YT450 Myc荧光素酶报告基因质粒

北京百奥莱博供应的Myc荧光素酶报告基因质粒用于科研试验，我公司专注于克隆与表达产品的研发、生产和供应，为您提供的Myc荧光素酶报告基因质粒质量可靠，批间差小，且价格公道，热切盼望您选购我们的产品。...

特别提示：包括Myc荧光素酶报告基因质粒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：Myc荧光素酶报告基因质粒
英文名称：Myc-luc Reporter gene plasmid
产品货号：YT450
产品规格：1μg

Myc报告基因质粒是用于检测Myc转录活性水平的报告基因质粒。Myc质粒是以pGL6-TA质粒为模板，在其多克隆位点插入了多个Myc结合位点(E-box DNA binding element)，可以高灵敏度地检测Myc的激活水平。Myc可以和Max形成异源二聚体，结合到E-box DNA binding element，启动促进细胞增殖的基因转录。

pGL6-TA质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了的改进，一方面对于luciferase的编码进行了改进，确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达，同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理，在保持原有功能不变的情况下，使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到zuì低。

Myc质粒的主要信息如下：

base pairs	5647
Myc response element	26-61
Minimal TA promoter (pTA)	84-106
luc2 reporter gene	148-1800
SV40 late poly(A) signal	1835-2056
SV40 early enhancer/promoter	2104-2522
Synthetic neomycin phosphotransferase
(Neor) coding region	2547-3341
Synthetic poly(A) signal	3366-3414
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region	3481-3500
ColE1-derived plasmid replication origin	3738
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region	4529-5389
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site	5494-5647
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region	5596-5615

Myc质粒的图谱如下：


使用说明：
1. 次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. Myc质粒可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可采用萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT271)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒（YT273）。
3. 可以激活Myc的试剂，可以用作Myc报告基因检测时的阳性对照。

储存条件：-20℃。

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货号	名称	规格
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名称：大肠杆菌DH5α化学感受态细胞
货号：BTN81024
规格：0.1mL*10
 本产品是采用大肠杆菌DH5α菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。DH5α是一种常用于质粒克隆的菌株，其φ80lacZΔM15基因产物可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补，可用于蓝白斑筛选。recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。使用pUC19质粒检测，转化效率不低于107，适用于的质粒DNA克隆并能保证高拷贝质粒的稳定复制。
 本菌种来源于Hoffman-Berling 1100菌种。

基因型	表现型
deo R	组成型合成脱氧核糖
end A1	核酸内切酶I缺失
gyr A96	具有萘啶酮酸抗性
hsd R17	限制性酶EcoK缺失
△(lac)U169	lac基因缺失
rec A1	DNA重组活性降低
Rel A1	允许在无蛋白质合成时有RNA合成
sup E44	抑制琥珀突变突变，为某些噬菌体必需
thi-1	不能自身合成硫氨
φ80(lac ZΔM15)	提供α-互补所需的ω片断

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击90秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入800μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，200rpm(小于225rpm)振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。
注意事项：
1、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm ，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2、新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3、涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

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