闪点: 437.3°C
水溶性: 50 g/L
蒸汽压: 5.82E-27mmHg at 25°C
脱硫弧菌培养基基础配制:
1.配料
配方换算→在容器中加入少量水(蒸馏水,自然水)→按照配方称取各种药品(依次加入)→加足所需水量(一药一勺,取药后立即盖上瓶盖)。
2.溶解
淀粉溶解:少量冷水调成糊状加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95-97℃ ,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。
3.调PH
用1N的盐酸或1N的 NaOH把培养基调节到所要求的值。
4.过滤
滤纸或棉花进行过滤。(有时可以省去) [3]
5.分装
一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。
(1)三角瓶
若作静置培养,则100ml培养基/250ml的三角瓶,多不能超过150ml培养基/250ml的三角瓶,否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞,造成染菌;若作摇瓶培养,则15-20ml培养基/250ml的三角瓶,保证通气良好。
(2)试管分装
液体培养基一般装4-5ml,约试管的1/4高度;固体斜面培养基一般装3-4ml,约试管的1/5高度。
6.包扎
分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。
7.灭菌
按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏,培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。
8.摆斜面
灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放,使其凝固成为一个斜面,约占试管长度的1/2。
9.贮存
培养基在30℃下放置一天,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用
脱硫弧菌培养基基础注意事项:
培养基在使用前通过高压或过滤灭菌。防止污染应该注意以下事项:
确认工作细胞库是否被污染,确认毒种工作种子批是否被污染,确认所用培养基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用细菌、真菌及支原体无菌试验来确认并排除。同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。实际生产中,可以从配制好的培养液中取少量加入营养琼脂于恒温培养箱内培养,48小时即可观察有无污染。
其它:高压灭菌设备、过滤除菌设备均应进行验证,确保灭菌和除菌效果;前者应在投产前及其后的每6个月进行验证,后者应在每次除菌前、后进行验证工作(至少应在除菌后进行一次)。
另外,应将有毒区与区严格分开,并有各自的空气净化系统及孵室,有毒区对区应保持相对负压,防止病毒对培养细胞(尤其是细胞库)的污染。
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