SNM431 抗体清除液

产品简介
抗体清除液是高品质的蛋白质研究产品,由北京百奥莱博供应,本产品用于科学研究,我公司的抗体清除液品质上佳,经过多年的开发生产,已然非常成熟,欢迎广大新老客户订购。...
产品详细介绍
特别提示:包括抗体清除液在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:抗体清除液
英文名称:Antibody Detergent
产品货号:SNM431
产品规格:500ml
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名称:血清白蛋白清除剂
货号:BTN61205
规格:15次
血清是研究人和动物蛋白质组的重要样本,但由于白蛋白占血清总蛋白质的60%左右,会对其它低丰度蛋白的检测造成了大的干扰,因此,有效去除血清白蛋白是更好地鉴定其他的蛋白的先决条件之一。本产品就是专门用于有效去除血清白蛋白的产品。
产品特点:
1.简单,不需要除离心机以外的特殊仪器设备,可平行处理多个样品。
2.可以放量操作。
3.,一次能有效去除60%左右的白蛋白,有利于检测低丰度蛋白。
4.得到的样品与后面的研究方法(如2D电泳、mass spectrometry等)兼容。
5.经济实惠,价格比国外同类产品一半以上。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 1.5mL |
| 溶液B | 15mL |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
使用方法:
1.将100μL冰浴的溶液A加入到20μL血清样品中,轻柔振荡混匀。
2.-20℃放置90分钟。
3.15000g 4℃离心20分钟。
4.小心将上清(含白蛋白部分)吸出。
5.将1mL 冰浴的溶液B加入到沉淀中,振荡混匀。
6.冰上放置15分钟。
7.15000g 4℃离心20分钟。
8.小心弃上清,沉淀即去除了大部分白蛋白的血清蛋白质。
9.冷冻干燥沉淀后待用。得到的蛋白质可以直接用于PAGE电泳和MS等分析。
名称:Protein A琼脂糖凝胶
货号:WE0271
规格:5ml
本产品可从血清,腹水,细胞培养上清和细胞抽提物中分离和纯化多种哺乳动物丌同亚型的抗体或包含抗体 Fc片段的基因工程重组蛋白。具有高IgG结合特异性,高流速,低Protein A-Agarose脱落等特点。
注意事项:
1、凝胶从冷室或冰箱中取出后在室温下缓慢振摇恢复到室温后装柱,避免产生气泡影响柱效。
2、装柱时尽可能维持凝胶长径比为5:3-2:1,长径比过大将导致洗脱峰拖尾,洗脱体积增大;长径比过小将导致样品与填料接触时间短,吸附不充分,填料吸附蛋白量小。
3、若上样液中抗体浓度过高,应使用平衡缓冲液稀释至1-2 mg/ml,抗体浓度过高影响柱效。
4、可以采用降低上样时的流速来增加样品与填料接触时间从而提高纯化抗体量。
5、凝胶用低pH缓冲液洗脱时间应尽可能短,洗脱后用中性缓冲液尽快中和至pH中性,以延长亲和介质的使用寿命。
6、洗脱后,应立刻用如中和缓冲液将收集到的抗体溶液中和到中性(pH7.4左右),以利于维持抗体的生物活性,避免抗体失活。
7、填料使用后应用0.1 M柠檬酸钠缓冲液(pH3.0)做再生处理,长期采用端的洗脱条件将缩短亲和介质的使用寿命。
使用方法:
I 缓冲液的准备
1、平衡缓冲液:纯化不同动物和不同亚型抗体时所用平衡缓冲液是不同的,部分参照如下。
| 抗体 | 平衡缓冲液成分 |
| 人IgG1、人IgG2、小鼠IgG2a、小鼠IgG2b | 20 mM PBS,300 mM NaCl,pH7.4-8.5 |
| 人IgG3、人IgG4、小鼠IgG1、大鼠IgG3 | 50 mM Tris-Cl,3 M NaCl,pH7.8-8.5 |
2、洗脱缓冲液:0.1 M柠檬酸钠缓冲液,pH4.0。
3、再生缓冲液:1 M NaCl。
4、中和缓冲液:1 M Tris-Cl,pH9.0。
注意:
1)以上缓冲液使用前均需0.45μM滤膜过滤。
2)为提高抗体和介质的吸附力。可适当提高平衡缓冲液中的盐浓度和ph值。
II 样本制备
1、样品用平衡缓冲液稀释5-10倍。
2、细胞培养液中大量的血清蛋白会对亲和层析造成一定的干扰,去血清处理或稀释样品将提高纯化抗体收率。
注意:样品在上柱前需0.45μM微孔滤膜过滤。
III 操作步骤
1、将Protein A-Agarose填料混匀后加入层析柱,室温静置10分钟,待凝胶与溶液分层后,把底部的出液口打开,让乙醇通过重力作用缓慢流出。
2、向装填后的柱中加入3-5个柱床体积的超纯水将乙醇冲洗干净,用平衡缓冲液流洗5-10个柱床体积平衡柱子。
3、将样品上柱,上样流速60 cm/h。
4、平衡缓冲液再洗5-10个柱床体积,直至基线平稳。
5、洗脱缓冲液洗脱,收集洗脱峰,用中和缓冲液将洗脱收集样品中和到中性。
6、立即用5-10个柱床体积平衡缓冲液平衡柱子到中性。
7、再生缓冲液流洗3-5个柱床体积。先后用纯水、20%乙醇分别流洗3-5个柱床体积。柱子置于2~8℃保存。
注意:收集洗脱峰时可以分阶段收集到多个管中,zuì后根据测定结果重新调整收集方式。
8、本产品使用10次以上后先用20%乙醇洗5个柱床体积,再用70%乙醇洗脱5-10个柱床体积,再用20%乙醇流洗3-5个柱床体积。柱子置于2~8℃保存。
储存条件:2~8℃,避免冷冻
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