SY0582 碘化丙啶(PI)染液(即用型)

碘化丙啶(PI)染液(即用型)的品牌是百奥莱博，是优质的探针标记及检测产品，本制品用于生化实验研究等领域，本品质量稳定，价位合理，需要碘化丙啶(PI)染液(即用型)等探针标记及检测产品的客户，请到我公司官网联系我们。...

特别提示：包括碘化丙啶(PI)染液(即用型)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：碘化丙啶(PI)染液(即用型)
英文名称：PI Staining Solution (Ready-to-use)
产品货号：SY0582
产品规格：150T

本品是无菌的即用型PI染色液（溶于PBS），可进入死细胞内与DNA结合，并被活细胞排斥在外，适合用于流式细胞仪进行细胞活力分析。PI单染用FL2通道检测，若与FITC或PE标记抗体/蛋白联合使用FL3通道检测。

碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）是一种常用的细胞核荧光染料，作为一种溴化乙锭（EB）的类似物，能够嵌入碱基对之间实现与双链DNA结合。PI经488 nm荧光激发，产生相对较大的斯托克司频移后，并在617 nm处具有zuì大发射波长。另外，PI不能穿透细胞膜而被排斥在活细胞外，但是可以穿过破损的细胞膜而对核染色。利用以上特性，PI可作为细胞活力分析的荧光探针之一。不仅可单独使用；也可以同Calcein-AM、Hoechst 33258或 Hoechst 33342等活细胞荧光探针一起使用，同时对活细胞和死细胞染色和鉴定。也能够与488 nm激发的荧光素如FITC和PE等联合使用。

使用方法
1）收集细胞，计数，zuì高以1 x 106 cells/100 μl的量加入FACS分选管；
2）加2ml PBS（或HBSS）清洗细胞，300 x g离心5 min，去上清。重复一次。
注：若需要用抗体标记表面抗原，可在此步之后进行。PI不适合与检测胞内分子的抗体联合使用。
3）细胞清洗后，用100 μl流式细胞染色缓冲液（flow cytometry staining buffer）重悬细胞；加入10 μl PI染色液，轻柔混匀，冰上或者室温避光孵育10-15 min。
4）直接上机进行流式分析。注：PI染色后不可再清洗细胞。PI染色孵育后尽快上机检测。

注意事项
1）碘化丙啶（PI）是已知的诱变剂，操作过程中一定要做好防护工作避免与PI的直接接触。另外PI溶液在丢弃之前需要先经过活性炭处理。
2）流式细胞染色缓冲液可配制如下：1×PBS (w/o Ca2+ and Mg2+) + 0.5-1% BSA（或 5% FBS）＋0.1% 叠氮钠。也可根据实验室自身体系调整。
3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件：4℃，有效期半年

根据您的关注的碘化丙啶(PI)染液(即用型)，您可能还对以下产品有需求：



名称：随机引物法DNA探针标记试剂盒
货号：BTN90603A
规格：5次
本试剂盒是基于Feinberg和Vogelstein发明的随机引物标记法而开发出来的即用型DNA探针标记试剂盒，标记过程由双链DNA热变性、随机引物与单链DNA结合、在Klenow DNA聚合酶催化下，引物的延伸合成DNA探针并掺入标记的核苷酸三步组成，可用下面的示意图表示：

本产品对Feinberg和Vogelstein经典方法进行了改良。

产品特点：
1. 提供的标记反应液整合了除酶和模板外的所有成分，简化了反应加样步骤，提高了标记反应的可重复性。
2. 使用无外切活性的Klenow exo- DNA聚合酶，已标记DNA探针不会被酶降解。
3.快速，zuì快1小时即可完成标记反应。
4. 得到的DNA探针比活性高(如果是同位素，可以达到109cpm/μg DNA)，检测灵敏度高。
5. 所需模版DNA量少(只需要10ng以上即可)，DNA可以是各种形状(线状和环状)的、也可以是单链或双链的，长度在100bp以上均可。
6. 得到的探针长度在200-400nt之间，可以用于Southern杂交、Northern杂交、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等。
7. 提供三种标记选择，其中BTN90603A可用于各种同位素标记和其他任何非同位素标记，但需自备标记底物；BTN90603B和BTN90603C可分别用于生物素和地高xīn标记，不需自备标记底物。

