CZ003 磁珠法游离DNA提取试剂盒

产品简介
磁珠法游离DNA提取试剂盒由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,仅用于生物化学研究方面,我公司专注于DNA提取纯化产品的研发、生产和供应,为您提供的磁珠法游离DNA提取试剂盒质量可靠,批间差小,且价格公道,热切盼望您选购我们的产品。...
产品详细介绍
特别提示:包括磁珠法游离DNA提取试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:磁珠法游离DNA提取试剂盒
英文名称:Circulating DNA Kit
产品货号:CZ003
产品规格:20次/100次/10次(L)/50次(L)
产品简介:
本产品采用超顺磁性微球和预制缓冲液,以快速的方法从0.2~5 mL血清或血浆等无细胞体液中提取游离DNA。提取的产物质量稳定可靠,可用于PCR扩增、测序和检测等后续实验。
操作流程:
准备物品(以1 mL反应体系为例):
● 1.5 mL离心管、15 mL离心管:1个/样品
● 单通道移液器:200 μL、1000 μL
● 漩涡振荡器
● 恒温金属浴(或水浴锅):55℃
● 磁性分离器:可选用百奥莱博磁性分离器
● 异丙醇(AR):0.5 mL/样品
● 75%(v/v)乙醇:3.8 mL/样品
次使用前:
● 在Proteinase K干粉中加入量(见管身标签)的Solution A,混匀后保存于2~8℃,或分装后保存于-20℃。
● 75%(v/v)乙醇:用户自备。
操作步骤:
以1 mL样本量为例(若样本量≤5 mL,其反应管规格、缓冲液加入量请参考表1;若样本量>5 mL,请咨询技术支持)
1.裂解:取一个新的15 mL离心管,加入100 μL Proteinase K,再依次加入1 mL血浆或血清样本和800 μL Lysis Buffer,zuì大转速漩涡振荡混合均匀后,将离心管置于55℃加热10 min(每隔5 min漩涡震荡10 s)。
2.结合:向上述离心管中加入0.5 mL异丙醇,漩涡震荡30 s后,再加入100 μL Magnetic beads,zuì大转速漩涡震荡混匀后静置10 min,然后将离心管置于磁性分离器上至溶液澄清,用移液器吸去上清液,并取下离心管。
3.洗涤:
(1)加入3 mL Washing Buffer,漩涡震荡 1 min,使磁珠充分重悬,将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清,用移液器移去上清液并取下离心管。
(2)加入3 mL 75%(v/v)乙醇(用户自备),漩涡震荡1 min,使磁珠充分重悬,将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清,用移液器移去上清液并取下离心管。
(3)加入800 μL 75%(v/v)乙醇(用户自备),转移上清液至新的1.5 mL离心管中,漩涡震荡1 min,使磁珠充分重悬,并于室温下静置1 min,然后将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清,用移液器移去管盖及管底溶液。
注:步骤(3)可用小量程的移液器尽量除尽洗涤液。
4.干燥:保持离心管于磁性分离器上,于室温下静置10 min后,取下离心管。
注:干燥过程中若发现反应管中有液体残留时,可用小量程移液器吸弃液体。
5.洗脱:加入50 μL 55℃预热Elution Buffer,漩涡震荡1 min或用移液器缓慢吹打磁珠50次,使磁珠充分重悬,于55℃加热5 min后,将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清,转移上清液至新的1.5 mL离心管中,此即为纯化得到的游离DNA,可保存于-20℃。
注:本产品的洗脱体积可低至20 μL,但需注意洗脱效率与洗脱液体积有关,洗脱液体积越大,洗脱的核酸总量越多,但浓度越低。
注意事项:
1.操作之前,请务必认真阅读本产品手册。
2.提取效果与样本质量有关,应避免对样本进行反复冻融。
3.应避免对磁珠进行冷冻、离心等操作。
4.磁珠取用前应充分重悬均匀。
5.磁珠干燥前,应用移液器吸尽洗涤液。
