ELISA与各类虫药的密切关系
发布时间:2016-01-07浏览次数:763返回列表
Muloon等制备了盐霉素人工抗原SAL-BSA,并以之免疫BALB/c小鼠,筛选出16株单克隆抗体,在此基础上建立了检测盐霉素的Ci-ELISA方法。单抗对盐霉素有很高的选择性,能识别甲基盐霉素而与拉沙里菌素和莫能菌素没有交叉反应。该研究还比较了HPLC和ELISA两种方法,结果表明两种方法有很好的相关性(P<0.001),但ELISA方法更灵敏,其检测限(50ug/kg)较HPLC(100ug/kg)低。Mount等建立了莫能菌素的免疫检测方法,检测限为2ng/ML。我司用混合酸酐法和活性酯法合成了5个马杜霉素人工抗原,以M-KLH免疫家兔制备了兔抗马杜霉素抗血清,抗血清工作浓度为1:1.6X10(3)-1:2.56X10(4),并在此基础上建立了检测马杜霉素的Ci-ELISA方法,用M-C6-OVA作包被原,马杜霉素标准曲线的IC50值为30.1 -32.3ng/ML,斜率为2.20-2.55(介质为PBS-10%甲醇),交叉反应数据表明抗体对马杜霉素的特征结构具有较高的选择性。
ELISA与抗蠕虫药
Brandon等制备了苯并咪唑株单克隆抗体,建立了检测苯并咪唑类抗蠕虫药的Ci-ELISA 方法。该方法可检测出1-8ug/kg浓度范围的苯并咪唑类抗蠕虫药 及其代谢产物和甲基苯并咪唑的残留。且该方法与HPLC方法在检测用芬苯哒唑处理的奶牛肝组织残留时有很好的相关性。当在牛肝脏样品中添加等量的苯并咪唑类药物、亚砜和砜等代谢产物时,阿苯达唑和芬苯哒唑的检测限分别为58 ug/kg和120 ug/kg 。单抗对苯并咪唑抗蠕虫药有很高的选择性。Holtzapple等用碳二亚胺法,戊二醛修饰载体法和疏基修饰载体法合成了多个潮霉素B人工抗原,免疫BALB/C小鼠终筛选出7株抗潮霉素B单克隆抗体,并建立了检测潮霉素B的Ci-ELISA方法。平均批内相对标准偏差7.8%(n=3),批间相对标准偏差7.0%(n=3),低检测限为0.25mg/kg。组织样本在1 mg/kg、2 mg/kg、4 mg/kg的添加水平,回收率分别为83%、82%和91%。单抗对潮霉素B有很高的选择性,与结构相似的氨基糖苷没有交叉反应。Bushway等制备了噻苯达唑多克隆抗体,并建立了检测噻苯达唑Ci-ELISA方法,整个分析费时35min(包括样本准备),能同时分析8个样品,检测限为9ug/kg,批内相对标准偏差5.0%-9.6%,批间相对标准偏差为4.4%-15%。在50-5.010(4) ug/kg添加水平下平均回收率为116%。






