QN1238 20×TBS

20×TBS的品牌是百奥莱博，是优质的蛋白质研究产品，本制品用于生化实验研究等领域，本品质量稳定，价位合理，需要20×TBS等蛋白质研究产品的客户，请到我公司官网联系我们。...

特别提示：包括20×TBS在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：20×TBS
英文名称：TBS,20×
产品货号：QN1238
产品规格：500ml

TBS缓冲液是生物学中常使用的等渗缓冲盐溶液，主要用于免疫组化和原位杂交，酶联免疫等实验中，清 洗免疫印迹实验中非特异性结合的抗体等。由 Tris-HCl 构成稳定的 PH 缓冲体系，NaCl 提供等渗条件。本产品 为 20×浓缩液，稀释后使用。 组分 浓度 Tris 200 mM NaCl 3 M PH 7.5-7.6

使用说明：1×TBS 缓冲液配制：量取 50ml 20×TBS 缓冲液，加入 950ml 去离子水定容至 1L，充分混匀。

注意事项：
1、4℃保存可延长产品保质期，长期不用建议低温保存。若产品出现结晶析出，请置于 37℃水浴至完全溶解。
2、使用时稀释成 1×，可加入 0.05% Tween-20，用于免疫印迹膜清洗。3、
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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名称：BCA法蛋白定量试剂盒
货号：BTN80815
规格：500次
本产品是基于BCA法(bicinchoninic acid，二奎啉甲酸法)蛋白检测原理开发的蛋白质浓度测定产品，BCA法跟Lowry法的步完全相同，就是在碱性条件下，蓝色的Cu2+被蛋白质还原成紫色的Cu+。此反应类似Cu2+与Biuret(NH2-CO-NH-CO-NH2，双缩尿)发生的反应，故又叫Biuret反应(Biuret反应本省就可以测定蛋白质浓度，目前仍然是医院血液蛋白定量的方法)。第二步，Cu+与BCA发生反应形成水溶性的紫色化合物，通过分光在562nm处测定紫色化合物的量就可以定量蛋白质浓度。BCA 检测灵敏度比Biuret反应高100倍左右。


产品特点：
1．对各种常见的去污剂不敏感，但对Cu的还原剂和螯合剂比较敏感。
2．比Lowry法更加简单快捷，45分钟内完成测定。
3．试剂稳定，室温可以放置两年。工作液1 天内有效。
4．线性范围在 20～2000μg/mL。如果需要范围在0.1-10ug/mL，需要选用超敏BCA。
5．zuì小测量体积为1-20μL。
6．终产物稳定，变异系数远小于考马斯亮蓝法蛋白定量。
7．可以检测zuì短到双肽，而Bradford法需要一定大小的蛋白质。
8．有常规(试管)和微量(96孔板)两种检测模式。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	100ml
溶液B	2ml
BSA标准品(2mg/mL)	1ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存(但BSA 标准品需要-20℃保存)，有效期两年。

使用方法：

一：96 板操作模式
1．取一块96孔板，行编号(编号可以根据样品数增加)，并按照下表加入BSA 标准，待测样品和溶解待测样品的缓冲液(可以用水替代)：

编号	BSA 标准(2ug/uL)	待测样品(μL)	样品缓冲液(μL)	总体积(μL)	蛋白含量(μg)
0	0	0	20	20	0
1	1	0	19	20	2.0
2	2	0	18	20	4.0
3	4	0	16	20	8.0
4	8	0	12	20	16.0
5	12	0	8	20	24.0
6	16	0	4	20	32.0
7	20	0	0	20	40.0
样品1	0	X	补到20	20	未知
样品N	0	Y	补到20	20	未知

2．计算BCA工作液需要量：根据样品数量(包括制备标准曲线的样品的数量)和每个样品需要0.2mL BCA工作液的比例，计算所需BCA工作液的用量，然后加上10%损耗作为实际需要配制的量。例如：计算出需要5mL工作液，实际按不少于5.5mL的量配制。
3．配制BCA工作液：按50体积溶液A加1体积溶液B(50:1)的比例将二者充分混合，所得溶液即BCA工作液。比如：5mL溶液A+100μl溶液B。
注意：取用溶液A和溶液B前需要充分摇匀，溶液B非常容易形成沉淀，需要65℃加热溶解后才能使用。当把溶液B刚加入到溶液A中时，zuì初会出现淡绿色沉淀，轻微晃动沉淀即会消失，工作液zuì后成绿色，可以室温放置12 天，但需要将容器的盖子拧紧。
4．将10倍体积(即0.2mL)的BCA工作液加入到各孔中并混匀。如果用排枪加入并混匀则更好。也可把96孔板放在振荡器上振荡30秒混匀。
5．37℃放置30分钟。
6．冷至室温，10分钟内完成后续测定，否则化学反应还在继续进行，使光吸收值慢慢升高，每10分钟会升高2.5%左右。
7．在562nm下比色测定样品的光吸收。如酶标仪没有562nm的设定，可用接近的波长检测，如570nm。
8．将编号为0号的样品(对照)的读数从其余所有样品(包括0 号样品，其读数变成零)中扣除。
9．以0-7 号样品的BSA含量(μg，见上表zuì右行)为横坐标，以样品的吸光值为纵坐标，绘出BSA的标准曲线。
10．再将待测样品的吸光值(减去0 号样品的读数后的值)标在标准曲线上，其在横坐标上对应的蛋白含量(μg)就是待测样品中的蛋白质含量，除以样品稀释液总体积(20μl)，乘以样品稀释倍数即为样品浓度(μg/μL)。

二：试管测定模式
1、基本操作同上，只是操作改在编号的玻璃试管中进行，同时BSA 标准品(2ug/uL)的使用量从低到高改为0、5、10、20、40、60、80、100μL，样品的总体积从20μL 改为100μL，BCA工作液的用量从每个样品0.2mL 改为2mL。

三：注意事项
1．BCA法测定蛋白浓度时，吸光度会随着时间的延长不断加深。并且显色反应会因温度升高而加快。所以，如果蛋白质浓度较低，可以改在60℃孵育30分钟或更长。
2．待测样品浓度在20～2000 微克/毫升浓度范围内有较好的线性关系。
3．在一定浓度范围内BCA法测定蛋白浓度不受下列化学物质的影响：

名称	在此浓度下不受影响
Ammonium Sulfate	1.5 M
Brij-35	5.0%
CHAPS	5.0%
EDTA	10mM
Hepes	100mM
Glycine，pH2.8	100mM
Guanidine HCl	4.0 M
Tween 20、60、80	5.0%
SDS	5.0%
Sodium Acetate pH5.5	200mM
Sodium Chloride(NaCl)	1.0 M
Sucrose	40%
Sodium Hydroxide(NaOH)	0.1 M
NP-40	5.0%
Triton X-100	5.0%
Urea	3.0 M

4．本方法受样品中螯合剂和还原剂的影响，所以需确保EDTA浓度不高于10mM，二硫苏糖醇不高于1mM，β-巯基乙醇不高于1mM，没有任何EGTA，否则建议使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒(BTN80815)。

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货号	名称	规格
BTN131007	中等RIPA裂解液	250mL
BTN81224	BCIP/NBT显色试剂盒	100mL
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WE0290	G250蛋白快速染色试剂	250ml
SNM451	蛋白示踪上样缓冲液(还原，5×)	5ml
SNM456	蛋白电泳预制胶(15%，10孔/15孔)	10块/盒
SNM483	即用型正常山羊血清	100ml

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