SY0181 EGR1-GFP报告基因质粒

北京百奥莱博供应的EGR1-GFP报告基因质粒用于科研试验，EGR1-GFP报告基因质粒是我司众多优质报告基因检测之一，质量堪比同类进口产品，价格非常优惠，目前正热烈促销中，恭候您的咨询订购。...

特别提示：包括EGR1-GFP报告基因质粒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：EGR1-GFP报告基因质粒
英文名称：EGR1 GFP Reporter Plasmid
产品货号：SY0181
产品规格：1μg

EGR1-GFP报告基因是用于检测EGR1转录活性水平为目的的报告基因。早期生长反应基因1(early growth response gene 1 , EGR1) 为早期生长反应基因家族重要成员，其蛋白产物是一个59KD的锌指样转录因子。EGR1的目的基因是分化和有丝分裂所必须的。

EGR1-GFP报告基因主要检测细胞中ERG1相关信号通路、药物研究、基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMEGR1-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个EGR1结合位点，可以地检测EGR1的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得EGR1-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM EGR1 -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMEGR1-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

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货号	名称	规格
YT274	β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒	200次
SY0059	NF-κB萤火虫荧光素酶报告基因质粒	1μg
SY0088	CREB-Luc报告基因质粒	1μg
SY0095	AhR-Luc荧光素酶报告基因质粒	1μg
SY0097	Pax6-Luc荧光素酶报告基因质粒	1μg
SY0098	p53-Luc荧光素酶报告基因质粒	1μg
SY0124	ELK1-Luc荧光素酶报告基因质粒	1μg

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名称：萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒
货号：SY0058
规格：100T|500T|1000T
报告基因检测是现代分子生物学研究领域中分析结构基因旁侧区域潜在的顺式元件（如启动子、增强子和沉默子等）和反式作用因子相互作用关系的一种重要工具。本萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒（Firefly Luciferase Reporter Gene Aassy Kit），是通过萤火虫荧光素（luciferin）为底物来检测萤火虫荧光素酶。荧光素酶在 Mg2+和 O2 参与下催化荧光素氧化成oxyluciferin，在荧光素的氧化过程中，发出生物荧光（bioluminomescence），然后通过化学发光仪或液闪测定仪测定生物荧光。

产品特点
1）简便，快捷。
2）灵敏度高，可检测10-20 mol的荧光素酶。
3）安全，非放射性。
4）酶的浓度线性范围可达8个数量级。

产品组份：

组分	100T	500T	1000T
细胞裂解液	60ml	60ml×5	60ml×10
萤火虫荧光素酶检测试剂	10ml	10ml×5	10ml×10

保存：未拆封试剂盒-20℃避光保存，有效期为 6 个月。-70℃避光保存，有效期为一年。试剂盒内萤火虫荧光素酶检测试剂（Firefly luciferase assay reagent）避光保存，不能反复冻融。

实验步骤

1. 细胞裂解：
1）将转入报告基因的细胞中的培养基移除，加PBS轻轻洗涤。按如下方案加入细胞裂解液（Cell lysis buffer），然后将培养板放在微型振荡器上室温振荡15min，充分裂解细胞。

细胞培养板	96孔板	48孔板	24孔板	12孔板	6孔板
细胞裂解液（µl/孔）	30µl	60µl	120µl	250µl	500µl

【注】：裂解产物可室温保存6h，4℃保存16h，-70℃可长期存放。（裂解产物不能多次反复冻融）。
2）将充分裂解后的裂解产物，10000-15000rpm离心3-5min。离心后将上清液移入新的EP管中进行后续检测。
2.荧光素酶检测：
1）按照仪器说明书要求将荧光测定仪打开，设定参数，测定时间为10s，测定间隔为2s。
2）将样品按照20～100µl的体积（如果样品量足够，请加入100µl）加入测量管中（保持每次样品的加样量一致），另外加入萤火虫荧光素酶检测试剂（Firefly luciferase assay reagent）混匀 2-3 次（不能漩涡混匀），充分混匀后测定RLU（Relative light unit），同时设置细胞裂解液（Cell lysis buffer）为对照孔。

注意事项
1）温度会对酶的活性会产生影响，因此所有试剂应放置室温后再使用。
2）如用单管荧光测定仪测定，每个样品与测定试剂混合后到测定前的时间应保持一致。
3）萤火虫荧光素酶催化的生物发光的zuì强发光波长为 560nm。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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