磷酸钠缓冲液

产品名称

磷酸钠缓冲液(0.1mol/L,PH5.8-8.0)

产品规格

BR，99%纯度，提供固体：mg(g)级规格、液体：ml(L)级规格

产品包装

瓶装

保存条件

常温

保质期

开盖后两年

产品用途

科研实验

产品来源

外生化试剂供应商，产品有保障

一、在重蒸酚中为什么加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇？
保存在冰箱中的酚，容易被空气氧化而变成粉红色，这样的酚容易降解DNA，一般不可以使用。为了防止酚的氧化，可加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇。8-羟基喹啉是带有淡黄色的固体粉沫，不仅能抗氧化，并在一定程度上能抑制DNase的活性。

二、用酚-氯仿抽提细胞基因组DNA时，通常要在酚-氯仿中加少许异戊醇，为什么？
 异戊醇可以降低表面张力，从而减少气泡产生。另外，异戊醇有助于分相，使离心后的上层含DNA的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定。

三、DNA通常保存在什么缓冲液中？
采用TE缓冲液，Tris-HCl的缓冲系统，加入EDTA可以螯合二价金属离子进而抑制依赖于二价金属离子的DNA酶的活性，对DNA起到保护作用。

四、蛋白印迹中封闭液的作用？
封闭液的作用是封闭未吸附蛋白的部位，以减少非特异性结合背景的影响。常用的封闭液有脱脂奶粉、小牛血清等。

五、简单的克隆载体必需包括什么？
复制起点；选择标记：主要是抗性基因；多克隆位点：便于外源DNA的插入。

六、用酚抽提细胞DNA时，有什么作用？
使蛋白质变性。

七、使用离心机应注意什么？
先应该根据自己的实验需求选择合适的离心机和转子以及离心管，使用离心机时的工作转速不应该超过离心机、转子以及离心管的zui大允许转速。离心前注意严格 平衡样品。安装转子和转子盖要规范、准确。离心时要留人看守，发现离心机异常应立即关闭离心机。离心结束后要安放好转子。

八、分子生物学实验室常用的灭菌方法有哪些？
高压蒸汽灭菌、干热灭菌、化学药剂消毒、过滤除菌

九、在分离DNA过程中，造成DNA分子断裂的因素有哪些？
核酸酶降解；化学降解；物理剪切。

十、在酶切反应缓冲液中为什么加入BSA？

通过提高溶液中蛋白质的浓度，对酶起保护作用。

十一、使用移液器有哪些注意事项？
垂直吸液、慢吸慢放；选择合适的量程范围，不能超过量程使用；选择与移液器匹配的枪头，安装枪头时不要用力太猛；移液器每日用完后，应旋到zui大刻度。

十二、用乙醇沉淀DNA时，为什么加入单价的阳离子？
用乙醇沉淀DNA时，通常要在溶液中加入单价的阳离子，如NaCl 或 NaAc，Na+中和DNA分子上的负电荷，减少DNA分子之间的同性电荷相斥力，而易于聚集沉淀。

十三、在分离DNA时，要使用EDTA，为什么？
EDTA是金属离子螯合剂，螯合二价离子，抑制核酸酶的活性。

十四、在提取RNA时经常使用异硫氰酸胍，有什么作用？
RNA是一种易降解的核酸分子。高浓度强变性剂异硫氰酸胍使细胞结构迅速被破坏，使RNA从细胞中释放出来。同时高浓度异硫氰酸胍还使细胞内的RNA酶失活，使释放出的RNA不被降解。

十五、 磷酸钠缓冲液(0.1mol/L,PH5.8-8.0)
如何将不同构型的质粒DNA区别开？
由于不同构型的DNA在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率不同，ccc DNA的泳动速度快，通过凝胶电泳方法可将不同构型的DNA区别开。