KFS148 死细胞核酸染料-绿菁SYTOX

死细胞核酸染料-绿菁SYTOX由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科学研究，本产品质量好，且具价格，深为用户称道，了解更多死细胞核酸染料-绿菁SYTOX等细胞组织染色产品请联系我司咨询订购。...

特别提示：包括死细胞核酸染料-绿菁SYTOX在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：死细胞核酸染料-绿菁SYTOX
产品货号：KFS148
产品规格：500μL

SYTOX 绿色死细胞核酸染料( Ex/Em: 502/525 nm, bound to DNA)是一种可轻易穿过受损细胞质膜而不能透过活细胞质膜的绿色核酸染料，其在于核酸结合之后荧光强度会得到超过500 倍的显著增强。SYTOX 绿色死细胞核酸染料可以用于染死的真核细胞的RNA和DNA，在革兰氏细菌中同样也适用。使用者可以利用氩激光激发器的488nm（或者其他任何带有450-490nm 激发光源的激发器）激发染料。

SYTOX 绿色死细胞核酸染料可用于多色荧光分析，在不同的实验应用中染固定细胞的核酸，如，荧光显微镜、荧光酶标仪，流式细胞仪上。

储存：-20℃，避光，有效期6个月。

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规格：100ml×3
储存条件及有效期：室温密封保存，有效期36 个月，开瓶后有效期为12 个月。试剂一应用液和试剂二应用液配好后若本次实验未用完，需-20℃冰箱冷冻避光保存。下次实验临用前，需平衡到室温再使用。
试剂二应用液如在配制完成后留有红色，可以加入少量活性炭粉，过滤后使用。

名称：细胞质绿色荧光染料
货号：KFS183
规格：100μL
乙酰氧甲基（AM）的酯衍生物及其螯合剂组成的荧光探针是进行多数活细胞研究时用到的zuì广泛的化合物。修饰过的羧酸与AM 酯基团可以生成不带电荷的分子，具有细胞膜透性。但一进入细胞内，亲脂性的保护集团发生非特异性的水解，从而生成带电荷形式，滞留于胞内。通常情况下，AM 酯形式探针为无色无荧光状态，除非发生水解，这一属性对于储存来说，也是非常有用的自发水解的判断标准。

浓度：1 mg/mL in DMSO
储存：-20℃，避光，有效期6个月

名称：溴化乙锭EB染色试剂盒
货号：KFS258
规格：100T
溴化乙啶（Ethidium Bromide EB）是一种DNA 结合性荧光色素，其激发波长510nm。发射波长595nm。产生桔红色荧光。

EB 不具有膜通透性，不能透过活细胞膜，只能染死细胞，因此用EB 单染时，正常细胞不着色，早期凋亡细胞呈微弱桔红光，晚期凋亡细胞桔红色荧光增强。死细胞呈强桔红光。EB 常与吖啶橙合用双染进行凋亡检测，与吖啶橙双染时，正常细胞中EB 不能透膜着色，而吖啶橙可透过细胞膜，使细胞呈绿色均匀荧光，细胞圆形均匀；而在凋亡细胞中，细胞皱缩、染色质凝聚、固缩或断裂，出芽，凋亡小体形成。染上致密浓染的黄绿色荧光，或黄绿色颗粒；而坏死细胞被EB 染成桔红色，由此荧光颜色和细胞形态可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。

储存：2-8℃，避光，有效期12个月。

名称：Hoechst33258染色液
货号：HR8324
规格：100T
Hoechst3328染色液可用于细胞凋亡检测，也可用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色，染色后可用荧光显微镜检测或流式细胞仪检测。
Hoechst 33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。Hoechst 33258能少许进入正常细胞膜，使其染上低蓝色，而凋亡细胞的膜通透性增强，因此进入凋亡细胞中的Hoechst 33258 比正常细胞的多，荧光强度要比正常细胞中要高，此外，凋亡细胞的染色体DNA的结构发生了改变从而使该染料能更有效地与DNA 结合，并且凋亡细胞膜上的p-糖蛋白泵功能受到损伤不能有效地将Hoechst 33258排出到细胞外使之在细胞内积累增加等都使凋亡细胞的蓝色荧光增强。Hoechst 33258的zuì大激发波长为346nm，zuì大发射波长为460nm；Hoechst 33258和双链DNA结合后，zuì大激发波长为352nm，zuì大发射波长为461nm。
本Hoechst 33258染色液可直接用于活细胞或组织的细胞核染色，也可用于固定细胞或组织的细胞核染色。

储存条件：染液2-8℃避光保存。长期保存-20℃避光保存。
有效期：一年。

注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● zuì好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● PBS ● 纯水 ● 移液器及吸头 ● 流式细胞仪或荧光显微镜

使用方法：

使用注意事项：
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
● 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
● 由于细胞凋亡是一个快速和动态的过程，因此zuì好在染色后立即进行分析。
●染色浓度和时间根据不同样本的实际染色结果做相应调整。
本染色试剂盒可用于细胞、细胞涂片、石蜡切片、冰冻切片的检测。石蜡切片用常规方法脱蜡、分化、冰冻切片用冰丙酮固定后检测。以下以培养细胞的涂片的荧光显微镜检测为例，细胞染色也可不用多聚甲醛固定，其他方法请参阅相关资料。

1．染色工作液的配制：
根据样品数用PBS 将Hoechst33258染色液20倍-50倍稀释，配制成染色工作液。
2．细胞涂片的制备：
贴壁细胞，可将盖玻片放于培养器皿中，让培养细胞长于玻片上，然后用药物诱导细胞凋亡后取出，用4%多聚甲醛固定5min。也可其他方式培养后收集细胞制作涂片检测。
对于悬浮细胞，用药物诱导细胞凋亡后，1000-2000rpm离心5分钟收集细胞，用PBS洗2次，收集调整细胞数为1×105/ml，涂片或用离心涂片，用4%多聚甲醛固定5min；
3．用PBS 洗涤涂片两次。
4．加适量染色工作液于涂片上，室温避光染色5-20分钟。
5．用PBS 洗涤涂片。
6．用荧光显微镜检测结果。染料-DNA 复合物的zuì大激发波长为352nm，zuì大发射波长为461nm。

结果分析：
Hoechst 33258染色后，置于荧光显微镜下，选用340-350nm的激发光观察：正常细胞的细胞核呈弥散均匀蓝色荧光，凋亡细胞核或细胞质内可见浓染致密的颗粒块状蓝色荧光，颜色有些发白。如果见到3个或3个以上的DNA荧光碎片被认为是凋亡细胞。

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