6.应避免磁珠过度干燥,否则会严重降低核酸洗脱效率。
7.建议使用质量较好的离心管和移液器吸头,避免因粘附磁珠而造成损失。
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名称:柱式植物DNA提取试剂盒
货号:BTN60602
规格:50次
本试剂盒是在植物DNA提取试剂盒基础上开发的柱式植物基因组DNA提取产品,可以用于多种植物基因组DNA(含叶绿体和线粒体DNA)的快速提取。
产品特点:
1. 纯度高,不含污染和抑制剂,可以直接用于酶切、PCR、real-time PCR、mμLtiplex PCR、RAPD、RFLP、AFLP、Southern Blotting,microsatellite analysis等各种后续分子生物学实验。
2.产率一般在3-30μg/100mg样品。OD260/280一般在1.8以上。DNA片段长度一般在40-50 Kb左右。
3.适用范围广,可以使用于大多数植物的各种组织。
4. 不会发生离心柱堵塞现象。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
溶液A | 40ml |
溶液B | 20ml |
溶液C | 50ml |
离心吸附柱 | 50套 |
通用洗柱液 | 50ml |
DNA洗脱液2.0 | 10ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
使用方法:
注意:溶液A和溶液B容易产生沉淀,溶液B比较粘稠,用前均需要放置在65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低,用前充分摇匀。
1. 65℃预热柱式植物DNA提取试剂盒溶液A,待其沉淀溶化后,充分混匀,取0.75mL加入到10mL塑料离心管中并放置于65℃待用。
2. 称取植物组织0.1-0.5 g左右,剪成微小的碎片,加入到有溶液A的10mL塑料离心管中并短暂匀浆。也可以液氮研磨后将粉末加入到管中(建议不要在陶器或玻璃研钵中破碎细胞,因为二氧化硅会非特异地吸附DNA,降低DNA 回收量。但可以在塑料研钵中研磨)。匀浆过程中将产生大量泡沫,属于正常现象。
3. 将匀浆液(包括植物碎片)全部转移到新的1.5mL塑料离心管(此时匀浆液较为粘稠,可将枪头剪去一截后转移上清,不能吸取的植物碎片可以小心倒入)。
4.在匀浆液中加入0.5倍体积预热的溶液B到离心管中,颠倒数次混匀。此时溶液中可能有白色丝状悬浮物产生。(由于溶液B比较粘稠,可以将1mL枪头剪去一截再吸取)。
5. 65℃水浴3~5分钟。如果室温放置,DNA产量会降低10-20%。
6. 加入200μl自备lǜ仿,震荡混匀10-30秒,此时溶液将呈乳白色。
7. 12000rpm室温离心2分钟。此时上清液将变得透明,中间层有白膜。小心转移上清液到一个新的1.5mL塑料离心管中,避免触及中间层的白膜。
8. 加入1.5倍体积的溶液C,颠倒混匀后全部转移到离心吸附柱中,室温放置至少2分钟。
9. 12000rpm室温离心1分钟,DNA 将吸附在离心吸附柱的膜上,倒弃收集管中的穿透液。
10. 将0.5mL通用洗柱液加入离心柱中,12000rpm室温离心1分钟,弃穿透液。
11. 重复上步操作一次。
12. 空甩半分钟去除残留液体,将离心吸附柱转移到新的1.5mL离心管中。
13. 将离心吸附柱放置在一新的1.5mL塑料离心管中,加50-100μL DNA 洗脱液2.0,室温放置3~5分钟。
14. 12000rpm室温离心1分钟即得植物DNA溶液。
15. 由于本产品使用的离心吸附柱吸附DNA的能力较强,可以重复上步操作一次,以洗脱得到更多的DNA。
16. 直接取5-10μL电泳检测DNA,其余放冰箱备用。
使用效果:

图注:用本产品提取0.1g牵牛花叶片基因组DNA,60μL洗脱液洗脱,取15μL检测。泳道3和4为本产品提取效果,泳道1和2为某公司同类产品提取效果。本公司提取的牵牛花叶片基因组DNA 条带清晰,产量高。M为本公司Marker,染料为本公司绿如蓝核酸染料(BTN70909)。

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