SNM376 Tris-Tricine阳缓冲

Tris-Tricine阳缓冲由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科学研究，我公司的Tris-Tricine阳缓冲品质上佳，经过多年的开发生产，已然非常成熟，欢迎广大新老客户订购。...

特别提示：包括Tris-Tricine阳缓冲液(1×，pH8.9)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：Tris-Tricine阳缓冲液(1×，pH8.9)
英文名称：Tris-Tricine anode buffer (1 ×, pH8.9)
产品货号：SNM376
产品规格：500ml



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货号	名称	规格
BTN100867	SDS-PAGE浓缩胶配胶液	250mL
YT043	细胞线粒体纯化试剂盒	50-100次
RFT067	40％丙稀酰胺溶液(19:1)	100ml
KFS018	Oct-4免疫组化试剂盒(IHC)	50T
KFS074	SDS-PAGE凝胶配制试剂盒	50 块胶
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KFS232	FAS-L蛋白检测试剂盒	50T

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名称：抗体稀释液
货号：SNM481
规格：100ml

名称：10×CAPS电转移缓冲液(不含甘氨酸，适合大分子量蛋白转移)
货号：KFS094
规格：500ml
本产品作为蛋白电泳完毕后，将凝胶上蛋白电转移到PVDF 膜或其它膜上的缓冲液，pH11，含CAPS，不含有甘氨酸，本电泳缓冲液适合大分子量蛋白电转移。

使用时按10×电转移缓冲液：甲醇：蒸馏水=1：1：8 的比例配制成1×的工作液，就可以用于电转移实验。

储存：RT，有效期一年。

名称：5×非变性蛋白上样缓冲液
货号：SY0350
规格：2ml
本品用于常规的非变性聚丙烯酰胺（PAGE）蛋白电泳样品上样。5×非变性蛋白上样缓冲液(Non-denatured Gel Sample Loading Buffer)是一种经过改良的以溴酚蓝为染料，5倍浓缩的蛋白上样缓冲液。产品中不含有SDS等变性试剂，但是含有还原性试剂DTT。


注意事项
1)为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)5×非变性蛋白上样缓冲液中含少量DTT，有轻微刺激性气味，但不含剧毒的巯基乙醇。

操作方法
1.在室温或不超过37℃的水浴中溶解5×非变性蛋白上样缓冲液。水浴溶解后立即室温存放，尽量避免长时间置于水浴中。
2.按照每4 μl蛋白样品加入1 μl 5×非变性蛋白上样缓冲液的比例，混合蛋白样品和5×非变性蛋白上样缓冲液。
3.直接上样到PAGE胶加样孔内即可。
4.通常电泳至蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。

储存条件：-20℃，有效期一年。

名称：ECL化学发光法检测试剂盒(兔IgG)
货号：QN1157
规格：1盒
本试剂盒主要用于western blotting的化学发光显色，含有HRP标记抗兔IgG二抗。

SDS-PAGE电泳后，蛋白质按照分子量大小分离，转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)后，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶标记的第二抗体起反应，加入发光底物后，能让胶片感光。经显影和定影后，可以在胶片上显示出条带(抗原所在位置)。

试剂盒组分：
封闭试剂———————————30g(可配制400ml)
10倍浓缩抗体稀释液——————50ml
HRP标记兔IgG二抗———————0.3ml，效价1:500～1000
ECL显色液-——————————25mlA+25mlB

常规电泳转膜后:
1)清洗转印膜：将膜剥离下后，作好标记，一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T漂洗3次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS，防止影响后面的抗体结合。
2)按5g封闭试剂加100ml双蒸水计，配制膜封闭液，配好的膜封闭液为乳白色悬液，将漂洗过的转印膜放入封闭液内，置摇床孵育，室温封闭30min。用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜，室温漂洗3次每次5min。
3)将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×(10ml,10×抗体稀释液加入90ml双蒸水，混匀，可4℃保存三个月)。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
4)用1×的抗体稀释液稀释一抗。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中，加入一抗工作液，封口，4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
注：如果所加一抗不同，可在此步将膜沿电泳方向剪成条，分别作好标记，分开孵育。
5)用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜，室温漂洗3次每次5min。
6)用1×的抗体稀释液稀释二抗。根据用量，按10ml抗体稀释液加入15ul的HRP标记二抗的比例，配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中，加入二抗工作液，封口，37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
7)用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜，室温漂洗3次每次10min。
8)根据用量，取ECL发光液A、B等量混匀，加在膜正面，暗室显色1～5分种。倾去显色液，小心用纸吸去显色液，在上面盖一层平整的透明纸。再取出感光胶片，做好标记，轻轻的放在膜上，显色30秒到1分钟，取出胶片浸入显影液中，观察显色情况，再放入定影液中1分钟。根据条带强弱，再次感光时可减短或者加长感光时间(从5秒到30分钟)以期达到理想结果。
注意事项：
1.请根据一抗来源选择试剂盒。
2.可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深，可延长膜封闭时间，加长zuì终漂洗次数与时间。如果
条带过弱，可增加抗体浓度，可延长抗体孵育时间或加长感光时间。
3.TBS-T(0.01M，PH7.6)配制方法：称取NaCl 8.5g，Tris 1.21g，用800ml的双蒸水溶解，用盐酸调PH到7.6，再加入0.5ml Tween-20，用双蒸水加至1000ml，混匀即可。(也可按照自己的配制习惯来配制)

储存条件：-20℃避光，有效期一年。

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