RFT083 超敏BalbECL发光液

超敏BalbECL发光液由北京百奥莱博供货并提供相关技术服务支持，本品用于科研试验，我公司专注于蛋白质研究产品的研发、生产和供应，为您提供的超敏BalbECL发光液质量可靠，批间差小，且价格公道，热切盼望您选购我们的产品。...

特别提示：包括超敏BalbECL发光液在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：超敏BalbECL发光液
英文名称：High sensitive BalbECL luminescence liquid
产品货号：RFT083
产品规格：25ml|100ml|500ml

本品是一种超敏ECL发光液，可与二抗上耦连的辣根过氧化物酶(HRP)发生化学反应，发出荧光，从而可以通过用X光片压片或其它适当荧光成像设备检测样品。BalbECL具有高灵敏度和高信噪比，可检测出10-100 fg的微量抗原；发光迅速，荧光可使X感光胶片感光达12小时以上，特别适用于痕量蛋白检测；另外高灵敏度可以大大节省宝贵的样品以及非常昂贵的一抗和二抗的用量，降低实验成本。

使用方法：
1、BalbECL工作液的配制：等体积混合适量BalbECL A液和B液，室温放置备用。工作液宜在临检测前配制。
2、Western二抗孵育后，并进行数次洗涤后，用平头镊子将膜取出，用滤纸略吸去过多的液体(切勿接触膜的蛋白面)，但不要使膜过度干燥，然后将膜平铺于一洁净保鲜膜上，避免产生气泡。
注：某些市售保鲜膜包裹印迹膜时会淬灭荧光，请选择ECL专用保鲜膜获得更好的实验效果。
3、根据膜的大小，按每平方厘米膜加0.125 ml BalbECL工作液的比例，滴加BalbECL工作液到膜上，确保使工作液均匀覆盖在膜上，常温放置1-2分钟。
注：为达节约目的可将膜减小但勿降低发光液用量，确保发光液完全覆盖于膜上。
4、将保鲜膜折起来完全包裹杂交膜，去除气泡和皱褶，可剪去边缘部多余的保鲜膜。用滤纸吸去多余的发光工作液。用胶带将覆盖杂交膜的保鲜膜固定在暗盒内。
5、在黑暗中放入X感光胶片，分别曝光不同的时间如数秒到数分钟，显影定影观察冲洗结果。如掌握不好曝光时间，可以在膜上放置3-4张X感光胶片，统一曝光3-5分钟，显影后选择一张曝光zuì好的胶片。

注意事项：
1、BalbECL A液和B液在吸取过程中必须要更换枪头，A液和B液相互污染后会导致A液或B液逐渐失效，影响后续的使用效果。
2、各溶液使用后，请盖紧瓶盖，以防失效。
3、为获得zuì佳实验结果，请务必优化实验条件，包括检测样品的用量、一抗、二抗稀释度、杂交膜及封闭试剂的选择。
4、由于叠氮钠是HRP抑制剂，在缓冲液中应避免使用叠氮钠作为防腐剂；如果二抗中含有叠氮钠，发光实验前要进行5次TBST或PBST漂洗，每次10分钟。
5、在与膜发生接触过程中，请佩戴手套且使用干净镊子等洁净器材，避免蛋白污染产生高背景。

储存条件：2～8℃，有效期一年。

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名称：动物线粒体总蛋白提取试剂盒
货号：BTN130891
规格：50次

名称：蛋白酶抑制剂混合液
货号：BTN80808
规格：1mL
组织/细胞裂解时会释放出大量的内源性蛋白酶，引起蛋白质的降解，影响试验结果。加入外源性蛋白酶抑制剂，抑制蛋白酶的活性，防止蛋白降解，已经成为蛋白质研究的常规操作。

产品特点：
1. 即开即用，不需要单独购买每个成分再配制。
2. 抑制谱广，由多种蛋白酶抑制剂组成，能特异性抑制丝氨酸蛋白酶(Serine Protease)、半胱氨酸蛋白酶(Cysteine protease)、天门冬氨酸蛋白酶。
3.与各种细胞裂解液兼容，可以共同使用。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：临用前室温融解蛋白酶抑制剂复合物(100×)，混匀，按照1:100 比例加入到组织细胞裂解液中。

