WH0025 植物基因DNA组提取试剂盒(

产品简介
植物基因DNA组提取试剂盒(是高品质的DNA提取纯化产品,由北京百奥莱博供应,本产品仅用于生物化学研究方面,我公司专注于DNA提取纯化产品的研发、生产和供应,为您提供的植物基因DNA组提取试剂盒(质量可靠,批间差小,且价格公道,热切盼望您选购我们的产品。...
产品详细介绍
特别提示:包括植物基因DNA组提取试剂盒(离心吸附柱法)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:植物基因DNA组提取试剂盒(离心吸附柱法)
英文名称:Plant genomic DNA rapid extraction kit
产品货号:WH0025
产品规格:50次|200次
本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,提取多种植物组织中的基因组DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有材料,、专一吸附DNA,可zuì大限度去除杂质蛋白。提取的基因组DNA片段大,可达40 kb,纯度高,质量稳定可靠。
产品特点:
·简单快速:1h内即可获得超纯的基因组DNA。
·害:无需使用酚/lǜ仿抽提,操作安全。
·纯度高、质量好:100mg植物组织中可提取到3-30μg基因组DNA,OD260/OD280的值在1.7-1.9范围内。
下游应用:
· PCR、qPCR与多重PCR。
· RAPD、RFLP、AFLP、SSR等分子标记。
·文库构建、Southern杂交。
不同植物组织DNA提取得率:(样本量:100mg,OD260/OD280:1.7~1.9)
| 植物材料 | 平均DNA产量 |
| 拟南芥 | 3~4μg |
| 小麦 | 25~30μg |
| 松树 | 25~30μg |
| 马铃薯 | 4~6μg |
| 番茄 | 10~15μg |
| 油菜 | 2~4μg |
| 烟草 | 20~25μg |
| 水稻 | 10~25μg |
| 大豆 | 20~30μg |
| 玉米 | 20~30μg |
不同来源的植物材料中基因组会有差异,以上所有材料均为新鲜幼嫩叶片。
提取实例:

本试剂盒提取的各种植物基因组DNA电泳结果。
起始量:100mg叶片,100μl洗脱,3μl上样,琼脂糖凝胶浓度为1%,6V/cm,电泳20min,marker为λDNA/Hind III
1:大豆新鲜幼嫩叶片;
2:烟草新鲜幼嫩叶片;
3:小麦新鲜幼嫩叶片;
4:玉米新鲜幼嫩叶片;
试剂盒组成:
| 组分 | 50T | 200T |
| 缓冲液LP1 | 25ml | 100ml |
| 缓冲液LP2 | 10ml | 40ml |
| 缓冲液LP3 | 21ml | 84ml |
| 漂洗液PW | 15ml | 50ml |
| 洗脱缓冲液TE | 15ml | 60ml |
| RNase A(10mg/ml) | 300μl | 1.25ml |
| 吸附柱CB3 | 50个 | 200个 |
| 收集管(2ml) | 50个 | 200个 |
保存条件:室温(15-25℃)干燥条件下,可保存12个月,更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下,若溶液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间,必要时可在37℃水浴中预热10min,以溶解沉淀。
注意事项:(请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)
1.样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
2.缓冲液LP1可能发黄,并不影响提取效果。
3.若缓冲液LP1或LP2有沉淀析出,可在37℃水浴溶解,摇匀后使用。
4.所有离心步骤均为使用台式离心机,室温下离心。
使用方法:
使用前请先在缓冲液LP3和漂洗液PW中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。
1.处理材料:
取植物新鲜组织100mg或干重组织20 mg,加入液氮充分碾磨。加入400μl缓冲液LP1和6 μl RNase A(10 mg/ml),旋涡振荡1 min,室温放置10min。
2.加入130 μl缓冲液LP2,充分混匀,旋涡振荡1 min。
3.12000rpm(~13400×g )离心5 min,将上清移至新的离心管中。
4.加入1.5倍体积的缓冲液LP3(例如500 μl的上清液加750 μl缓冲液LP3)(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),立即充分振荡混匀15 sec,此时可能会出现絮状沉淀。
5.将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB3中(吸附柱放入收集管中),12000rpm(~13400×g )离心30 sec,倒掉废液,吸附柱CB3放入收集管中。
6.向吸附柱CB3中加入600 μl漂洗液PW (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm(~13400×g )离心30 sec,倒掉废液,将吸附柱CB3放入收集管中。
注意:如果吸附柱膜呈现绿色,向吸附柱CB3中加入500 μl无水乙醇,12000rpm(~13400×g )离心30 sec,倒掉废液,将吸附柱CB3放入收集管中。
7.重复操作步骤6.
