SY0372 8%预制胶，12孔

北京百奥莱博供应的8%预制胶，12孔用于科研试验，我公司专注于蛋白质研究产品的研发、生产和供应，为您提供的8%预制胶，12孔质量可靠，批间差小，且价格公道，热切盼望您选购我们的产品。...

特别提示：包括8%预制胶，12孔在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：8%预制胶，12孔
英文名称：Precast Protein Gels, 8%, 12 wells
产品货号：SY0372
产品规格：1盒（10块）

本品通过pH中性缓冲液制备，丙烯酰胺与甲叉丙烯酰胺配比是29：1，其规格为浓缩胶5%，分离胶8%，胶板尺寸10×8cm，凝胶厚度1 mm，12孔梳齿，单孔zuì大上样量30 µl。电泳及转膜缓冲液使用传统的tris-glycine缓冲液，蛋白条带直且尖锐。本品兼容Biorad，天能及北京六一的mini胶电泳槽及其他任何胶板宽度在10 cm的电泳槽。

N,N-亚甲基双丙烯酰胺（甲叉丙烯酰胺）交联剂的浓度不同从而分离不同大小范围的蛋白质。与传统实验室自行配制凝胶相比，使用预制胶具有以下优点：1）即开即用，不用再配制N种溶液、灌胶、等胶凝固，节省了宝贵的时间和精力；2）不用接触几种具有积累性神经毒性的试剂（丙烯酰胺/甲叉丙烯酰胺：神经毒性和遗传毒性；TEMED：强神经毒；过硫酸铵：可严重损伤呼吸道，眼睛，皮肤）；3）大规模生产，胶与胶之间重复性好，质量稳定，不像手工灌胶那样结果差异大。

使用方法
1）剪开包装取出胶，撕去胶板底端胶纸，将预制胶固定在电泳槽中，加入电泳缓冲液没过梳齿部位，双手按住梳子左右部位将其平稳缓慢（一定要慢，否则会将胶齿拔断或拔歪）拔出，在前后板的上方中央卡上一个“V”型卡（通过加固前后板，不仅可防止枪头上样用力过猛撬开两板产生缝隙，还可稳定跑胶质量，电泳过程中“V”型卡不可取出），上样后进行电泳，电泳后取出胶板，用镊子或小螺丝刀沿左右两板间的缝隙将两板别开，将胶取出，弃去塑料板。
2）电泳：使用《分子克隆》的 tris-glycine电泳缓冲液（tris 25 mM, glycine 250 mM, SDS 0.1%）。推荐使用低压100V，15min换高压150V跑至电泳结束。
3）转膜：使用《分子克隆》的 tris-glycine 电转缓冲液（含 20%甲醇或乙醇），操作与实验室原有操作完全相同。

注意事项
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）本品含有的部分试剂如丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺有毒，对人体有害，请注意适当防护。
3）电泳及电转缓冲液建议使用新配制的缓冲液，试剂纯度不够，反复使用或长期放置过的缓冲液会降低电泳效果。传统《分子克隆》的tris-glycine 电泳及电转缓冲液是不用 NaOH 和 HCl 调整 pH ，因为引入的钠离子和氯离子会影响电泳效果。
4）电泳前请务必撕去胶板底端的胶纸，否则电路不通，无法电泳。
5）拔梳子时zuì好浸没在电泳缓冲液中拔，一方面由于液体润滑梳子更容易拔，另一方面不会产生气泡。另外拔梳子时越慢越好，如此可防止梳齿被拔断或拔歪。
6）在电泳后开板取胶时，用小号一字螺丝刀或中号镊子插入左右两板间缝隙，用力搬动，两板即可应声分开，此时两板底部还不能分开，要通过掰开两板取出凝胶。
7）在上样前，使用“V”型卡加固前后板（加样和电泳过程“V”型卡不可移动或拔出），使用时只需将一个“V”型卡“轻轻地”（不必卡到底，不掉即可）卡在前后板的上端中间区域，可确保上样不会产生板胶间的缝隙从而导致样品泄露，电泳时“V”型卡不必取出如此可有助于稳定跑胶质量。
8） 本预制胶对于Biorad和天能的电泳内外槽存在微小泄露，可通过两种方式解决本问题：一是内槽加满缓冲液，外槽液面加至距内槽液面3-5mm，从而可防止在电泳过程中内槽液面逐步下降。另一种解决方式是将Biorad的硅胶封闭垫取出后反过来安装，使其没有凸起的平滑面朝外，从而防止漏液。