试剂盒组成：

成分	规格
2×A型标记反应液(自备标记物型)	50μl(仅A型有)
2×B型标记反应液(生物素型)	50μl(仅B型有)
2×C型标记反应液(DIG型)	50μl(仅C型有)
dATP,2mM	10μL(仅A型有)
dTTP,2mM	10μL(仅A型有)
dGTP,2mM	10μL(仅A型有)
dCTP,2mM	10μL(仅A型有)
Klenow exo-聚合酶(2U/μL)	5μl
超纯水	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在一干净的硅化的塑料离心管中加入下列成分：

成分	用量
模板DNA	50-150ng
2×标记反应液(ABC三种之一)	10μl
超纯水	补水到15μl

注意：非同位素标记物由于疏水性强，容易与常用的塑料离心管表面非特异性结合，所以一定要使用硅化的塑料离心管。模板DNA并非越多越好，因为模板会在杂交反应中跟标记的探针杂交，竞争性地抑制探针跟靶分子的杂交。
2. 沸水浴5-10分钟，或在PCR仪上100℃加热5-10分钟使DNA模版充分变性，立即放冰上待用。注意：如果PCR仪器不能设置到100℃，99℃加热5分钟也可。
3.高速离心数秒使所有液体集中在管底，根据试剂盒类型加入下列成份：

试剂盒类型	成分及用量
BTN90603A型	dATP、dGTP、dCTP各1μl(共3μL，浓度均为2mM) 自备的2mM dTTP/标记dUTP混合物(见注)1μL 1μl Klenow exo聚合酶
BTN90603B型	1μl Klenow exo聚合酶 4μl超纯水
BTN90603C型	1μl Klenow exo聚合酶 4μl超纯水

注：上表中的dTTP/标记dUTP混合物中dTTP和标记的dUTP的总浓度为2mM(在20μL体系中混合液的终浓度为0.1mM，dTTP与生物素或DIG标记的dUTP的比例zuì好为65:35)。由于空间阻碍，并非标记生物素或DIG标记的dUTP越多灵敏度越高，一般dTTP与标记dUTP的比例在65：35为zuì佳。但如果使用自备的其他标记核苷酸，如fluorescein、hydroxycoumarin、resorufin和aminoallyl标记的dUTP，则用户需要自己摸索其与dTTP之间的zuì佳比例，如果使用32P标记的dUTP，则比活zuì好为3000Ci/mmol，浓度为好为10uCi/μL，并且不需要加入dTTP。
4. 轻柔吹打混匀。如有液滴沾在管壁上，高速离心数秒使所有液体集中在管底。
5. 37℃保温1-20小时。标记效率跟模版量和保温时间相关，具体见下表：

模版DNA用量	1小时后探针合成量	20小时后探针合成量
10ng	80ng	900ng
30ng	150ng	1.35μg
100ng	350ng	1.65μg
300ng	750ng	2.2μg
1μg	1.3μg	2.6μg
3μg	1.6μng	2.6μg

6. 加1μl自备的0.5M EDTA(pH8.0)终止反应，立即放冰上待用或放-20℃保存一年。用前需要加热100℃ 5分钟使DNA探针变性成单链，然后直接加入到杂交反应液中即可。如果电泳检测，标记产物将是弥散状态。
 注意：本方法标记核苷酸掺入率高，因此可以不经纯化直接使用。如果需要纯化，注意不要用酚抽提法纯化非同位素(生物素、DIG和其他等)标记的DNA探针，因为这些标记分子疏水性强，能使标记的DNA进入疏水的有机相而丢失，但可以用乙醇沉淀和Sephadex G50回收(可另购非同位素探针柱式纯化试剂盒)。对比活高的同位素探针，由于其其不稳定，因此应该立即使用，不要长久放置。

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货号	名称	规格
BTN90604A	PCR法DNA探针标记试剂盒	5次
BTN90604B	PCR法DNA探针生物素标记试剂盒	5次
BTN130997	Sephadex G50介质	10mL
BTN90605B	TdT加尾法DNA生物素标记试剂盒	5次
BTN90603C	随机引物法DNA探针地高xīn标记试剂盒	5次
BTN121122	柱式探针纯化试剂盒	10次
BTN130904	超级杂交液(Oligo探针)	10mL

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