ELISA试剂盒及其它生物学反应中的曲线拟合
发布时间：2014-07-09浏览次数：932返回列表
ELISA试剂盒及其它生物学反应中的曲线拟合
目前上流行的免疫检测拟合方式是“四参数逻辑拟合”，用这种拟合方式往往能够比较的反映浓度和吸光度的曲线关系，
1、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的，所以先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事，否则后面的实验结果无从谈起。
目前上流行的免疫检测拟合方式是“四参数逻辑拟合”，用这种拟合方式往往能够比较的反映浓度和吸光度的曲线关系，
1、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的，所以先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事，否则后面的实验结果无从谈起。
2、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度，并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度，即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内，包括上限和下限。而对于呈S型的标准曲线，尽量要使实验样品的浓度在中间坡度陡段，即曲线几乎成直线的范围内。
3、采用倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度，这样就能够保证标准样品的浓度不会出现较大的偏离。
4、检测标准样品时，应按浓度递增顺序进行，以减少高浓度对低浓度的影响，提高准确性。
5、标准曲线的样品数一般为7个点，但至少要保证有5个点。从而进一步比较准确的获得样品中待测物质的浓度值。但我们做免疫检测很少有时候能够有这么理想的情况，标品浓度和相应OD值往往是"S"型的曲线关系，这时就不能用直线拟合的方式了，而对拟合方法进行选择就是必要的了。枢纽在于你的尺度曲线做到了S形的哪一部门，你想检测的样品浓度在曲线的哪一部门。当然，假如用于定量，仍是在中间一段较好。但建模型是一回事，而用它来定量是另一回事。这些方法固然没有一种方法可以通用，但也都可以用。但并不是说它就是的。 
