SV1554 Ph.D.-C7C 噬菌体展示肽

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特别提示：包括Ph.D.-C7C 噬菌体展示肽库试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：Ph.D.-C7C 噬菌体展示肽库试剂盒
产品货号：SV1554
产品规格：10 次淘选实验

Ph.D.试剂盒组成:
– 10 次淘选实验的足量噬菌体展示库，10 9 个克隆
– 28 gIII 测序引物（100 pmol）
– 96 gIII 测序引物（100 pmol）
– E. coli 宿主菌 ER2738
– 对照实验靶分子（链霉亲和素）和洗脱剂（生物素）
– 详细的使用手册
建议测序引物序列（不提供）如下:
-28 gIII 测序引物 (22-mer)
5´d(GTATGGGATTTTGCTAAACAAC)3´
-96 glll 测序引物 (20-mer)
5´d(CCCTCATAGTTAGCGTAACG)3´
概述:
噬菌体展示是一种体外筛选技术。它可以将一系列多肽或蛋白质文库展示在噬菌体颗粒的外部，而编码这些蛋白的 DNA 则位于病毒颗粒内部。利用展示蛋白与其编码 DNA 之间的联系，我们可以通过一种简单的称为“生物淘选”的体外筛选方法，快速筛选出给定靶分子（抗体、酶、细胞表面受体等）的亲和配体。zuì简单的淘选方法是（见图 1）:将展示不同多肽的噬菌体文库与固定在平板或小珠上的靶分子孵育，先洗去未结合的噬菌体，而后洗脱特异性结合的噬菌体。扩增洗脱下的噬菌体。重复上述结合扩增过程，使与靶分子结合的多肽序列的噬菌体得到富集。经过 3-4轮筛选后，每个克隆通过 DNA 测序或 ELISA 鉴定。
我公司提供 3 种随机肽库和供自制肽库所需的 M13KE克隆展示载体。这 3 种肽库包括 7 肽库（Ph.D.-7）、12 肽库（Ph.D.-12）和含有二硫键的环 7 肽库（Ph.D.-C7C）。Ph.D.-C7C 随机肽库所展示的多肽两侧各加了一个半胱氨酸。噬菌体组装时经过氧化，形成环化的多肽。所有肽库的容量超过 20 亿个克隆。上述 3 种肽库表达的随机肽均在噬菌体次要包膜蛋白 p III 的 N 端，故每一个病毒粒子可以表达 5 个拷贝。Ph.D.-7 和 Ph.D.-12 肽库表达的展示肽就是展示肽本身，不含有其它额外氨基酸，但是 Ph.D.-C7C表达的展示肽前含有 Ala-Cys。所有的肽库在展示肽和 p III 之间存在连接肽段（Gly-Gly-Gly-Ser）。
展示在噬菌体表面的随机肽库已被应用于多种领域，包括绘制抗原表位图谱（图 2）、研究蛋白质与蛋白质相互作用及酶抑制剂，并且还用于发现 GroEL、HIV、半导体表面、小分子荧光团和药物的肽配基。通过对纯化的受体和完整细胞进行淘选，已经鉴定出了具有生物活性的受体配基。通过体外淘选分离出来的具有细胞特异性的靶多肽，已成功运用于该细胞基因的传递。应用本系统也能鉴定霉菌孢子和细菌细胞的配基，如:在体内、外均可特异性抑制炭疽霉素的多肽。此外，本系统还适用于体内淘选组织特异性多肽，将噬菌体注射到活体动物体内，采集相应的器官，然后再从中分离出具有组织特异性的噬菌体。

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