SY0153 NF-κB-GFP报告基因质粒

NF-κB-GFP报告基因质粒由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科研目的，NF-κB-GFP报告基因质粒是我司众多优质报告基因检测之一，质量堪比同类进口产品，价格非常优惠，目前正热烈促销中，恭候您的咨询订购。...

特别提示：包括NF-κB-GFP报告基因质粒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：NF-κB-GFP报告基因质粒
英文名称：NF-κB GFP Reporter Plasmid
产品货号：SY0153
产品规格：1μg

NF-κB-GFP报告基因是用于检测NFκB转录活性水平为目的的报告基因。 NF-κB基因在炎症反应、免疫应答和抑制细胞凋亡等方面有着重要的作用。

NF-κB-GFP报告基因主要应用于NF-κB信号通路的研究和基于NF-κB信号通路的药物研究以及癌细胞中NF-KB的调控机制的研究。

pGMNF-ΚB-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个NF-κB结合位点，可以地检测NF-κB的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得NF-κB-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGMNF-κB -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMNF-κB -GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。
TNF-α、IL-1β和LPS等是常见的NF-κB激活剂，可作为NF-κB报告基因的阳性对照。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

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名称：萤光素酶报告基因检测试剂盒(海肾)
货号：YT272
规格：100次|1000次
本试剂盒是一种以肠腔素为底物来检测海肾萤光素酶，简称renilla luciferase活性的试剂盒。

海肾萤光素酶是一种分子量约为36kD的蛋白，在氧气存在的条件下，可以催化Coelenterazine氧化成Coelenteramide。在Coelenterazine氧化的过程中，会发出生物萤光。生物萤光可以通过化学发光仪或液闪测定仪进行测定。本试剂盒的检测原理参考下图。


海肾萤光素酶的检测原理图。

通过萤光素和萤光素酶这一生物发光体系，可以非常灵敏、地检测基因的表达。通常把感兴趣基因的转录调控元件或5’启动子区克隆在luciferase的上游，或把3’-UTR区克隆在luciferase的下游等，构建成报告基因质粒。然后转染细胞，用适当药物等处理细胞后裂解细胞，测定萤光素酶活性。通过萤光素酶活性的高低来判断药物处理等对目的基因的转录调控作用。海肾萤光素酶一方面常用作萤火虫萤光素酶报告基因检测的内参，以消除由于质粒的转染效率不同而带来的误差；另一方面海肾萤光素酶也可以和萤火虫萤光素酶一样被用于常规的报告基因检测。海肾萤光素酶催化Coelenterazine发光的zuì强发光波长为465nm。

注意事项：
1. 为取得zuì佳测定效果，在用单管的化学发光仪测定时，样品和测定试剂混合后到测定前的时间应尽量控制在相同时间内，例如30秒内；使用具有化学发光测定功能的多功能荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好，然后统一加入海肾萤光素酶检测工作液。
2. 由于温度对酶反应有影响，所以测定时样品和试剂均需达到室温后再进行测定。
3. 样品和测定试剂混合后，必须等待1-2秒，再进行测定。测定时间通常为10秒，根据情况也可以测定更长或更短时间，但是同一批样品宜使用相同的测定时间。
4. 海肾萤光素酶检测底物(100×)配制在无水乙醇中。由于无水乙醇容易挥发，有时会在初次使用时发现体积明显小于100μl的情况，此时用无水乙醇把体积补足至100μl，并混匀后即可使用。
5. 海肾萤光素酶检测工作液宜配制后立即使用。如不能立即使用，-20℃可以保存一周。随着保存时间的延长检测效果会不断下降，因此不可配制成工作液后长期保存。
6. 为避免由于质粒转染细胞时效率的差异而带来的误差，可以同时转入适当的萤火虫萤光素酶的报告基因质粒作为内参，采用百奥莱博的双萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT272)进行检测；也可以同时转入β-半乳糖苷酶报告基因质粒作为内参，然后采用百奥莱博的β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒(YT274)进行检测。采用本试剂盒中的报告基因细胞裂解液裂解获得的样品可以直接用于β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒(YT274)的检测。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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