储存条件：4℃，有效期一年。

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BTN130542 水蛭素溶液(2万ATU/mL) 0.1mL
BTN81212C 一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(低pH) 30次
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WE0322 IHC复染试剂(改良型苏木素) 10ml
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名称：SDS-PAGE凝胶制备试剂盒
货号：YT047
规格：可制30-50块胶
本试剂盒提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂，用户只需自备制胶器具和蒸馏水，即可配制PAGE胶(即聚丙烯酰胺凝胶)。SDS-PAGE凝胶配制试剂盒不仅可用于配制SDS-PAGE凝胶，也可用于配制非变性(native)PAGE凝胶。本试剂盒约可配制30-50块常规大小的PAGE胶。

产品组份：
30% Acr-Bis (29:1)————100ml
1M Tris-HCl, pH8.8————100ml
10% SDS——————————5ml
过硫酸铵—————————0.5g
TEMED——————————0.5ml
1M Tris-HCl, pH6.8————15ml

注意事项：
1. 过硫酸铵配制成10%溶液后，应当-20℃保存。同时应尽量减少室温存放时间，以防失效。
2. TEMED易挥发，使用后请盖紧瓶盖。另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切，可通过适当调节TEMED的用量，控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度。
3. TEMED易燃，有腐蚀性，请注意防护。

储存条件：4℃，有效期6个月。

名称：考马斯亮蓝染色试剂盒(常规法)
货号：YT056
规格：1盒
本品采用了zuì经典的考马斯亮蓝染色和脱色方法，以考马斯亮蓝R250为染料，可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白电泳凝胶的常规染色和脱色，或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。

使用本试剂盒，采用常规染色脱色方法累计时间达到2-3小时后可以观察到蛋白条带；采用快速染色脱色方法20分钟左右即可观察到蛋白条带。观察到zuì清晰的蛋白条带则需染色脱色更长时间。本试剂盒中的染色液和脱色液经过改良，不含有毒的甲醇，但含有刺激性气味的乙酸。

试剂盒组分：
考马斯亮蓝染色液————————100ml
考马斯亮蓝染色脱色液——————500ml

储存条件：室温，有效期一年。

名称：RIPA裂解液(强)
货号：WE0258
规格：100ml
  RIPA裂解液是一种传统的组织以及细胞快速裂解液，主要用于从动物组织和哺乳动物细胞中抽取可溶性蛋白，可用于裂解贴壁细胞和悬浮细胞。按照其裂解液的强度可以分为强、中、弱三类，具体特点和差异请参考附表2，可根据实验需求选择相应产品。RIPA裂解液(强)可以有效提取细胞核、细胞膜和胞浆蛋白，提取的蛋白可应用于蛋白定量、Western Blot、IP等检测分析。
  RIPA裂解液(强)的主要成分为50mM Tris(pH 7.4)，150mM NaCl，1%Triton X-100，1% sodium deoxycholate，0.1% SDS以及sodium orthovanadate，sodium fluoride，EDTA，leupeptin等。


