KFS238 p27蛋白检测试剂盒

p27蛋白检测试剂盒由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科研目的，我公司的p27蛋白检测试剂盒品质上佳，经过多年的开发生产，已然非常成熟，欢迎广大新老客户订购。...

特别提示：包括p27蛋白检测试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：p27蛋白检测试剂盒
英文名称：p27 Detection Assay(Western Blot)
产品货号：KFS238
产品规格：50T

本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取全蛋白， 用含有蛋白酶抑制剂及磷酸酶抑制剂的裂解缓冲液LysisBuffer 匀浆裂解组织或细胞，作用温和，提取过程简便。获得的全蛋白可用于Western Blot、免疫共沉淀等后续研究（本试剂盒包含兔抗p27抗体），但不能用于蛋白激酶及磷酸酶免疫共沉淀的研究，因本试剂盒中包括这两种酶的抑制剂。

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名称：蛋白银染试剂盒
货号：WE0281
规格：20次
  本试剂盒采用高灵敏度的银染染料，可应用于变性胶及非变性胶的蛋白染色，具有目的条带清晰、背景低，操作时间可灵活控制的优点。另外，本试剂盒增加了一步短时敏化作用步骤，可明显降低背景及提升目的条带的亮度。

试剂盒组成：

组份	20次
Silver Stain Sensitizer(500×)	2×1ml
Silver Stain Enhancer	3ml
Silver Stain	2×250ml
Silver Stain Developer	4×125ml

注意事项：
1、请提前准备50ml固定液(超纯水：乙醇：冰醋酸=6:3:1)、50ml洗脱液(10%乙醇)和50ml终止液(5%的冰醋酸)。
2、操作时请使用去离子水和洁净的玻璃或塑料器皿，须戴一次性手套进行操作。
3、整个银染过程需在摇床上进行，摇床转速约60 rpm左右。
4、需自备乙醇，冰醋酸。

操作步骤：
  以下操作步骤中各溶液的用量以大小为8.5×5.5 cm、厚度为1.0 mm的凝胶为例，以凝胶全部浸没到溶液为准，置于摇床上操作，一般用量25ml。对于大型凝胶，各溶液的使用量需按凝胶体积的比列放大。
  请提前准备好50ml固定液(超纯水：乙醇：冰醋酸=6:3:1)、50ml洗脱液(10%乙醇)和50ml终止液(5%的冰醋酸)。
1、水洗：电泳完成后，用超纯水洗胶2次，每次洗涤5分钟。
2、固定：用25ml固定液固定凝胶2次，每次固定15分钟。
3、洗脱：用洗脱液洗胶2次，每次洗涤5分钟。
4、水洗：用超纯水洗胶2次，每次洗涤5分钟。
5、增敏：将上一步洗好的凝胶置于银染增敏工作液中，室温下准确孵育1分钟后用超纯水洗胶3次，每次洗涤20秒。
银染增敏工作液的配制：取50μl Silver Stain Sensitizer(500×)加入到25ml超纯水中，混匀。
6、银染：弃去超纯水，将凝胶置于银染工作液中孵育30分钟。
银染工作液的配制：取25ml Silver Stain加入50μl Silver Stain Enhancer混匀。
7、水洗：用超纯水快速洗胶2次，每次洗涤准确控制为20秒。
8、显影：立即将洗好的凝胶浸没在显影液中，室温孵育2-3分钟，直至蛋白条带显示清晰。
显影液的配制：取25ml Silver Stain Developer加入30μl Silver Stain Enhancer混匀。
注意：显影30秒内，蛋白条带开始显现，继续显影至2-3分钟。若蛋白条带显色较浅，可适当延长显影时间至5分钟及以上。
9、终止：用终止液洗去凝胶上的显影液后，将凝胶浸泡在新的终止液中反应10分钟。

实验图例

BSA蛋白样品经过10%的SDS-PAGE凝胶电泳后银染结果
BSA蛋白分子量约为66 kD，上样量从左到右分别为50ng，10ng，5ng

储存条件：室温。

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SNM391	蛋白酶抑制剂混合物(100×)	1ml
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RFT062	1M Tris(pH6.8)	100ml|500ml

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