WE0281 蛋白银染试剂盒

产品简介
蛋白银染试剂盒的品牌是百奥莱博,是优质的蛋白质研究产品,本制品仅用于生物化学研究方面,我公司专注于蛋白质研究产品的研发、生产和供应,为您提供的蛋白银染试剂盒质量可靠,批间差小,且价格公道,热切盼望您选购我们的产品。...
产品详细介绍
特别提示:包括蛋白银染试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:蛋白银染试剂盒
英文名称:Protein Silver Stain Kit
产品货号:WE0281
产品规格:20次
本试剂盒采用高灵敏度的银染染料,可应用于变性胶及非变性胶的蛋白染色,具有目的条带清晰、背景低,操作时间可灵活控制的优点。另外,本试剂盒增加了一步短时敏化作用步骤,可明显降低背景及提升目的条带的亮度。
试剂盒组成:
| 组份 | 20次 |
| Silver Stain Sensitizer(500×) | 2×1ml |
| Silver Stain Enhancer | 3ml |
| Silver Stain | 2×250ml |
| Silver Stain Developer | 4×125ml |
注意事项:
1、请提前准备50ml固定液(超纯水:乙醇:冰醋酸=6:3:1)、50ml洗脱液(10%乙醇)和50ml终止液(5%的冰醋酸)。
2、操作时请使用去离子水和洁净的玻璃或塑料器皿,须戴一次性手套进行操作。
3、整个银染过程需在摇床上进行,摇床转速约60 rpm左右。
4、需自备乙醇,冰醋酸。
操作步骤:
以下操作步骤中各溶液的用量以大小为8.5×5.5 cm、厚度为1.0 mm的凝胶为例,以凝胶全部浸没到溶液为准,置于摇床上操作,一般用量25ml。对于大型凝胶,各溶液的使用量需按凝胶体积的比列放大。
请提前准备好50ml固定液(超纯水:乙醇:冰醋酸=6:3:1)、50ml洗脱液(10%乙醇)和50ml终止液(5%的冰醋酸)。
1、水洗:电泳完成后,用超纯水洗胶2次,每次洗涤5分钟。
2、固定:用25ml固定液固定凝胶2次,每次固定15分钟。
3、洗脱:用洗脱液洗胶2次,每次洗涤5分钟。
4、水洗:用超纯水洗胶2次,每次洗涤5分钟。
5、增敏:将上一步洗好的凝胶置于银染增敏工作液中,室温下准确孵育1分钟后用超纯水洗胶3次,每次洗涤20秒。
银染增敏工作液的配制:取50μl Silver Stain Sensitizer(500×)加入到25ml超纯水中,混匀。
6、银染:弃去超纯水,将凝胶置于银染工作液中孵育30分钟。
银染工作液的配制:取25ml Silver Stain加入50μl Silver Stain Enhancer混匀。
7、水洗:用超纯水快速洗胶2次,每次洗涤准确控制为20秒。
8、显影:立即将洗好的凝胶浸没在显影液中,室温孵育2-3分钟,直至蛋白条带显示清晰。
显影液的配制:取25ml Silver Stain Developer加入30μl Silver Stain Enhancer混匀。
注意:显影30秒内,蛋白条带开始显现,继续显影至2-3分钟。若蛋白条带显色较浅,可适当延长显影时间至5分钟及以上。
9、终止:用终止液洗去凝胶上的显影液后,将凝胶浸泡在新的终止液中反应10分钟。
实验图例

BSA蛋白样品经过10%的SDS-PAGE凝胶电泳后银染结果
BSA蛋白分子量约为66 kD,上样量从左到右分别为50ng,10ng,5ng
储存条件:室温。
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名称:3mL亲和层析柱
货号:BTN140650
规格:3mL
本产品适用范围广泛,可用于纯化分离重组蛋白、抗体和抗原、多肽、糖蛋白、磷酸化蛋白、DNA及DNA结合蛋白等生物大分子;还可以用于去除生物样品中的内毒素等污染。
亲和层析是利用生物分子间所具有的专一亲和力而发明的纯化技术。它是利用生物分子间存在的特异性相互作用(如抗原-抗体、酶-底物或抑制剂、激素-受体等),通过将具有亲和力的两个分子中的一个固定在不溶性基质上,利用分子间亲和力的特异性和可逆性,对另一个分子进行分离纯化。
亲和层析柱常见的使用方法有重力法、手动加压法、蠕动泵法,其示意图如下:

