QN2713 免疫组化SP法检测试剂盒

免疫组化SP法检测试剂盒由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科研目的，本品质量稳定，价位合理，需要免疫组化SP法检测试剂盒等免疫检测产品的客户，请到我公司官网联系我们。...

特别提示：包括免疫组化SP法检测试剂盒(山羊IgG)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：免疫组化SP法检测试剂盒(山羊IgG)
英文名称：SP Kit(Goat)
产品货号：QN2713
产品规格：3ml|6ml|18ml|110ml

本试剂盒适合于一抗为山羊IgG的免疫组化实验DAB显色。本试剂盒是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的，用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质，同亲和素一样，对生物素有高的亲和力，亲和素是一个碱性蛋白质（PI=10），经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性，对组织和细胞的非特异吸附很低，因此基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。

试剂盒组成：

组分	3ml	6ml	18ml
封闭液（5% BSA）	3ml	6ml	18ml
3% H2O2	3ml	6ml	18ml
生物素标记兔抗山羊IgG浓缩液	30μl	60μl	180μl
链酶亲和素-POD浓缩液	30μl	60μl	180μl
稀释液	10ml	20ml	60ml
20×DAB 显色液A	0.3ml	0.6ml	1.8ml
20×DAB 显色液B	0.3ml	0.6ml	1.8ml

保存：如果长时间不使用，请将所有试剂存放于-20℃，如经常使用，可将封闭液，3% H2O2和20×DAB显色液 B 存放于2-8℃以方便使用。

操作步骤（以石蜡切片为例）：
1．切片常规脱蜡至水(三次二甲苯，三次乙醇)。
2．3% H2O2 室温处理 5-10 分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
3．可选步聚：
  a、热修复抗原，将切片浸入0.01M柠檬酸钠缓冲液（PH6.0），电炉或微波炉加热至沸腾后断电，间隔 5～10 分钟后，反复 1～2 次。冷却后 PBS（pH7.2-7.6）洗涤 1～2 次。
  b、酶消化，滴加消化液，37℃ 10分钟，PBS（pH7.2-7.4）洗涤 2～3 次。
  c、跳过此步，直接进入下一步。
4．滴加封闭液，室温 20 分钟。甩去多余液体，免洗。
5．用稀释液将一抗按一定比例稀释（稀释后的一抗 4℃可保存一周），也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗 37℃ 孵育 1 小时左右或 20℃ 2 小时左右，也可 4℃过夜。PBS（pH7.2-7.4）洗涤 3次，每次 2 分钟。（一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说，阳性染色强度不够时，可提高一抗浓度和延长孵育时间；背景过高时，可降低一抗浓度和缩短孵育时间。）
6．根据用量，用稀释液将 生物素-兔抗山羊 IgG 浓缩液按 1:100 稀释成工作液(1ml 稀释液加入 10μl 生物素标记兔抗山羊 IgG 浓缩液混匀，此工作液 4℃可保存一周)。滴加 生物素-兔抗山羊 IgG 工作液，20-37℃ 孵育 30 分钟。PBS（pH7.2-7.4）洗涤 3 次，每次 2 分钟。
7．根据使用量，用稀释液将链酶亲和素-POD 浓缩液按 1:100 稀释成工作液(1ml 稀释液加入 10μl链酶亲和素-POD 浓缩液混匀，此工作液 4℃可保存一周)。滴加链酶亲和素-POD 工作液，20-37℃，30 分钟。PBS （pH7.2-7.4）洗涤 4 次，每次 5 分钟。
8．DAB 显色：根据用量，用 PBS（pH7.2-7.4）配制，按 1ml PBS 加入 50μl 20×DAB 显色液 A，加入 50μl 20×DAB 显色液 B 。充分混匀后滴加到切片上。室温显色，镜下控制反应时间，一般在 5-30分钟之间。蒸馏水洗涤终止反应。
9．苏木素轻度复染。脱水，透明，封片。显微镜观察。

对于细胞爬片，固定后，PBS 漂洗两次，再用 0.5% Triton X-100 室温孵育 20 分钟，PBS 漂洗两次，3% H2O2 处理 15 分钟；PBS 漂洗两次，接上述第 4 步。 对于冰冻切片，固定后，PBS 漂洗两次，接上述第二步。

注意事项：
如果染色背景过高，在 SP 反应之后，DAB 显色之前，用加有 0.01—0.02% TWEEN-20 的 PBST（pH7.2-7.4）洗涤切片 4 次，PBS 洗 2 次，然后 DAB 显色。

