JN0086 DNA Ladder 2000

产品简介
我公司致力于为客户提供高纯度、低成本的活性重组蛋白,包括DNA Ladder 2000 在内的各类受体、细胞因子、生长因子、转录因子、激素、酶、毒性蛋白、病毒抗原等。...
产品详细介绍
特别提示:包括DNA Ladder 2000 Plus在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:DNA Ladder 2000 Plus
产品货号:JN0086
产品规格:500μl(100次)
本DNA Marker为预混1×Loading Buffer的DNA溶液,可直接电泳。DNA Ladder 2000 Plus在DNA Ladder 2000基础上增加了3000bp,4000bp,5000bp的条带。
片段组成:
100bp,250bp,500bp,750bp(加亮),1000bp,2000bp,其中750bp条带浓度加倍,约为20 ng/μl,显示为亮带,使电泳结果更容易辨认,亦可用于定量。其它各条带浓度约为10 ng/μl。
储存条件:-20℃,有效期2年。
图1:DNA Marker电泳图

图2:DNA Marker条带示意图

表1:DNA Marker选择指南
|
目的条带分子量范围 (推荐琼脂糖%) | 标准分辨率 | 高精分辨率 |
|
1500bp以下 (1.0%到2.0% Agrose) | 200bp DNA Ladder | 100bp DNA Ladder |
| 200bp DNA Ladder Plus | 100bp DNA Ladder Plus | |
| 100bp DNA Ladder ODD | DNA Ladder 2000 Plus | |
| 100bp DNA Ladder ODD Plus | DIY DNA Marker(条带任选) | |
| DNA Ladder 2000 | ||
|
1500bp以上 (0.7% Agrose) | DNA Ladder 3000 | 1kb DNA Ladder I |
| DNA Ladder 5000 | 1kb DNA Ladder II | |
| DNA Ladder 9000 | 1kb DNA Ladder Plus I | |
| DNA Ladder 10000 | 1kb DNA Ladder Plus II | |
| λ/Hind III DNA Marker | DIY DNA Marker(条带任选) |
表2:DNA Marker系列一览表
| DNA Marker | 条带组成(bp) | 琼脂糖(%) |
| 100bp DNA Ladder | 100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000 | 1.5% |
| 100bp DNA Ladder Plus | 100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1200、1500、2000 | 1.0% |
| 100bp DNA Ladder ODD | 100、300、500、700、900、1100、1500 | 1.5% |
| 100bp DNA Ladder ODD Plus | 100、300、500、700、900、1100、1500、2000、3000 | 1.0% |
| 200bp DNA Ladder | 200、400、600、800、1000、1200、2000 | 1.5% |
| 200bp DNA Ladder Plus | 200、400、600、800、1000、1200、2000、3000、5000 | 1.0% |
| DNA Ladder 2000 | 100、250、500、750、1000、2000 | 1.0% |
| DNA Ladder 2000 Plus | 100、250、500、750、1000、2000、3000、4000、5000 | 1.0% |
| DNA Ladder 3000 | 100、250、500、750、1000、1500、2000、3000 | 0.7% |
| DNA Ladder 5000 | 100、250、500、750、1000、1500、2000、3000、5000 | 0.7% |
| DNA Ladder 9000 | 500、1000、2000、3000、5000、9000 | 0.7% |
| DNA Ladder 10000 | 500、1000、2000、4000、7000、10000 | 0.7% |
| 1kb DNA Ladder I | 500、1000、 2000、3000、4000、5000、6000、8000 | 0.7% |
| 1kb DNA Ladder Plus I | 100、250、500、750、1000、1500、 2000、3000、4000、5000、6000、8000 | 0.7% |
| 1kb DNA Ladder II | 500、1000、 2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、9000、10000 | 0.7% |
| 1kb DNA Ladder Plus II | 100、250、500、750、1000、1500、 2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、9000、10000 | 0.7% |
| λ/Hind III DNA Marker | 125、564、2027、2322、4361、6557、9416、23130 | 0.6% |
| DIY DNA Marker(条带任选) | 100、200、250、300、400、500、600、700、750、800、900、1000、1100、1200、1500、 2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、9000、10000等24个fregment任选 | 详情请参考说明书 |