储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
常用亲和标签及纯化方案:

名称:超快蛋白银染试剂盒
货号:BTN100810
规格:1000mL
核酸银染的原理是银离子(Ag+)可与蛋白质等大分子有机物形成稳定的复合物,然后用还原剂如甲醛在碱性环境下使Ag+还原成银颗粒,可把蛋白电泳带染成黑褐色。它主要用于聚丙烯酰胺凝胶电泳染色,其灵敏度比考马斯亮蓝高100倍。但常规的银染方法由固定、氧化、染色、显影、终止等步骤组成,操作十分繁琐,尤其不适用于大批量实验。为解决此问题,本公司推出本产品。
产品特点:
1.超快,整个过程只需要不到60分钟。
2.操作简单,只有固定(30分钟)、染色(10分钟)和显影(10分钟)三步。
3.灵敏度比考马斯亮蓝染色高100倍,能检测到10ng的蛋白质条带。
4.三个成分中的两个都是现用现配,可重复性好。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A组分一(干粉) | 2g |
| 溶液A组分二,10× | 100ml |
| 溶液A组分三,10× | 100ml |
| 溶液B组分一,10× | 100ml |
| 溶液B组分二 | 5ml |
| 说明书 | 1份 |
注:1000mL规格指可配制的溶液A(染色液)的体积,实际使用次数根据PAGE胶大小不同而不同。
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
自备试剂:去离子水,乙醇和乙酸。
使用方法:
一、配制银染固定液 100mL(对mini PAGE胶)
将40mL 无水乙醇、10mL 乙酸和50mL去离子水充分混合即可使用。
二、配制溶液A
需要配制的溶液A(染色液)的体积完全跟PAGE胶的大小相关,一般的mini-PAGE胶需要20-30mL。下面的用量是针对配制100mL溶液A。如果配制的溶液A的体积不是100mL,则需按比例改变各成分用量。在一干净烧杯中加入下列成分搅拌混匀即可。溶液A需要新鲜配制。
| 成分 | 用量 |
| 去离子水 | 80ml |
| 溶液A成分一 | 0.2g |
| 溶液A成分二 | 10ml |
| 溶液A组分三 | 10ml |
三、配制溶液B
需要配制的溶液B(显色液)的体积完全跟PAGE胶的大小相关,一般的mini-PAGE胶需要20-30mL。下面的用量是针对配制100mL溶液B。如果配制的溶液B的体积不是100mL,则需按比例改变各成分用量。在一干净烧杯中加入下列成分搅拌混匀即可。溶液B需要新鲜配制。
| 成分 | 用量 |
| 去离子水 | 89.5ml |
| 溶液B成分一 | 10ml |
| 溶液B组分二 | 0.5ml |
四、银染
1.PAGE电泳或SDS-PAGE电泳结束后,将胶转移到装有100mL银染固定液的瓷盘中,摇晃30分钟以去除干扰银染的成分(如甘氨酸、SDS、DTT、甘油等)。注:此步很重要,否则银染背景很高。
2.用100mL去离子水漂洗2次,每次2分钟。
3.将PAGE胶转移到适当体积的溶液A中,使溶液A在轻柔摇晃过程中能够淹没PAGE胶。室温摇晃处理10分钟。
4.倒掉溶液A,用100mL去离子水快速漂洗2次,每次半分钟。
5.将PAGE胶转移到适当体积的溶液B中,使溶液B在轻柔摇晃过程中能够淹没PAGE胶。室温摇晃直到蛋白电泳条带显现(一般需要10分钟左右)。
6.迅速将PAGE胶置于适当背景下照相留存。胶的颜色肯能会逐渐加深,如果有必要保存胶,可以用自备的5%的乙酸终止显色。

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| 货号 | 名称 | 规格 |
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