注意事项：
1.蛋白酶抑制剂复合物在水溶液中不稳定，15分钟即可水解掉～50%的活性，需临用前加入。
2. 避免反复冻融，可分装储存。

名称：微量BCA蛋白定量试剂盒
货号：WE0273
规格：1600次微孔板(50管次)
  BCA蛋白定量法是目前广泛使用的蛋白定量方法之一。本产品是基于BCA(Bicinchoninic Acid)法研制而成，实现了对蛋白质进行快速、 稳定、 灵敏的浓度测定。 其原理是在碱性环境下蛋白质分子中的肽链结构能与Cu2+络合生成络合物，同时将Cu2+还原成Cu+。BCA试剂可敏感特异地与Cu+结合，形成稳定的有颜色的复合物。在562 nm处有高的光吸收值，颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，可根据吸收值的大小来测定蛋白质的含量。本试剂盒专为低蛋白浓度样品的蛋白定量而设计，可测定浓度为2.5-200μg/ml的蛋白溶液，试剂盒的灵敏性高，平行性好，不同种蛋白之间的测量差异低。本试剂同多种非离子型去污剂有较好的相容性。

试剂盒组成：

组成	规格
Micro BCA Reagent A(MA)	120ml
Micro BCA Reagent B(MB)	120ml
Micro BCA Reagent C(MC)	6ml
BSA Standard Solution(2mg/ml)	2ml

保存条件：BSA Standard Solution：2～8℃，其它组分：室温

注意事项：BSA标准品的稀释液需与待测样品的稀释液一致(可用1×PBS或0.9%生理盐水进行稀释)。

使用方法：
1、稀释BSA标准品：用与待测蛋白样品相一致的稀释液按下表稀释BSA标准品。

管号	稀释液用量(μl)	标准品用量(μl)	zuì终浓度(μg/ml)
A	360	40	200
B	400	100(从A管中取)	40
C	250	250(从B管中取)	20
D	250	250(从C管中取)	10
E	250	250(从D管中取)	5
F	250	250(从E管中取)	2.5
G	250	0	0(空白)

2、配制Micro BCA测试工作液：根据标准品和样品的数量配制测试液。
试剂MD配制：4 volume MC + 100 volume MB
测试工作液WR配制： 1 volume MA + 1 volume MD
充分混匀后待用。
3、试管及微板检测(蛋白浓度检测范围：2.5-200μg/ml)
1)按上表准备好标准品及待测样品。
2)将蛋白样品和测试工作液WR按照1:1(体积比)比例充分混匀。在60℃孵育60分钟。建议：标准96孔微孔板测试以300μl/孔为zuì佳。
3)孵育完成后冷却到室温，在562 nm处读取吸光度值。
4)标准品与待测样品的吸光度值要扣除空白对照的吸光度值，然后进行浓度的计算。
5)如果所得到的蛋白浓度不在检测范围内，请重新稀释样品后再次测定。

附表1. 干扰物质表

化合物	耐受浓度
缓冲液
乙酸盐	0.2M
甘氨酸	1M
HEPES	0.1M
MES	50mM
MOPS	50mM
Na+-柠檬酸	＜1mM
PIPES	50mM
磷酸钠	0.1M
乙酸钠	0.2M pH 5.5
TES	50mM
Tris	0.1M
盐类
硫酸铵	干扰
NaCl	1M
尿素	3M
性化合物
DMSO	5%
甘油	10%
去垢剂和变性剂
Brij35	1%
CHAPS	1%
盐酸胍	4M
NP-40	1%
辛葡糖	1%
SDS	1%
Triton X-100	1%
糖类
葡萄糖	10mM
蔗糖	1M
螯合剂
EDTA	100mM
还原剂
β-巯基乙醇	50μM
DTT	1mM
其他
脂类	干扰
HCl/NaOH	0.1M

储存条件：2～8℃


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