BTN120914 小鼠淋巴细胞分离液

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特别提示：包括小鼠淋巴细胞分离液在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：小鼠淋巴细胞分离液
产品货号：BTN120914
产品规格：200mL



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名称：淋巴细胞分离液1.077
货号：SY0532
规格：100ml|5×100ml
淋巴细胞分离液（Lymphocyte Separation Medium，简称LSM）是一种无菌的即用型分离液，基于Böyum的Ficoll-甲泛影钠溶液做过一些改良，使得操作简单快速且分离效率更高。每100 ml淋巴细胞分离液中含有6.2 g 聚蔗糖（Ficoll）和9.4 g 泛影酸钠，20℃下的密度为1.0770-1.0800 g/ml。不仅适用于外周血淋巴细胞，也可分离其他组织来源的淋巴细胞，包括脐带血和骨髓细胞。

工作原理
去纤维蛋白或肝素化人血以1：1的比例用生理盐水或平衡盐溶液稀释，加在分离液上层，之后低速离心30 min。在离心过程中，差速迁移使其zuì终形成几个细胞分层。聚集在管底的颗粒主要是红细胞和多形核粒细胞，通过梯度迁移至管底。根据其密度的大小，淋巴细胞和其他单个核细胞如单核细胞，以及血小板分布在血浆和LSM两层之间。淋巴细胞可以通过吸取分界层溶液回收，并通过进一步清洗来去除血小板，LSM和血浆。

操作方法
注：此操作流程适用于去纤维蛋白或抗凝血剂处理过的人血。对于其他物种或者其他组织的血液，可能需要对此步骤做出一定的改进。



1）轻轻颠倒瓶子使LSM充分混合；
2）无菌条件转移3 ml LSM到15 ml离心管中；
3）用2 ml 生理盐水混合2 ml去纤维蛋白血液或肝素化血液；
4）小心将稀释血液加入3 ml LSM（室温即可）的上层，使得在血液和LSM间形成一个明显的分层。不要将稀释血液混入LSM中；
5）室温下400g离心15-30min，离心可以沉淀红细胞和多形核白细胞，同时可以在LSM上形成一层单核-淋巴细胞分层，如下图所示（从上到下，依次分为血浆层-淋巴细胞层-LSM层-RBC颗粒）；
6）吸出淋巴细胞层上方2-3 mm内的血浆；
7）吸取淋巴细胞层以及它下面一半的LSM层，并转移到另外一个离心管。加入等体积的平衡盐缓冲液至离心管内的淋巴细胞层中，室温离心10 min，离心速度设定在既不损伤细胞又能沉淀细胞的范围，例如160 – 260 g（清洗去除LSM和降低血小板含量）；
8）用平衡盐缓冲液再清洗细胞一次，zuì后取适当的培养基重悬细胞。

注意事项
1）稀释去纤维蛋白血液或肝素化血液用的生理盐水为无菌液体。
2）为保持淋巴细胞的活性，应该采血后尽快进行分离。分离细胞层实际上是单个核细胞层，包括淋巴细胞和单核细胞。
3）若溶液变浑浊，呈现出不同的黄色或可能有受污染迹象，不可再使用。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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