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名称:超快核酸电泳液(干粉)
货号:BTN51210
规格:50L
SuperBuffer-2是我司在SuperBuffer基础上开发的DNA/RNA 两用快速电泳液。它跟SuperBuffer一样,能以高达30 V/cm的电压电泳,达到快速电泳的目的。跟SuperBuffer 不同的是,本产品对盐离子浓度敏感度低,同时还能用于RNA电泳。
产品特点:
1.快速,电泳时间短,对分辨率要求不高的电泳(如PCR和酶切检测等)甚至可以在5-10分钟内完成。
2. 不影响后续的Southern杂交,DNA胶回收和DNA连接等反应。
3. 价格与TBE(干粉)相当甚至更。
4. DNA胶回收率高于使用TAE和TBE电泳的胶回收。
储存条件:常温保存和运输,有效期两年。
使用方法:
一:溶液的配制
将本产品全部加到一个干净的容量适当的容器中,按下表的用量加入蒸馏水并在室温下用磁力搅拌器搅拌,直到干粉完全溶解(一般需要30分钟左右)。
配法一(配制20X浓缩液):加2.5升得到20×工作液
配法二(直接配制工作液):加水50升得到50×工作液
注:其他浓度的浓缩液配制可以按比例计算,但浓缩液浓度不能超过20×,否则干粉不能全部溶解。由于干粉含多种未彻底混合均匀的成份,所以必须一次性全部用于溶液的配制。如果缓冲液(浓缩液或工作液)长时间不用,zuì好灭菌后放4℃长期保存。
二:DNA电泳
将SuperBuffer-2浓缩液用蒸馏水稀释到1×,除了需要使用较高电压才能得到快速的电泳结果外,操作跟使用TAE和TBE基本一样。需注意的地方是:
1.电压:在SuperBuffer-2溶液中既可以使用常规电压,也可以使用较高电压,只是使用常规电压时,其快速的优越性就体现不出来。使用较高电压时,由于各电泳槽结构不同,zuì佳电压需要稍做摸索。次zuì好将工作电压调到zuì高电压的80%左右,即平均25 V/cm(电距离)。对一般minigel,一般可以用250-350V 跑5-10分钟;对大的电泳槽,可用400-450V 跑5-10分钟。每次根据电泳结果和缓冲液温度决定各电泳槽的zuì佳工作电压和时间。一般电压越高,电泳时间越短。若在电泳时发生电流或电压逐渐下降的现象,请检查电泳仪是否设置了电流上限或功率上限。缓冲液电泳次数超过3次或缓冲液中有细菌/真菌生长也会出现此现象,需要更换新的缓冲液。
2.胶浓度:建议将琼脂糖凝胶的浓度控制在0.8%左右,对于长度在100bp以下的DNA片段,可以将琼脂糖凝胶的浓度提高到1.2%左右。由于每次溶胶过程中会丢失水份,所以zuì好在溶胶后适当补充水份(可以前后称重),否则胶浓度会逐渐增加,DNA的移动速度会减低、产热会增加。使用0.8%左右的琼脂糖凝胶的好处是一方面可以节约胶的用量,另一方面可以使DNA的泳动速度更快,同时还能够提高DNA的回收率。
3.染色:如果使用EB,zuì好把染料加入到融化后的凝胶中(只是EB的终浓度zuì好为0.4 -0.5μg/mL,比使用TAE和TBE时稍高),但也可以加入到电泳缓冲液中或/和电泳上样液中。如果使用百奥莱博低毒染料绿如蓝,zuì好将染料加入到融化后的凝胶中。如果只有胶中有染料,则长时间电泳后(超过20分钟),大部分染料在高压下会与DNA 分离,DNA 条带可能会看不见或看起来很淡,此时应该再染色一次。在染色液中加入一定的量的NaCl(终浓度≥0.05 mol/L)能提高染色效果。SuperBuffer-2与SYBR Green I 也有良好的兼容性,可以结合使用。
4. DNA 条带扭曲:DNA样品中所含SDS 量过高时(SDS 主要来于上样液),DNA条带将出现扭曲,影响实验效果。建议使用不含SDS的上样液。
5. 反复使用:1×SuperBuffer-2电泳液至少可以重复使用2-3次,如果使用大电泳槽,可以重复使用的次数会更多。
6. TAE和TBE胶:已经用TAE和TBE电泳液配置好的琼脂糖凝胶可以直接放入1× SuperBuffer-2电泳液中按上述电泳条件电泳,但有时候会有扭曲现象。
三:RNA电泳
跟DNA电泳一样,必须在使用前用水将SuperBuffer-2溶液稀释到1×,其使用方法跟DNA电泳的主要区别是:
1.电压:RNA电泳时,zuì高使用电压大约只有DNA zuì高使用电压的一半左右,所以一般minigel可以使用150 V左右的电压。由于各实验室电泳槽规格各异,次电泳时,zuì好将工作电压调到跟MOPS电泳一样的电压,每次再逐渐往上调电压和时间,根据电泳结果和测定缓冲液的温度决定今后的工作电压。
2. RNA上样液:RNA必须与含变性剂的RNA上样液混合,并在80℃保温10分钟后冰浴2-5分钟再上样。不能直接将RNA样品上样或使用DNA上样液,否则电泳不但很难得到清晰的条带,并且在加样孔中还会有看似DNA污染的条带出现。推荐使用百奥莱博生产的RNA变性/上样/染色三合一即用型溶液RNAload。
3.胶浓度:RNA电泳zuì好使用1%-1.5%的琼脂糖凝胶,用1X SuperBuffer-2配制。
4.染色:同DNA电泳。
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| 货号 | 名称 | 规格 |
| BTN3130B | 三合一RNA上样液(B型,6X) | 1.5mL |
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| BTN70503R | DNA marker(100-2000bp) | 50次 |
| BTN120654B | Southern专用DNA Marker(DIG标记) | 20次 |
| BTN60706 | 一管式琼脂糖凝胶DNA回收试剂 | 30次 |
| WE0211 | 6×UltraStain上样缓冲液 | 500μl|500μl×5 |
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