QN2140 BL21pLysS感受态细胞

BL21pLysS感受态细胞的品牌是百奥莱博，是优质的克隆与表达产品，本制品用于科研试验，我公司专注于克隆与表达产品的研发、生产和供应，为您提供的BL21pLysS感受态细胞质量可靠，批间差小，且价格公道，热切盼望您选购我们的产品。...

特别提示：包括BL21(DE3)pLysS感受态细胞在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：BL21(DE3)pLysS感受态细胞
英文名称：BL21(DE3)pLysS Competent Cells
产品货号：QN2140
产品规格：10×100μl|20×100μl

本公司生产的BL21（DE3）pLysS感受态细胞是采用大肠杆菌BL21（DE3）pLysS菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测，转化效率可达10⁷，-70℃保存6个月转化效率不发生改变。

基因型：F-,ompT,hsdSB(rB-mB-),dcm,gal(DE3),pLysS,Cmr
特点：该菌株带有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。质粒pLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

储存条件：-70℃保存，必须加干冰运输。自收货之日起液氮保存至少一年，-70℃保存至少6个月。

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货号	名称	规格
BTN140576	pression/BTN140576.html" target="_blank">大肠杆菌DH10Bac化学感受态细胞	0.1mL*10
BTN90801A	pression/BTN90801A.html" target="_blank">一站式TA克隆试剂盒	20次
BTN120687	pression/BTN120687.html" target="_blank">环孢霉素A	1mL
BTN100838	pression/BTN100838.html" target="_blank">遗传霉素(G418)干粉	100mg
YT413	pression/YT413.html" target="_blank">溶菌酶(>20KU/mg)	0.5g
YT441	pression/YT441.html" target="_blank">pUCm-T载体	20次
YT455	pression/YT455.html" target="_blank">STAT3荧光素酶报告基因质粒	1μg

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名称：酵母电转感受态细胞制备液
货号：BTN81201
规格：20次
本酵母电感受态细胞制备试剂是一种通过化学处理酿酒酵母和裂殖酵母电感受态细胞，使之不但马上能用于电转化，还能长期放置后用于电转化。

产品特点：
1. 操作简单，单溶液制备，除酵母培养的时间外，整个操作只需要10余分钟。
2. 制备得到的感受态细胞可以-80℃保存一年，方便多次使用，免去每次转化都要新鲜制备感受态细胞。
3. 主要用于酿酒酵母S.cerevisia和S.pombe，但能否用于其他酵母(如C.albicans、Pichia pastoris等)不详。
4. zuì高转化效率可达到0.2-1×106个转化子/ug质粒DNA。
5. 得到的感受态细胞可以用各种线性或环状酵母穿梭质粒DNA进行转化，例如YIp，YRp，YCp，YEp和YAC等。
6.可以用于酵母双杂交、定点突变、基因破坏、等位突变基因修复等实验。
7. 本试剂盒足够处理200mL酵母菌液，制备40管酵母感受态细胞。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

自备试剂：
灭菌水，SD液体培养基(不含氨基酸的0.67% Bacto Yeast Nitrogen base，2%葡萄糖)，SD固体培养基(在SD液体培养基中再加2%琼脂)，YPD液体培养基(1% Bacto Yeast Extract，2% Bacto Peptone，2%葡萄糖)，YPD固体培养基(在YPD液体培养基中再加2%琼脂)

使用方法：

一：电感受态细胞的制备
 说明：按本方法制备1 管酵母电感受态细胞就需要OD600达到1.0的新鲜酵母培养液5mL，用户需根据制备的酵母感受态细胞数量决定培养细胞的体积。下面操作只是以10mL酵母为例说明。
1.培养S.pombe细胞：挑取新鲜单菌落(4℃放置不超过3周的也可以)，接种到10mL SD液体培养基中。30℃摇晃培养，摇床速度250rpm/分钟，直到OD600达到1.0左右(相当于1×107细胞/mL)。
2.培养S.cerevisiae细胞：挑取新鲜单菌落(4℃放置不超过3周的也可以)，接种到装在10mL YPD液体培养基中。30℃摇晃培养，摇床速度250rpm/分钟，直到OD600达到1.0左右(相当于1×107细胞/mL)。
3. 冰上放置15分钟。
4.室温1600rpm离心5 min，弃上清。
5. 用冰浴的灭菌水洗涤3次。
6. 用0.2mL冰浴的本产品重悬细胞。
7. 按每管0.1mL分装到1.5-2mL的冷冻管中，直接放入-80℃冰箱待用。
 注意：不能放在液氮中，否则将丧失电转化能力。

二：电转化酵母感受态细胞
1. 将装有0.1mL感受态细胞的冷冻管从冰箱取出的、放置在30℃水浴中快速化冻(快速化冻的效果好于缓慢化冻)。
2. 用1mL冰浴的本产品洗涤一次。
3. 加入50μL冰浴的本产品重悬细胞。
4. 加入1-30 ng质粒DNA 并轻柔混匀。
5.转移到预冷的、距离为0.2cm的电击杯中。
6. 按电击仪的手册设置电击参数并进行电击处理，参考条件为：10kV/cm(对0.2 cm的电击杯，则为2kV)，5ms(25F，200)(各厂家仪器的使用略有不同，请严格按电击仪厂家提供的手册进行操作)。
7.电击后将细胞转移到1mL预冷的本产品中，轻柔混匀。
8. 取0.2mL转化细胞涂盘(S.pombe细胞需涂盘在SD 固体培养基上，S.cerevisiae细胞需涂盘在YPD固体培养基上)，30℃培养4-6天。

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