BTN100838 遗传霉素

产品简介
遗传霉素是高品质的克隆与表达产品,由北京百奥莱博供应,本产品用于生化实验研究等领域,本品质量稳定,价位合理,需要遗传霉素等克隆与表达产品的客户,请到我公司官网联系我们。...
产品详细介绍
特别提示:包括遗传霉素(G418)干粉在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:遗传霉素(G418)干粉
英文名称:G418 Sulfate (Geneticin) Powder
产品货号:BTN100838
产品规格:100mg
G418又叫Geneticin(遗传霉素),分子式为C20H40N4O10·2H2SO4,分子量为692.71,CAS号为108321-42-2,白色结晶,溶于水。在分子遗传试验中,是稳定转染zuì常用的抗性筛选试剂。
结构式:

抗性机制:它通过干扰核糖体功能而阻断蛋白质合成,对原核和真核细胞都有毒性。真核细胞中表达细菌APH(氨基糖苷磷酸转移酶)的基因(源自Tn5),可使G418失去作用。
储存条件:常温运输,4℃避光保存、有效期一年。
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名称:平末端DNA加T试剂盒
货号:BTN60106
规格:50次
本产品利用Taq DNA polymerase的不依赖于模板的末端转移酶活性,在只有dTTP存在的情况下,在平末端的DNA片段加上一个dT尾巴,主要用于制备T载体。其流程图如下:

产品特点:
1. 简单,2X Tailing Buffer中含有所需要的所有成分,不需要单独准备。
2.适用于任何平末端的DNA片段,包括Pfu DNA成本polymerase等酶合成的DNA片段。
3. 加T后的载体可以作为T载体使用。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| Taq DNA olymerase(5U/μL) | 50μl |
| 2×dT Tailing Buffer | 1.25ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一:反应前纯化处理:
平末端DNA片段或平末端质粒DNA可以采取胶回收和酚/lǜ仿抽提法等常规方法纯化,zuì后溶解在水或TE中,终浓度以0.1μg/μL为宜。必须注意的是,用Vent,Deep Vent,Pfu,Pwo等具有3到5外切活性的DNA聚合酶扩增得到的DNA片段,必须经过彻底的去除残留的酶的处理过程(如酚/lǜ仿抽提或Proteinase K处理),否则它们将在加T反应时,切除掉加上的T尾巴,干扰反应。
二:加T反应
在干净的0.5mL或1.5mL离心管中,分别加入下列成分:
| 回收的DNA片段 | 0.2-2μg |
| 2×dT Tailing Buffer | 25μL |
| Taq DNA polymerase(5U/μL) | 1μL |
| 补水到 | 50μL |
| 72℃保温2小时 | |
三:反应后处理
加T反应后,Taq DNA polymerase将与DNA末端紧密结合,所以必须酚/lǜ仿抽提去除。如果使用Proteinase K处理后再用酚/lǜ仿抽提效果会更好。得到的DNA溶于适量水和TE中后即可用于后续连接反应。
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