BTN80101 一管式病毒DNA-RNA提取试剂

一管式病毒DNA-RNA提取试剂是高品质的DNA提取纯化产品，由北京百奥莱博供应，本产品用于科学研究，本产品质量好，且具价格，深为用户称道，了解更多一管式病毒DNA-RNA提取试剂等DNA提取纯化产品请联系我司咨询订购。...

特别提示：包括一管式病毒DNA-RNA提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：一管式病毒DNA-RNA提取试剂盒
英文名称：One-tube virus RNA-DNA extraction kit
产品货号：BTN80101
产品规格：50次

本试剂盒是整合一管式病毒DNA提取试剂盒和一管式病毒RNA提取试剂盒两产品而得，专门用于从血清(血浆)等液体样品中同时提取病毒DNA(如HBV DNA)和病毒RNA(如HCV RNA和HIV RNA)的产品。本产品灵敏度高，稳定性好，使用简单快捷，尤其适合于整合到临床PCR或RT-PCR 检测试剂盒中。

试剂盒特点：
1. 回收率高，可以达到90%以上，高于大部分基于离心柱的提取方法。可以跟QIAGEN的同类产品媲美。
2. 灵敏度高，通过PCR 检测到病毒DNA的zuì终灵敏度可以达到30 拷贝/mL样品，通过RT-PCR 检测到病毒RNA的zuì终灵敏度可以达到50 拷贝/mL样品。
3.一管式操作，减少了样品污染的可能。
4.一站式套装，除样品外客户不需要准备任何试剂，降低了实验误差。
5. 安全，不需要使用苯酚和氯fǎng等有机溶液。
6.处理量大，如果加上病毒离心富集步骤，zuì多可以处理1.5mL液体病毒样品。
7.与PCR、荧光PCR、RT-PCR、荧光RT-PCR等后续反应兼容。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	30ml
溶液B	40ml
溶液C	50ml
溶液D	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，溶液A4℃保存，溶液B和溶液C室温保存，有效期一年。溶液B和溶液C具有挥发性，使用后需要将瓶盖拧紧。

使用方法：
1. 将0.1-0.2mL液体样品转移到1.5mL 旋盖离心管中。如果需要富集样品中的病毒，可以先将1.5mL液体样品转移到1.5mL 旋盖离心管中,然后4℃ 24,000 g离心60分钟，移弃1.3mL上清液后继续操作下一步的操作。
2. 加入0.6mL溶液A，盖上盖子后振荡3-5秒。
 注意:溶液A用前需37℃-65℃水浴融化并充分摇匀后方可使用。
3.室温静置10分钟。
4. 加入0.6mL溶液B，盖上盖子后振荡3-5秒。
5. 15000g室温离心15分钟。强烈建议在离心管管壁上用记号笔做简单标记以区别离心面和向心面。
6.小心移弃上清。注意不要触及管底的DNA和RNA沉淀。
7. 加入1.0mL溶液C，振荡数秒后15000g室温离心5分钟。注意：将离心管放入离心机时一定要离心面向外。
8. 移弃上清，注意不要触及管底的DNA和RNA沉淀。
9. 短暂离心数秒，注意：将离心管放入离心机时一定要离心面向外。
10.小心移弃残留上清(残留的溶液C会影响后续反应)。此时离心面的管壁上将有可见的膜状沉淀。
11. 加入100-200μl溶液D，用移液枪仔细吹打离心管管底和管壁的膜状沉淀，使其溶解。溶解液混浊或有少量不溶物是正常现象。不要离心只取上清使用，因为不溶沉淀物中含有DNA和RNA，必须取混合液使用(哪怕很浑浊)。
12. 直接取适量样品用于PCR或RT-PCR，也可短期保存于-20℃或-80℃。

使用效果：
DNA病毒：

图注：用本产品和市场上某同类产品分别提取0.2mL HBV 阳性血浆(含1000拷贝/mL HBV)，DNA 溶于200μl溶液D中，取5μl进行荧光PCR(使用MJ Research的CHROMO4荧光PCR 仪)。红和绿线表示本产品，蓝线表示市场上某同类产品。
RNA病毒：

