而传代细胞一般指越过了Hayflick界限，可以在体外进行次的传代扩增的永生化细胞，具有类似于癌细胞的特征。一般而言，在体外培养的过程中，可能会有部分细胞基因的表达调控发生突变，使的细胞的存活不再受到限制而可以扩增，但是这种概率发生很少。此外也可以通过给原代细胞导入一个外源性的致癌基因来实现，常用的有SV40大T抗原，以及人乳头瘤病毒的E6E7基因，也可以通过表达一些已知的和细胞寿命有关的基因，比如端粒酶来实现原代细胞的永生化。永生化后的细胞，即为传代细胞。