8.将吸附柱CB3放回收集管中,12000rpm(~13400×g)离心2 min,倒掉废液。将吸附柱CB3置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。
9.将吸附柱CB3转入一个干净的离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200 μl洗脱缓冲液TE,室温放置2-5 min,12000rpm(~13400×g )离心2 min,将溶液收集到离心管中。
注意:为增加基因组DNA的得率,可将离心得到的溶液再加入吸附柱CB3中,室温放置2 min,12000rpm (~13400×g )离心2 min。洗脱缓冲液体积不应少于50 μl,体积过小影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用ddH2O做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率;且DNA产物应保存在-20℃,以防DNA降解。
DNA浓度及纯度检测:
1.得到的基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。
2.DNA应在OD260处有显著吸收峰,OD260值为1相当于大约50 μg/ml双链DNA、40 μg/ml单链DNA。
3.OD260/OD280比值应为1.7-1.9,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用ddH2O,比值会偏低,因为pH值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低。
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名称:非冻型尿液DNA保存液
货号:BTN90315
规格:100mL
本品在室温条件下长期保存用于DNA提取的尿液样品保存液。它能够、长期保证DNA分子的完整性。
产品特点:
1. 保存时间长,可室温保存尿液DNA长达六个月,尤其适合于野外尿液样品采集。
2. DNA完整性好,纯化后长度在20-50 Kb之间。
3. DNA无化学修饰,提得的DNA可用于酶切、电泳、Southern杂交和PCR等分子生物学实验。
4. 能防止尿液在4℃结晶。
5. 安全可靠,本产品无害。
6. 使用简单,直接把新鲜的尿液样品与本产品混合即可。
储存条件:室温运输及保存,有效期两年。
使用方法:(以DNA提取为例)
1. 迅速将尿液与本产品按10:1的比例混合。
2. 常温闭光保存直到使用。
3. 使用常规液体DNA提取方法提取DNA即可。推荐使用柱式尿液DNA提取试剂盒(BTN90314),使用柱式尿液DNA提取试剂盒提取本产品保存的尿样,兼容性好,提取效率更高。
4. 提取得到DNA可用于酶切、电泳、Southern杂交和PCR等分子生物学实验。
名称:柱式骨骼DNA提取试剂盒
货号:BTN91102
规格:50次
本试剂盒专门用于从动物骨骼(包括骨粉)样品中提取DNA的产品,20次规格足够50次微量提取。
产品特点:
1. 微量提取,一次可以处理300mg左右的骨骼(但需要先将骨粉变成骨粉)。
2. 柱式操作,方法简单,整个过程只需要40-60分钟。
3. 得到的DNA分子量不均匀,一般在20 Kb到100bp之间,具体取决于骨骼的新鲜程度,骨粉的加工方法等。
4. 得到的DNA可以直接用于PCR或荧光PCR反应。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50mL |
| 溶液B | 15mL |
| 溶液C | 30mL |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50mL |
| DNA洗脱液2.0 | 10mL |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 骨粉的制备:用自备酒精将骨骼表面擦洗干净,以防污染物对后续PCR的影响,然后用骨钻在处理干净的骨骼区域钻取骨粉。对于已经制备好的、商品化的骨粉,可以跳过此步,直接进入下一步。
2. 用天平称取0.2克骨粉,转移到2mL塑料离心管中。
3. 加入1mL溶液A到骨粉中,充分振荡30秒混匀。(注意:溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用,且骨粉加到溶液A中后会特别黏稠,需使劲振荡混匀。)
4. 65℃水浴放置30分钟。
5. 加入0.3mL的溶液B和0.2mL的自备lǜ仿,充分振荡30秒混匀。
6. 12000rpm室温离心3分钟,小心将上清液转移到一个新的塑料离心管中。
7. 加入0.5mL溶液C,颠倒混匀。
8. 将混合液分两次转移到离心吸附柱中,每次转移后需要 12000rpm室温离心1分钟,并弃收集管中的穿透液。
9. 加入0.5mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000rpm室温离心1分钟,弃收集管中穿透液。
10. 再加入0.5mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000rpm室温离心1分钟,弃收集管中穿透液。
11. 12000rpm室温离心半分钟,弃含穿透液的收集管。此步干甩十分重要,否则残留的液体会抑制后续的PCR。
12. 将离心吸附柱套入到一个自备的干净的1.5mL塑料离心管中,在离心吸附柱的滤膜的中部加入30μL DNA洗脱液,然后室温放置2分钟。如果先将DNA洗脱液预热到60-80℃再使用,效果更佳。
13. 12000~15000g室温离心1分钟,离心管中收集的样品即为骨骼DNA。
14. 取少量进行电泳检测。注意:一般DNA都呈现弥散状,分布在20 Kb到100bp这一广泛的范围,其比例跟骨骼(或骨粉)的新鲜程度、加工过程(对骨粉)等因素密切相关。
15. DNA样品可以直接用于PCR,也可放-20℃长期保存。
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