图注：用本产品和市场上某同类产品分别提取0.2mL HBV 阳性血浆(含1000拷贝/mL HBV)，DNA 溶于200μl溶液D中，取5μl进行荧光PCR(使用MJ Research的CHROMO4荧光PCR 仪)。红和绿线表示本产品，蓝线表示市场上某同类产品。
图注：用本产品和市场上进口Q公司同类产品分别提取0.2mL培养的B型流感病毒上清液(含1000 拷贝/mL 病毒)，RNA 溶于200μl溶液D中，取10μl进行荧光PCR(50μl 体系，使用MJ Research的CHROMO4荧光PCR 仪)。红线表示本产品，蓝线表示进口的Q公司同类产品。

疑难解答：
Q：样品中如果同时有RNA和DNA，DNA 会对RNA的RT-PCR 克隆产生干扰吗？
A：不会。病毒一般或者只含RNA，或者只含DNA，如果样品中正好同时含有DNA 病毒和RNA 病毒，但由于两者之间没有同源性，所以DNA 也不会干扰RNA的RT-PCR扩增。这跟组织细胞中提出的核酸样品不一样，因为后者的DNA和RNA是同源的，即任何RNA分子都有与之同源的DNA分子，所以如果同时存在，DNA 也会在RT-PCR时跟引物结合，产生扩增。干扰RT-PCR。

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名称：柱式水样DNA提取试剂盒
货号：BTN101112
规格：50次

名称：柱式病毒DNA提取试剂盒
货号：BTN70701
规格：50次
本试剂盒是在一管式病毒DNA提取试剂盒的基础上开发的、专门用于从血清(血浆)等液体样品及拭子(咽拭子、鼻拭子、口腔拭子、阴道拭子等)中提取微量病毒DNA的产品。

试剂盒特点：
1. 操作简单，整个过程只需要20分钟左右，不需要额外在洗柱液中补加乙醇。
2. 灵敏度高，通过PCR 检测到的zuì终灵敏度可以达到30-50拷贝/mL。
3. 安全，不需要使用苯酚和氯fǎng等有机溶液。
4. 如果加上病毒离心富集步骤，zuì多可以处理1.5mL液体病毒样品。
5.与PCR和荧光PCR 兼容。
6. 价廉物美，远高于国外同类产品。
7.适用于各种材料，包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无细胞材料。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	30ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液3.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

使用方法：
1. 对于液体病毒样品：在1.5mL离心管中加入0.1-0.2mL液体病毒样品。如果病毒需要富集，可以将1.5mL液体在4℃ 24,000 g 冷冻离心60分钟，移弃1.3mL后剩下的0.2mL 用于第2 步处理。对于拭子样品：将一个拭子放入离心管中，加入1mL自备的生理盐水，振荡器上充分振荡半分钟，然后转移0.2mL 到1.5mL塑料离心管中，用于第2 步处理。
2. 加入0.6mL溶液A到步得到的0.2mL样品中，振荡30秒混匀后室温放置10分钟。注意：溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 短暂离心后将500μl溶液转移到离心吸附柱中，室温放置2分钟。
4. 12000rpm室温离心1分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。
5. 将剩余溶液短暂离心后全部转移到步骤3的离心吸附柱中，室温放置2分钟。
6. 12000rpm室温离心1分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。
7. 加入0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，12000 rmp室温离心1分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。
8. 12000rpm室温离心1分钟(干甩)，弃含穿透液的离心管。
9. 将干甩后的离心吸附柱套入到一个自备的RNase-free的1.5mL离心管中，在离心吸附柱的滤膜的中部加入30-100μl DNA 洗脱液3.0，然后室温放置2分钟。
10. 12000rpm室温离心1分钟，离心管中的溶液即为病毒DNA溶液。
11. DNA样品可以直接用于PCR，也可放-20℃长期保存。

疑难解答：
Q：提取液体样品/病毒核酸(RNA或DNA)为何很难？
A：原因一是量少。病毒颗粒中的RNA或DNA是作为遗传物质保存，每个病毒zuì多只携带几个拷贝(而一个细胞中有上万种RNA分子，每种RNA 有很多拷贝)，同时其长度也十分有限(一般不到细胞基因组的万分之一)，样品中病毒数往往又不是很多，使得样品中病毒核酸的量往往比一个细胞中核酸的量还少，所以操作中十分容易丢失。另外，由于得到的核酸量很少，不能使用电泳和测OD检测，只能通过PCR或RT-PCR 检测，而PCR或RT-PCR的条件又需要优化，所以要确定提取是否成功十分不容易。

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