根据您的关注的免疫组化SP法检测试剂盒(山羊IgG)，您可能还对以下产品有需求：



名称：Western封闭液(WB封闭液)
货号：YT067
规格：100ml
本品可以用于Western时转移了蛋白样品的PVDF膜或NC膜的封闭。封闭后，可以减小后续的一抗或二抗和膜的非特异性结合，降低背景，增强信噪比。按照每张膜封闭需要5-10毫升封闭液计算，一个包装的Western封闭液可以封闭10-20张膜。

注意事项：通常在室温封闭60分钟即可。如果对于一些背景非常高的抗体，可以4℃封闭过夜。

储存条件：4℃，有效期一年。

名称：封闭液(用TBS配置，不含去垢剂)
货号：YT874
规格：100ml
本品是zuì新一代的快速封闭液，总体效果显著优于传统的基于BSA(牛血清白蛋白)、脱脂奶粉、酪蛋白(Casein)等的封闭液及国外同类产品，可以用于Western blot (WB)、Immunofluorescence (IF)、Immunohistochemistry (IHC)、Immunocytochemitry (IC) 等实验中的封闭、一抗或二抗的稀释。本产品配制在TBS中，不含去垢剂。 按照每张膜封闭需要5-10ml封闭液计算，一个包装的本产品 可以封闭10-20张膜。

本封闭液快速。封闭时间通常仅需5-15分钟，并且和BSA、脱脂奶粉、酪蛋白等传统封闭液以及国外同类的快速 封闭液相比，显示出更强的信噪比(参考下图)。

本封闭液封闭后背景低。本封闭液不含血清和白蛋白，确保高的信噪比。

本封闭液兼容性好，兼容辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶和生物素标记的二抗。本产品中添加了不影响HRP和AP活性的防腐剂，不会干扰HRP或AP标记二抗的检测。同时本产品不含生物素，不会干扰基于生物素的检测。

本封闭液使用灵活。本产品配制在TBS中，可以直接用于相关实验，但也可以根据实验需要自行添加Tween-20或Triton X-100 至终浓度为0.05%-0.1%后用于封闭、一抗或二抗的稀释。

本产品与BSA及国外同类产品的封闭效果对比参见下图。在相同样品和实验条件下，仅封闭液及封闭时间存在如下图所示的差异时，我公司的本封闭液封闭后的整体背景明显低于BSA封闭后的背景，而且目的条带亮度明显高于国外同类品牌产品。


每组实验从左到右依次为：5μl蛋白Marker，2.5μg蛋白量的HeLa细胞裂解液，5μg蛋白量的HeLa细胞裂解液。请注意对于抗体A，本封闭液比BSA和国外同类产品具有更低 的背景，并且和国外同类产品相比信号明显更强。对于抗体B，本封闭液比BSA具有更低的背景，和国外同类产品相比信号明显更强。实际实验结果会因样品、抗体、实验条件等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。

注意事项：
1. 本产品推荐仅使用一次，重复使用可能会导致封闭效果下降。但对于一些信噪比很高的一抗，例如一些内参抗体，本封闭液可以重复使用2-3次。回收的封闭液请勿与未使用 过的封闭液混合。
2. 通常本产品用于PVDF膜及NC膜时的封闭时间为5-15分钟。对于一些背景非常高的抗体，可以尝试将封闭时间延长为30-60分钟。此外，如有特殊需要，也 完全可以4℃封闭过夜。
3. 由于没有任何一种封闭液是适用于所有实验体系的，因此对于一些特殊的实验，可能需要根据具体情况考虑使用其它更合适的封闭液。
4. 取放PVDF膜和NC膜应使用平头镊子，并仅轻轻夹取其边角，操作过程须避免膜表面产生划痕、折痕或压痕等痕迹。
5. PVDF膜一经浸润和活化，需一直保持湿润，根据Western进行到的具体步骤可放置于western转膜液或洗涤液等适当溶液中，否则可能会产生难以封闭的异 常背景。
6. 在背景较高的情况下，为进一步提高信噪比，本产品中可以自行添加Tween-20或Triton X-100至终浓度为0.05%-0.1%。

储存条件：4℃，有效期一年。

关注免疫组化SP法检测试剂盒(山羊IgG)，的同时，为您推荐更多您可能感兴趣的产品：

货号	名称	规格
YT082	EDTA-柠檬酸钠抗原修复液(40X)	125ml
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SY0760	DAB显色试剂盒黄色(IHC)	1Kit
ZN1891	凝胶蛋白质蓝染-脱色液(考马斯亮蓝染色脱色液)	500ml
ZN1911	TBS-T(含有0.05%Tween-20)缓冲系统封闭液	500ml

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