1.NaHCO3的作用是什么？

与二氧化碳一起形成缓冲系统，保持培养基PH值稳定。

2.丙酮酸钠的作用是什么？

丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源，尽管细胞倾向于以葡萄糖作为碳源，但是如果没有葡萄糖的话，细胞也可以代谢丙酮酸钠。丙酮酸钠的贮存液浓度一般为50mM，-20℃保存，培养基中的终浓度为1mM.

3.加入HEPES有何好处？

培养基中常用的Buffer system是碳酸氢盐，它可提供营养，但却在生理PH值条件下会降低缓冲能力。而HEPES是一种很强的Buffer，加入HEPES能使细胞培养基在PH7.2-7.6条件下缓冲能力增强。HEPES的贮存液浓度一般为1M，常温保存。培养基中的终浓度为25mM，即5ml 1M的HEPES加入到200ml完全培养基中。

4.酚红的作用是什么？

酚红在培养基中被用来作为PH值指示剂：中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时为紫色。

5.谷氨酰胺的作用是什么？

几乎所有的细胞对谷氨酰胺都有较高的要求。谷氨酰胺脱掉氨基后，可作为培养细胞的能量来源，参与蛋白质的合成和能量代谢。在缺少谷氨酰胺时，细胞生长不良而死亡。所以，各种培养液中都含有较大量的谷氨酰胺。

谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置-20℃冰冻保存，用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4度冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷氨酰胺。

试验操作中常配制高浓度（100倍）的谷氨酰胺溶液（1ml/支），分装使用，-20℃保存。使用时，每支1ml的谷氨酰胺加入到99ml完全培养基中，使其终浓度为2mM培养基。