KFS160 线粒体橙色荧光探针

线粒体橙色荧光探针的品牌是百奥莱博，是优质的探针标记及检测产品，本制品用于生化实验研究等领域，本品质量稳定，价位合理，需要线粒体橙色荧光探针等探针标记及检测产品的客户，请到我公司官网联系我们。...

特别提示：包括线粒体橙色荧光探针在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：线粒体橙色荧光探针
英文名称：MitoOrange
产品货号：KFS160
产品规格：100μL

具有细胞膜渗透性的MitoOrange（分子量427.4）探针包含一个温和的巯基反应性氯甲基基团，可用于标记线粒体，并在固定之后保留在线粒体内。标记线粒体，细胞可以与MitoOrange 探针简单孵育，探针通过被动扩散传过质膜，并在有活性的线粒体内富集。一旦线粒体被标记，细胞再用醛基类固定剂固定之后，就可以进一步做下游实验的深入处理。这些MitoOrange 染料可以解决一些致病性细胞上研究所面临的困难，因为标记线粒体可以在细胞被固定之前开展。

虽然传统的荧光染料，如四甲基罗丹明和罗丹明123，很容易识别功能性线粒体，但是这些染料一旦在线粒体去化时也很容易被洗涤出线粒体。这些缺点限制了常规染色实验中所用的醛类固定剂，以及一些实验用的处理药品的选择。而MitoView 染料可以很好的解决这一问题。
浓度：0.5mM in DMSO
储存：-20℃，避光，有效期6个月

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BTN130997 Sephadex G50介质 10mL
BTN90605B TdT加尾法DNA生物素标记试剂盒 5次
BTN100920 生物素标记dUTP溶液(Biotin-11-dUTP) 50μL
BTN90603B 随机引物法DNA探针生物素标记试剂盒 5次
BTN120653B 填入法DNA末端标记试剂盒(生物素标记dUTP) 5次
BTN120653C 填入法DNA末端标记试剂盒(地高xīn标记dUTP) 5次
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BTN130907 脱脂奶粉 50g

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名称：Sephadex G50介质
货号：BTN130997
规格：10mL

名称：地高xīn标记dUTP溶液(Digoxin-11-dUTP)
货号：BTN100921
规格：25μL
本产品是浓度为0.35mM的DIG-11-dUTP。用于PCR、缺口平移、cDNA合成、随机引物标记和引物延伸等标记DNA。

储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期一年。

名称：生物素标记dUTP溶液(Biotin-11-dUTP)
货号：BTN100920
规格：50μL
本产品是浓度为1mM的Biotin-11-dUTP。分子式：C28H41N6O17P3SNa3，分子量：927.6。分子结构式图如下：

Biotin-11-dUTP常用于PCR、缺口平移、cDNA合成、随机引物标记和引物延伸等方法标记DNA。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期两年。

名称：超快DNA-RNA两用转膜试剂盒
货号：BTN121110
规格：5次
本试剂盒是基于毛细管转膜法的Southern和Northern印迹膜制备试剂，专门用于从电泳得到的凝胶中制备用于Southern杂交和Northern杂交的印迹膜。其操作流程如下：


产品特点：
1.即开即用，提供制备5张13×20cm大小的Southern杂交和Northern杂交印迹膜所需要的印迹膜和溶液，不需要用户单独准备。
2.快速：转膜过程只需要1小时，整个过程只需要2.5小时(对DNA)或1.5小时(对RNA)。
3.跟硝酸纤维素膜、带电尼龙膜、中性尼龙膜和PVDF膜兼容。包括Nytron、Gene Screen Plus、Zetabind、Biotrans、Hybond-N、Immobilon等。
4.A型提供硝酸纤维素膜，适用于400bp以上的靶分子，背景低。B型提供带电尼龙膜，适用于40bp以上的靶分子，结合力强。如需中性尼龙膜或PVDF膜，需另购。
5.使用优化的下向转膜法，不但效率比上行转膜法高30%左右，而且条带弥散度低、分辨率高。
可用琼脂糖胶(包括脉冲电泳胶，DNA电泳、RNA甲醛胶电泳和RNA戊二醛电泳)和DNA PAGE胶。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	660g
溶液B	100ml
溶液C	250ml
硝酸纤维素膜13×20cm	5张(仅A型提供)
带电尼龙膜13×20cm	5张(仅B型提供)
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

使用方法：

一：Southern印迹膜的制备
1.按常规方法进行电泳(包括脉冲电泳)，本试剂盒不提供电泳所需试剂。如果进行常规的Southern杂交，建议使用0.7%琼脂糖进行电泳，分离酶切的基因组DNA。电泳时zuì好加电泳分子量对照、酶切对照(先将标记的全长lambda DNA或探针质粒与样品DNA的混合，再酶切)、阴性样品(不含检测片段的DNA样品)、杂交分子量对照(标记的1.lambda/Hind III)等。电泳后和荧光标尺并排拍照。
2.变性：次使用时需配制变性液2.5L(在3L的干净玻璃烧杯中加入约2L自备的去离子水，搅拌缓慢中加入220g成分A和100mL溶液B，溶解后定容到2.5L后即可用)，将凝胶转移到一个至少10倍于胶体积的变性液中，脱色摇床上室温下摇晃处理60分钟(如果使用带正电尼龙膜，此步处理可以缩短到30分钟)。未用完的变性液可放瓶中室温保存。
3.转膜：如果使用带正点的尼龙膜，则直接用上步配制的变性液转膜，如果使用中性尼龙膜和硝酸纤维素膜，则需配置转膜液(在3L的干净玻璃烧杯中加入约2L自备的去离子水，缓慢搅拌中加入440 g成分A和2mL溶液B，溶解后定容到2.5L后即可用)。将凝胶转移到至少10倍于凝胶体积的转膜液中，脱色摇床上室温下摇晃处理15分钟。
4.测量凝胶的大小，然后借助尺子准确切出一张印迹膜，每边比凝胶大1mm，并切去一角，将印迹膜漂浮于去离子水上20分钟确保全部湿润，再按下图设置下行转膜体系(比上行转膜体系效率高30%)。图中membrane即印迹膜，transfer buffer即转膜液，吸水滤纸厚度为2-3cm，一般按每cm2印迹膜需要1mL转膜液的比例准备转膜液。对大的凝胶，可以同时使用两张滤纸分别跟两个容器的转膜液连接以便使转膜匀浆。

5.转膜1小时。结束后用铅笔标记核酸结合面以免搞错。注意：不要过夜转膜，否则信号将降低50%。
6.将印迹膜在中和液中处理10分钟，中和液的用量至少为0.5mL/cm2印迹膜。
7.可将凝胶放入EB(0.5μg/mL)溶液中染色30分钟后UV下观察残留核酸的量，反推转膜效率。此步也可跳过。
8.将印迹膜夹在两层滤纸中间80℃干燥15分钟以固定核酸(不需真空)，干燥时间不需延长，否则杂交信号可能会降低。
9.此时印迹膜可直接用于后续的核酸杂交实验或者在干燥状态下保存待用(可放数月)。

二：Northern印迹膜的制备
10.按常规方法进行电泳，本试剂盒不提供电泳所需试剂。本方法适用于甲醛变性胶和乙二醛变性胶，电泳后和荧光标尺并排拍照。
凝胶不需要变性和中和处理(也不能变性，否则RNA将会降解)，直接进入转膜步骤(同Southern印迹膜制备的第3到第9步)。

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