WH0177 蛋白marker（14.4～94

蛋白marker（14.4～94由北京百奥莱博供货并提供相关技术服务支持，本品用于科研目的，本产品质量好，且具价格，深为用户称道，了解更多蛋白marker（14.4～94等蛋白质研究产品请联系我司咨询订购。...

特别提示：包括蛋白marker（14.4～94kDa)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：蛋白marker（14.4～94kDa)
英文名称：Protein Marker（14.4kDa～94kDa)
产品货号：WH0177
产品规格：20次（200μl)

本制品是由7种蛋白质分别纯化后混合而成的蛋白质溶液，分子量范围为14.4-94.0kDa。经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳后用考马斯亮蓝R-250（Coomassie Brilliant Blue R-250)染色可得清晰的7条蛋白带。本制品中每种蛋白约0.1-0.2μg/μl。

本制品为即用型产品，使用前请将蛋白质Marker置于室温数分钟，彻底溶解并轻弹混匀后，无需加热，取10μl蛋白质Marker加入到凝胶（1mm厚mini-gel)孔内进行电泳；若加样孔较大，可适当增加蛋白质Marker用量。使用方便，电泳图像清晰。



贮存液成分：62.5mM Tris-HCl（pH7.0)；5mM EDTA；50mM DTT；30mM NaCl；0.01％溴酚兰；50％甘油；2％SDS。

附：
1× SDS-PAGE buffer：3.0g Tris.base （25mM)，18.8g Glycine （250mM)，1g SDS，用ddH2O定容至1L。
1× Transfer buffer（干转)：5.8g Tris.base （48mM)，2.9g Glycine （39mM)，0.37g SDS，20％甲醇，用ddH2O定容至1L。

保存条件：短期内多次使用置于4℃，-20℃保存一年。

使用方法：
取10μl本产品直接加入到SDS-聚丙烯酰胺凝胶的加样孔中，进行电泳。建议使用分离胶浓度为12％，电压120-200 V，电压过低会导致小分子量的蛋白条带弥散。

电泳条件：
凝胶浓度为12-15％ SDS-PAGE，Mini电泳装置，建议电泳条件为：电压120-200V，时间30-50min。

注意事项：
1．本产品可用考马斯亮蓝R-250 （Coomassie BrilliantBlue R-250)染色。
2．当Marker中有额外条带出现时，需补加新配置的DTT至终浓度100mM。储存缓冲液中DTT氧化易导致Marker中额外条带的出现。

根据您的关注的蛋白marker（14.4～94kDa)，您可能还对以下产品有需求：



名称：动物细胞裂解液B(变性)
货号：BTN80807B
规格：100mL
本产品含有多种细胞裂解成分和蛋白酶抑制成分，可以在非变性或变性条件下迅速裂解组织或培养细胞，使之释放出细胞内蛋白，用于后续实验。

产品特点：
1.快速裂解，多种裂解成分经过精心优化，能快速使细胞裂解。
2. 非变性(BTN80807A)产品能zuì大程度地保留蛋白天然结构和功能，主要用于免疫沉淀和免疫共沉淀，还可以用于蛋白活性检测(信号传递研究和酶动力学检测)和Western Blot等各种后续实验。
3.变性(BTN80807B)裂解细胞的效率更高，主要用于对抗原空间构型不敏感的免疫共沉淀实验，还可以用于Western Blotting。
4.适用于培养细胞(包括悬浮细胞)和新鲜组织。

储存条件：常温运输、4℃保存，有效期一年。

注意事项：
1. 如果在本产品中额外再加入终浓度为1×的、新鲜配制的蛋白酶抑制剂复合物，可以更有效地抑制蛋白酶活性，防止蛋白降解。
2. 如果用于信号传递研究，zuì好在本产品中加入终浓度为1×的、新鲜配制的磷酸酶抑制剂复合物。
3. 整个裂解步骤都要在冰浴或4℃操作。本产品和PBS 均需预先冷却。
4. 本产品所含有较高浓度的去垢剂会对Bradford蛋白浓度测定有较大影响，因此只能使用BCA法测定蛋白浓度。

使用方法：

一：处理贴壁的培养细胞
1. 去除贴壁细胞培养液，用冰浴预冷的PBS 洗两遍，去尽残留的PBS。
2. 将培养板放置在冰上待用。
3. 按每106个细胞加入0.1mL 本产品(或100mm 贴壁细胞加1mL 本产品)的比例向培养板中加入适量的本产品(按此比例裂解得到的裂解物的蛋白浓度约在5-10mg/mL 之间)。
 注意：裂解效率跟细胞数量和本产品用量的比例密切相关。一般情况下6孔板的单孔(1～2×106细胞)需要0.1～0.2mL本产品；25 cm2培养瓶(3～6×106细胞)需要0.3~0.6mL；75 cm2培养瓶(1～2×107细胞)需要1～2mL。对于特别大或特别小的细胞，需要用户摸索zuì佳用量。
4. 冰上放置10-30分钟(zuì佳时间跟细胞系相关)，其间偶尔轻轻摇晃或用枪头轻轻吹打。
5. 将细胞培养板倾斜使上清液汇集在一端，并将其全部转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。
6. 15000×g，4℃离心10分钟，将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中，放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意：如果用于免疫沉淀，zuì好新鲜使用。
7. 用前zuì好先测定上清液的蛋白浓度，然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。

二：处理悬浮细胞
1. 400×g，4℃离心10分钟收集悬浮细胞，弃上清。
2. 用等体积的预冷PBS 洗涤细胞沉淀两遍，步骤同步。
3. 按每106个细胞加入0.1mL 本产品的比例加入本产品，充分悬浮细胞。
4. 冰上放置15分钟裂解细胞，期间偶尔轻柔震荡。
5. 15000×g，4℃离心10分钟，将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。为避免吸取到细胞沉淀，zuì好留20-40μL液体不取。
6. 将上清液放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意：如果用于免疫沉淀，zuì好新鲜使用。
7. 使用前zuì好先测定上清液的蛋白浓度，然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。

三：处理组织块
1. 称量组织块，用毛玻片或玻璃匀浆器研磨或匀浆，用5-10倍体积的、预冷的PBS洗两次(包括冲洗器材)。
2. 将匀浆物转移到离心管中，1500g、4℃离心5分钟后弃上清。
3. 按每50mg 组织加入0.2mL 本产品的比例加入预冷的本产品，吹打混匀，放置冰上。
4. 每隔5分钟振荡器轻柔振荡一次，共4次。
5. 15000×g、4℃离心10分钟，将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中，放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意：如果用于免疫沉淀，zuì好新鲜使用。
6. 使用前zuì好先测定上清液的蛋白浓度，然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。

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货号	名称	规格
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