BTN70701 柱式病毒DNA提取试剂盒

产品简介
柱式病毒DNA提取试剂盒由北京百奥莱博供货并提供相关技术服务支持,本品用于科研试验,本品质量稳定,价位合理,需要柱式病毒DNA提取试剂盒等DNA提取纯化产品的客户,请到我公司官网联系我们。...
产品详细介绍
特别提示:包括柱式病毒DNA提取试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:柱式病毒DNA提取试剂盒
英文名称:Virus DNA column extraction kit
产品货号:BTN70701
产品规格:50次
本试剂盒是在一管式病毒DNA提取试剂盒的基础上开发的、专门用于从血清(血浆)等液体样品及拭子(咽拭子、鼻拭子、口腔拭子、阴道拭子等)中提取微量病毒DNA的产品。
试剂盒特点:
1. 操作简单,整个过程只需要20分钟左右,不需要额外在洗柱液中补加乙醇。
2. 灵敏度高,通过PCR 检测到的zuì终灵敏度可以达到30-50拷贝/mL。
3. 安全,不需要使用苯酚和氯fǎng等有机溶液。
4. 如果加上病毒离心富集步骤,zuì多可以处理1.5mL液体病毒样品。
5.与PCR和荧光PCR 兼容。
6. 价廉物美,远高于国外同类产品。
7.适用于各种材料,包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无细胞材料。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 30ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液3.0 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
使用方法:
1. 对于液体病毒样品:在1.5mL离心管中加入0.1-0.2mL液体病毒样品。如果病毒需要富集,可以将1.5mL液体在4℃ 24,000 g 冷冻离心60分钟,移弃1.3mL后剩下的0.2mL 用于第2 步处理。对于拭子样品:将一个拭子放入离心管中,加入1mL自备的生理盐水,振荡器上充分振荡半分钟,然后转移0.2mL 到1.5mL塑料离心管中,用于第2 步处理。
2. 加入0.6mL溶液A到步得到的0.2mL样品中,振荡30秒混匀后室温放置10分钟。注意:溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 短暂离心后将500μl溶液转移到离心吸附柱中,室温放置2分钟。
4. 12000rpm室温离心1分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。
5. 将剩余溶液短暂离心后全部转移到步骤3的离心吸附柱中,室温放置2分钟。
6. 12000rpm室温离心1分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。
7. 加入0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12000 rmp室温离心1分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。
8. 12000rpm室温离心1分钟(干甩),弃含穿透液的离心管。
9. 将干甩后的离心吸附柱套入到一个自备的RNase-free的1.5mL离心管中,在离心吸附柱的滤膜的中部加入30-100μl DNA 洗脱液3.0,然后室温放置2分钟。
10. 12000rpm室温离心1分钟,离心管中的溶液即为病毒DNA溶液。
11. DNA样品可以直接用于PCR,也可放-20℃长期保存。
疑难解答:
Q:提取液体样品/病毒核酸(RNA或DNA)为何很难?
A:原因一是量少。病毒颗粒中的RNA或DNA是作为遗传物质保存,每个病毒zuì多只携带几个拷贝(而一个细胞中有上万种RNA分子,每种RNA 有很多拷贝),同时其长度也十分有限(一般不到细胞基因组的万分之一),样品中病毒数往往又不是很多,使得样品中病毒核酸的量往往比一个细胞中核酸的量还少,所以操作中十分容易丢失。另外,由于得到的核酸量很少,不能使用电泳和测OD检测,只能通过PCR或RT-PCR 检测,而PCR或RT-PCR的条件又需要优化,所以要确定提取是否成功十分不容易。
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名称:红细胞裂解液A型(核酸纯化)
货号:BTN60403
规格:250mL
本品用于快速裂解哺乳动物全血中的红细胞而基本不破坏白细胞和其他淋巴细胞的完整性。由于红细胞是血液的主要细胞成份,不含DNA和RNA,其所含血红素能抑制PCR反应,所以先用本产品裂解红细胞,再提取基因组DNA或RNA 有助于提高所得样品纯度。
产品特点:
1.快速,一次处理只需要2-3分钟。处理后提取血液DNA可以不需要酚/氯fǎng去蛋白质。
2.,一次处理能裂解80%以上的哺乳动物红细胞,一般样品zuì多只需要处理两次。
3.扩容性好,可以一次处理多达几十毫升的样品,也可以处理100μL的血液。
4. 兼容性好,可以与市场上大多数血液DNA提取试剂盒结合使用。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在装有抗凝血液的离心管中,按1:1的比例加入红细胞裂解液A型并轻柔颠倒混匀。
2. 5000-10000 g室温离心2分钟,小心吸弃弃上清。
3. 将细胞沉淀重悬于1/2 体积的红细胞裂解液A型中,轻柔吹打混匀后5000-10000g室温离心2分钟。
4.沉淀即为去除了红细胞的血液细胞,可以直接用于后续的实验。
名称:菌体内毒素清除剂
货号:BTN90901
规格:200mL
内毒素是E.coli细胞壁的主要成分,传统的去除内毒素的方法是将内毒素和DNA一起纯化出来,然后再用各种方法去除其中的内毒素,操作繁琐,DNA 回收率低。本产品可以直接把E.coli 表面的内毒素去除,从根本上避免了内毒素对后续操作(如质粒DNA提取,重组蛋白质提取)的污染。
产品特点:
1. 个在菌体收集阶段去除内毒素的产品,从源头上避免了内毒素跟DNA和胞浆蛋白的接触,从根本上防止了可能产生的污染。
2. 操作简单快速,用酶溶液温和清洗菌体3-4次即可去掉细菌表面的内毒素,只需要10分钟左右时间,不需要复杂仪器设备。
3.,能去除99%以上的内毒素。
4.跟各种质粒DNA提取、基因组DNA提取和蛋白质提取等操作兼容,DNA丢失率只有10%左右(其他方法DNA 丢失率可以高达50%)。
5. 不影响DNA和大部分蛋白质的活性,处理过的质粒DNA可用于转染实验。
6. 既可小规模使用(在1.5mL离心管内),也可放量用于大规模无内毒素质粒DNA提取和无内毒素蛋白质纯化。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
使用方法:
一:用于菌液小于3mL的样品
1. 收集1.5-3mL E.coli 饱和菌液,12000rpm离心1分钟,弃上清,得到细菌沉淀。
2. 加入1mL 本产品温和混匀后10,000-12000rpm离心1分钟,弃上清(含内毒素)。
3. 再重复上述操作3-4次,得到的菌体可以直接进入后续的无内毒素质粒DNA提取或无内毒素蛋白质提取程序。
二:用于菌液多于3mL的样品
整个操作同上,只是在15或50mL塑料离心管中进行,离心速度不能超过离心管的承受力,本产品的用量按比例增加。
疑难解答:
Q:为何用常规的方法很难去除生物样品中的内毒素?
A:因为内毒素带电性跟DNA和部分蛋白质相同,所以基于带电性的分离方法(如硅胶膜吸附,离子交换吸附)不能将它们分开;同时内毒素又是双性分子(类似于细胞膜的磷脂分子),能够形成大小不等的聚合物,跟质粒DNA和蛋白质大小接近,所以基于分子量大小的分离方法(如凝胶排阻过滤和氯化铯超速离心)也不能将其有效分离。

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