HR7810-50T 植物细胞核提取试剂盒

植物细胞核提取试剂盒适用于从各种植物细胞和各种实体植物组织,如叶片、根、种子等植物组织中提取细胞核。提取过程简单方便,可在1小时内完成。制备的核不仅纯度高。本试剂盒提取的细胞核保持天然活性,可以用于功能研究等各种下游,也可以用于提取核蛋白。本试剂盒适合新鲜样本的细胞核提取,冻存样品由于核可能已经损伤破裂,...
植物细胞核提取试剂盒
产品编号:HR7810
产品组成:
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组份 |
50T |
100T |
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试剂A:植物核提取液A |
100mL |
200mL |
|
试剂B:植物核提取液B |
25mL |
50mL |
|
试剂C:植物核保存液C |
15mL |
30mL |
储存条件:
2-8℃保存。有效期1年。
植物细胞核提取试剂盒说明:
植物细胞核提取试剂盒适用于从各种植物细胞和各种实体植物组织,如叶片、根、种子等植物组织中提取细胞核。提取过程简单方便,可在1小时内完成。制备的核不仅纯度高。
本试剂盒提取的细胞核保持天然活性,可以用于功能研究等各种下游,也可以用于提取核蛋白。
本试剂盒适合新鲜样本的细胞核提取,冻存样品由于核可能已经损伤破裂,回收率会降低。
本试剂盒采用非酶法提取,提取过程简单方便,速度快,可在1小时内完成,而且绝少交叉污染,但是细胞核回收率相比酶法较低。酶法提取制备的植物细胞核,回收率稍有提高,但是耗时较长。如果需要更加快捷的提取试剂盒,可以选择非酶法的提取试剂盒,对提取速度没有要求的话,可以选择酶法提取试剂盒。
试剂盒以外自备试剂和仪器:
● 移液器 ● 离心机 ● 振荡器 ● 匀浆机/匀浆器 ● 涡旋混匀器 ● PBS缓冲液 ● 细胞筛(100μm)
使用注意事项:
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
植物细胞核提取试剂盒使用方法:
1、取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的200mg左右(200mg-500mg均可)的新鲜植物组织样本用手术剪刀尽可能剪碎。
2、加入1mL提取液A用匀浆机充分匀浆。
【注】:
● 匀浆尽可能充分。
3、在匀浆液中加入1mL提取液A,充分混匀,然后将匀浆液用100μm细胞筛过滤。
【注】:
● 没有细胞筛过滤条件,也可将匀浆液稍微静置,吸取上清匀浆液,丢弃大的细胞碎片、纤维等沉淀。
● 有些含粘液较多的样品可能难以吸取,可以将1mL吸头尖稍微减掉一点使用。
● 匀浆液量较少不好过滤时,可以补加PBS缓冲液后过滤。
4、将滤液在100×g条件下离心3分钟,弃沉淀,收集上清。
5、将上清在2000×g条件下离心10分钟,弃上清,收集沉淀。
6、在沉淀中加入500μL提取液B,充分混匀。
7、置振荡器振荡15分钟。
【注】:
● 用振荡器/摇床的较低转速,保持液体有轻微晃动即可。
● 没有低温振荡条件可以不振荡,在2-8℃静置,中间每隔几分钟用移液器吹打混匀。
8、在1000×g条件下离心10分钟。弃上清,收集沉淀。
9、在沉淀中加入200μL冷的核保存液C,混匀。
【注】:
● 也可不用试剂盒中的核保存液,根据下游实验需要用相应其他缓冲液保存或者直接用于下游实验。
10、即可得到细胞核。
11、将上述细胞核样品于2-8℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
【注】:
● 存放后需要收集细胞核使用时,在2000×g离心10分钟收集沉淀即可。
常见问题分析:
● 提取的细胞核纯度为多少?
本试剂盒提取得到的细胞核样本纯度大约90%。
不建议用于蛋白质定位等方面的下游应用。
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