注意事项：
1、为防止蛋白降解，所有的操作尽量在冰上进行。
2、使用RIPA裂解液得到的蛋白样品，可采用BCA法进行蛋白定量，以测定蛋白浓度。产品可单独向本公司订购，如：WE0276 BCA蛋白定量试剂盒。本品含有高浓度的去垢剂，不能用Bradford法进行蛋白定量。
3、建议在使用RIPA裂解液前，向溶液中加入蛋白酶抑制剂或磷酸酶抑制剂，以防止蛋白降解，或保持蛋白的磷酸化状态。产品可单独向本公司订购，如：WE0259 蛋白酶抑制剂混合物，WE0256 磷酸酶抑制剂混合物。
4、若需获得更高浓度的蛋白，应减少哺乳动物蛋白抽提试剂的使用量。
5、对于培养瓶中的贴壁细胞，推荐先使用常规方法消化细胞，再参考悬浮细胞蛋白提取步骤操作。
6、对于离心获得的细胞，若不确定细胞体积，可根据细胞数量计算RIPA裂解液的使用量。如5×106个Hela细胞约需加入500μl RIPA裂解液，以此类推。

使用方法：

一、细胞样品
贴壁细胞蛋白抽提
1、小心倾去贴壁细胞的培养液。
2、可选步骤：若培养基中含有酚红或其他可能影响实验结果的物质，请先使用预冷的PBS漂洗细胞。
3．加入适量RIPA Lysis Buffer(Strong)(使用前2-3分钟内加入蛋白酶抑制剂)，试剂使用量请参考附表1，在冰上用枪头吹打贴壁细胞。

表1 贴壁细胞RIPA 裂解液使用量推荐表

细胞培养板类型或培养面积	RIPA 裂解液使用量
100 mm	500-1000μl
60 mm	250-500μl
6孔培养板	200-400μl /孔
24孔培养板	100-200μl /孔
96孔培养板	50-100μl /孔

4、将裂解液转移至新的离心管中，冰上孵育20分钟，使细胞充分裂解。
5、14000×g离心10分钟。转移上清液至新管中，进行下一步分析。

悬浮细胞蛋白提取
1、悬浮细胞，2,500×g离心5分钟，弃去上清。
2、可选步骤：若培养基中含有酚红或其他可能影响实验结果的物质，请使用PBS漂洗细胞。漂洗后的细胞悬浮液2,500×g离心5分钟，弃去上清。
3、加入适量RIPA Lysis Buffer(Strong)(使用前2-3分钟内加入蛋白酶抑制剂)，每5×106细胞加入约200-500μl RIPA Lysis Buffer(Strong)，吹打均匀。
4、冰上放置20分钟，使细胞充分裂解。
5、14000×g离心10分钟。转移上清液至新管中，进行下一步分析。

二、组织样品
1、取适当的RIPA Lysis Buffer(Strong)，在使用前2-3分钟内加入蛋白酶抑制剂。
2、称量实验组织的重量，按照1:10(g/ml)的比例加入RIPA Lysis Buffer(Strong)后将组织剪成细小碎片，用电动匀浆器匀浆处理。若需要浓缩的蛋白提取物，可适当减少组织蛋白抽提试剂使用量。
3、冰上孵育20分钟，使细胞充分裂解。
4、14000×g 离心10分钟。转移上清液至新管中，进行下一步分析。
注：RIPA裂解液的裂解产物中可能会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为基因组。

表2 蛋白裂解液性能、参数比较

目录号	WE0258	WE0257
名称	RIPA裂解液(强)	RIPA裂解液(中)	RIPA裂解液(弱)	SDS裂解液
裂解强度	强	中	温和	强
有效裂解成分	1%Triton X-100， 1%脱氧胆酸钠, 0.1% SDS	1% NP-40， 0.5%脱氧胆酸钠 , 0.1% SDS	1% NP-40， 0.25%脱氧胆酸钠	1%SDS
膜蛋白提取	很好	较好	一般	很好
胞浆蛋白提取	很好	很好	很好	很好
核蛋白提取	很好	较好	较好	很好
主要用途	WB，IP	WB，IP	WB，IP，CO-IP	WB，CHIP

储存条件：2～8℃

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