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小鼠Elisa试剂盒实验原理与步骤

发布时间:2020-11-18浏览次数:1127返回列表

小鼠Elisa试剂盒试验原理:


小鼠Elisa试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。


小鼠Elisa试剂盒用途:

小鼠Elisa试剂盒的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。

小鼠Elisa试剂盒操作流程:


1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作,各区实验服、仪器 、耗材应使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。


2. 为避免RNA降解,样本处理过程应在0-4℃条件下操作,且完成实验后立即上机检测;样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。


3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。


4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀,并应瞬时离心。


5. 小鼠Elisa试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区,并单独存放。


6. 为防止荧光干扰,应避免裸手直接接触PCR反应管,并应避免在PCR反应管上进行任何标记。


7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置;不同批号试剂不能混用。


8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正,淬灭基因选择None。


9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。




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