ALH178 唾液DNA收集提取试剂盒

唾液DNA收集提取试剂盒由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科研试验，本品质量稳定，价位合理，需要唾液DNA收集提取试剂盒等DNA提取纯化产品的客户，请到我公司官网联系我们。...

特别提示：包括唾液DNA收集提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：唾液DNA收集提取试剂盒
英文名称：Saliva DNA collection, preservation，transport and extraction Kit
产品货号：ALH178
产品规格：10次|50次

本试剂盒针对唾液样本中的DNA 进行收集、保存、运输、纯化。可提供无疼痛、非侵入性的方法，患者不用忍受抽血的疼痛和感染的风险就能获得高质量、高数量的样品，受测者排斥性低，婴儿和老人都能方便取得DNA样本。收集过程十分简单，受测者将唾液吐至保存液内混匀就完成收集过程。混匀后常温下可运输保存长达一年不会变质。能够节省运送、保存冷藏设备和电力费用。收集的唾液通过几个简单步骤便可提取DNA。抽取的DNA产量高达110μg/2mL唾液。

试剂盒组份(50次)：
保存液———————————2ml×50
细胞裂解液—————————50ml
杂质沉淀液—————————85ml
DNA溶解液——————————20ml
5ml采集管——————————50个

产品特点：
1.非侵入性采检方式免除了抽血的疼痛和降低了污染风险，并增加了取检的便利性，可由受检者自行取样。
2.仅需2ml的唾液样本，即可取得约110μg的DNA(不同个体产量差异很大)。
3.采样后的检体可稳定地储存于室温环境一年以上。

唾液样品收集步骤：
1. 用清水漱口1～2 次，然后吐掉。
2. 漱口后等候至少5 分钟方可采集唾液，期间不要进食、饮用各种饮料。
3. 将唾液(不是喉咙中痰液)吐到5ml 采集管中，直至2ml 刻度位置。(不可将痰液吐到收集管中，若唾液不足，可做口舌运动，促进分泌。浮在唾液上层的少量泡沫不包括计算在2ml 唾液采集量内，采集过程必须在30 分钟内完成)
4. 将等体积2ml 保存液全部倒在5ml 唾液采集管中，充分颠倒混匀后旋紧盖子。

唾液DNA提取步骤(2ml唾液量举例，可按比例放大缩小每次提取的唾液量)：
1. 将保存液/唾液混合物放置于50℃ 水浴中至少1 小时或50℃ 空气孵箱至少2 小时。
2. 转移4ml 混合物(2 ml 唾液加2 ml 保存液)到一个15 ml 或者50 ml 的离心管。
3. 加入1ml 裂解液和10 μl RNase A 溶液(10mg/ml). 高速涡旋振荡10 秒后室温放置10分钟。
4. 加入1. 7 ml 杂质沉淀液到上述裂解混合物中。
5. 高速涡旋振荡25 秒，充分混匀杂质沉淀液和裂解混合物。
6. 2500g离心5分钟。沉淀的杂质和蛋白会在管底形成一个致密的沉淀团。如果蛋白沉淀不太致密，可以冰上放置5分钟，然后重复步骤6。
7. 仔细转移上清(含有DNA)到一个新的15 ml 或者50 ml 的离心管。注意不要触动管底沉淀。加入5ml 异丙醇。(唾液DNA 含量较低时，加入40μl Glycogen 20mg/ml可能提高一些产量)
8. 轻柔颠倒混匀50 次。
9. 2000g 离心3 分钟， 此时一般可在管底看到白色的DNA 沉淀。
10. 倒弃上清， 倒置后在吸水纸上轻敲几下以尽可能吸干。加入5ml 70％乙醇，颠倒几次漂洗DNA 沉淀。
11. 2000g 离心1 分钟, 仔细倒去上清(沉淀很松，注意不要把DNA 沉淀倒掉了)。
12. 倒置后在吸水纸上轻敲几下以控干残留乙醇，还可以用枪头小心吸掉管底沉淀周围和管壁的残留乙醇，空气晾干沉淀几分钟(不要干过头，也不要残留乙醇)。
13. 加入250μl -400μl DNA 溶解液重新水化溶解DNA 沉淀，轻弹管壁混匀。
14. 可以放置在65℃温育30-60 分钟(不要超过一小时)，然后在室温或者4℃放置过夜来重新水化DNA，中间不时的轻弹管壁帮助重新水化DNA。
15. DNA 可以存放在2-8℃，如果要长时间存放，可以放置在-20℃ 或者-80℃。

本制品别名：唾液DNA收集保存提取试剂盒

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产品特点：
1. 使用本试剂盒提取的基因组DNA可适用于各种常规分子生物学操作，如:酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等试验。
2. 操作简单安全，1小时内即可获得超纯的基因组DNA，纯化过程中不需要使用苯酚氯fǎng等有机试剂。
3. 应用广泛，适用于多种动物细胞和动物组织等。
4. 高，质量和国外同类试剂盒相当，价格更低。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	50ml
蛋白酶K溶液(20mg/mL)	1ml
溶液B	15ml
溶液C	13ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	15ml
通用洗脱液	15ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存(蛋白酶K溶液需要低温运输，-20℃保存)，有效期一年。

使用方法：
使用前请先在溶液C和通用洗柱液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。

1. 切取不多于30mg的组织材料，放入装有200μL溶液A的离心管中，涡旋振荡15秒。注意：根据提取的组织不同，起始量也稍有不同，腮的细胞量较大，一般建议提取量不超过20mg。如果需要去除RNA，可加入40μL RNase A(10mg/mL)溶液(客户自备，BTN3160)，振荡15秒，室温放置5分钟。
2. 加入20μL蛋白酶 K溶液(20mg/mL)，涡旋混匀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。在56℃下放置，直至组织完全溶解，简短离心以去除管盖内壁的水珠，再进行下一步骤。注意：不同组织裂解时间不同，通常需0.5-2小时即可完成。扇贝组织0.5小时基本可裂解完全，虾和鱼类组织1小时。每小时振荡混合样品2-3次，每次振荡混匀15秒。
3. 加入200μl溶液B，充分颠倒混匀，70℃放置10分钟，溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的水珠。注意：加入溶液B时可能会产生白色沉淀，一般70℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA 量少和提取出的DNA 不纯。
4. 加入200μl 无水乙醇，充分颠倒混匀，此时可能会出现絮状沉淀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
5. 将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个离心吸附柱中(吸附柱放入收集管中)，12000rpm(～13,400×g)离心30秒，倒掉废液，将吸附柱放回收集管中。
6. 向离心吸附柱中加入500μl溶液C(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm(～13,400×g)离心30秒，倒掉废液，将吸附柱放入收集管中。
7. 向吸附柱中加入600μl 通用洗柱液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm(～13,400×g)离心30秒，倒掉废液，将吸附柱放入收集管中。
8. 重复操作步骤7。
9. 将吸附柱放回收集管中，12000rpm(～13,400×g)离心2分钟，倒掉废液。将吸附柱置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。
10. 将吸附柱转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200μl 通用洗脱液，室温放置2-5分钟，12000rpm(～13,400×g)离心2分钟，将溶液收集到离心管中。注意：通用洗脱液的体积不应少于50μl，体积过小影响回收效率。为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱中，室温放置2分钟，12000rpm(～13,400×g)离心2分钟。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用超纯水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5 范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA 降解。

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