QN1110 4×蛋白上样缓冲液

4×蛋白上样缓冲液的品牌是百奥莱博，是优质的蛋白质研究产品，本制品用于生化实验研究等领域，本品质量稳定，价位合理，需要4×蛋白上样缓冲液等蛋白质研究产品的客户，请到我公司官网联系我们。...

特别提示：包括4×蛋白上样缓冲液(含β-巯基乙醇)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：4×蛋白上样缓冲液(含β-巯基乙醇)
英文名称：SDS-PAGE loading buffer,4×(with β-Mercaptoethanol)
产品货号：QN1110
产品规格：10ml

本产品适用于SDS-PAGE(SDS变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDS，β-巯基乙醇，溴酚蓝，缓冲盐溶液等。 SDS可与蛋白质结合使蛋白质－SDS复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异，SDS还可以断开分子内和分子间的氢键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构;β-巯基乙醇可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质的四级结构，消除了蛋白结构之间的差异。zuì终无电荷及结构上差异的蛋白(亚单位)，电泳速度只是与其分子量大小有关;溴酚蓝用作电泳时的指示剂，可大概指示电泳结束的时间。

使用说明：
1. 请按每10μL蛋白样品加入10μL上样缓冲液的比例(2倍稀释)来使用。如果蛋白浓度过高，可用双蒸水稀释样品。
2. 混匀后，100℃水浴加热3～5分钟，使蛋白变性。
3. 冷却到室温后，10000～14000rpm离心2-5分钟，取上清直接上样电泳即可。

注意事项：
1. 聚丙烯酰胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右;胶浓度12%时，约在20kd左右;胶浓度15%时，大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。
2. 本试剂因含β-巯基乙醇，有一定的毒性，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3. 蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂，PH值受保存温度影响，在低温冻存状态下，溶液可能会呈现深棕色，不影响产品使用。

储存条件：2～8℃，有效期3个月

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名称：动植物总蛋白微量提取试剂盒
货号：BTN90707
规格：50次
本产品用于快速提取动植物总蛋白，用于SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析以及蛋白活性测定等。

产品特点：
1. 提取过程十分简便，匀浆离心即可，整个过程只需要十几分钟。
2. 采用独特的温和裂解成分，蛋白保持天然活性。
3.适用于各种动植物组织材料，包括新鲜或冰冻的材料。
4. 得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D电泳、Western印迹分析以及蛋白活性测定等下游实验。
5.一次可以处理100mg左右的样品，足够进行几十次SDS-PAGE mini胶电泳检测。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	50ml
5×SDS-PAGE上样液	1ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，5×SDS-PAGE上样液短期4℃保存，长期可放-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
使用前，zuì好请在溶液A中加入自备的1M DTT溶液50μL。

一：匀浆法
 注意：对致密的实体组织(如肌肉)，zuì好用Polytron 式匀浆机匀浆处理。
1. 称取动物或植物组织样品100mg，剪刀剪成黄豆大小，转移到10-15mL的塑料离心管中。
2. 加入1ml溶液A，在冰上用Polytron 式匀浆机匀浆，直到没有肉眼可见的组织块。为了避免产热，可以分多次匀浆，其间放冰上让匀浆液冷却。
3. 将匀浆液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。
4. 4℃ 12000 g离心10分钟，组织残渣碎片将形成沉淀。
5. 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要测定蛋白浓度，请使用BCA方法，不要使用Bradford方法(如果要使用，也需要把样品稀释10倍后再测定，否则溶液A中的成分会影响浓度侧定)。如果要进行SDS-PAGE电泳，可取部分到离心管中，加入5×SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×)，在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。

二：直接研磨法
 注意：可以使用玻璃和陶瓷的研钵，也可以使用与微量离心管式的研磨杵(BTN80603)
1. 称取动物或植物组织样品100mg，剪刀剪成黄豆大小，转移到预冷的研钵或离心管中。
2. 加入1ml溶液A，用研磨杵研磨，直到没有肉眼可见的组织块。
3. 将匀浆液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。
4. 4℃ 12000g离心10分钟，组织残渣碎片将形成沉淀。
5. 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要测定蛋白浓度，请使用BCA方法，不要使用Bradford方法(如果要使用，也需要把样品稀释10倍后再测定，否则溶液A中的成分会影响浓度侧定)。如果要进行SDS-PAGE电泳，可取部分到离心管中，加入5×SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×)，在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。

三：液氮研磨法
 注意：zuì好使用玻璃和陶瓷的研钵
1. 取大约100mg动物或植物组织样品，转移到预冷的研钵中。
2. 加入少量液氮，用研磨杵研磨成粉。
3. 加入1ml溶液A溶解，然后将溶液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。
4. 4℃ 12000 g离心10分钟，组织残渣碎片将形成沉淀。
5. 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要测定蛋白浓度，请使用BCA方法，不要使用Bradford方法(如果要使用，也需要把样品稀释10倍后再测定，否则溶液A中的成分会影响浓度侧定)。如果要进行SDS-PAGE电泳，可取部分到离心管中，加入5× SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×)，在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。

注意事项：
1．如果4℃ 12000g离心10分钟后得到的上清液中还有可见的沉淀，可以将上清转移到一个新的离心管中后再4℃ 12000g离心10分钟，以去除可见的小碎片。
2．植物组织中存在有大量的多酚、多糖、色素、次生代谢产物，如果需要除去植物蛋白样品中残存的色素等杂质，可以在zuì后得到的上清液中加入5倍体积的冷丙酮或冷甲醇，混匀后-20℃放置1小时或过夜，然后4℃,12000rpm离心10min，弃上清后室温风干，然后将样品溶于自备的后续实验缓冲液中即可。经过此纯化处理后，部分蛋白质可能会发生变性，不能再用于活性检测。

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