BTN80807A 动物细胞裂解液A(非变性)

动物细胞裂解液A(非变性)的品牌是百奥莱博，是优质的蛋白质研究产品，本制品用于生化实验研究等领域，本品质量稳定，价位合理，需要动物细胞裂解液A(非变性)等蛋白质研究产品的客户，请到我公司官网联系我们。...

特别提示：包括动物细胞裂解液A(非变性)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：动物细胞裂解液A(非变性)
英文名称：Animal Cell Lysis Solution(A)
产品货号：BTN80807A
产品规格：100mL

本产品含有多种细胞裂解成分和蛋白酶抑制成分，可以在非变性或变性条件下迅速裂解组织或培养细胞，使之释放出细胞内蛋白，用于后续实验。

产品特点：
1.快速裂解，多种裂解成分经过精心优化，能快速使细胞裂解。
2. 非变性(BTN80807A)产品能zuì大程度地保留蛋白天然结构和功能，主要用于免疫沉淀和免疫共沉淀，还可以用于蛋白活性检测(信号传递研究和酶动力学检测)和Western Blot等各种后续实验。
3.变性(BTN80807B)裂解细胞的效率更高，主要用于对抗原空间构型不敏感的免疫共沉淀实验，还可以用于Western Blotting。
4.适用于培养细胞(包括悬浮细胞)和新鲜组织。

储存条件：常温运输、4℃保存，有效期一年。

注意事项：
1. 如果在本产品中额外再加入终浓度为1×的、新鲜配制的蛋白酶抑制剂复合物，可以更有效地抑制蛋白酶活性，防止蛋白降解。
2. 如果用于信号传递研究，zuì好在本产品中加入终浓度为1×的、新鲜配制的磷酸酶抑制剂复合物。
3. 整个裂解步骤都要在冰浴或4℃操作。本产品和PBS 均需预先冷却。
4. 本产品所含有较高浓度的去垢剂会对Bradford蛋白浓度测定有较大影响，因此只能使用BCA法测定蛋白浓度。

使用方法：

一：处理贴壁的培养细胞
1. 去除贴壁细胞培养液，用冰浴预冷的PBS 洗两遍，去尽残留的PBS。
2. 将培养板放置在冰上待用。
3. 按每106个细胞加入0.1mL 本产品(或100mm 贴壁细胞加1mL 本产品)的比例向培养板中加入适量的本产品(按此比例裂解得到的裂解物的蛋白浓度约在5-10mg/mL 之间)。
 注意：裂解效率跟细胞数量和本产品用量的比例密切相关。一般情况下6孔板的单孔(1～2×106细胞)需要0.1～0.2mL本产品；25 cm2培养瓶(3～6×106细胞)需要0.3~0.6mL；75 cm2培养瓶(1～2×107细胞)需要1～2mL。对于特别大或特别小的细胞，需要用户摸索zuì佳用量。
4. 冰上放置10-30分钟(zuì佳时间跟细胞系相关)，其间偶尔轻轻摇晃或用枪头轻轻吹打。
5. 将细胞培养板倾斜使上清液汇集在一端，并将其全部转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。
6. 15000×g，4℃离心10分钟，将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中，放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意：如果用于免疫沉淀，zuì好新鲜使用。
7. 用前zuì好先测定上清液的蛋白浓度，然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。

二：处理悬浮细胞
1. 400×g，4℃离心10分钟收集悬浮细胞，弃上清。
2. 用等体积的预冷PBS 洗涤细胞沉淀两遍，步骤同步。
3. 按每106个细胞加入0.1mL 本产品的比例加入本产品，充分悬浮细胞。
4. 冰上放置15分钟裂解细胞，期间偶尔轻柔震荡。
5. 15000×g，4℃离心10分钟，将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。为避免吸取到细胞沉淀，zuì好留20-40μL液体不取。
6. 将上清液放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意：如果用于免疫沉淀，zuì好新鲜使用。
7. 使用前zuì好先测定上清液的蛋白浓度，然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。

三：处理组织块
1. 称量组织块，用毛玻片或玻璃匀浆器研磨或匀浆，用5-10倍体积的、预冷的PBS洗两次(包括冲洗器材)。
2. 将匀浆物转移到离心管中，1500g、4℃离心5分钟后弃上清。
3. 按每50mg 组织加入0.2mL 本产品的比例加入预冷的本产品，吹打混匀，放置冰上。
4. 每隔5分钟振荡器轻柔振荡一次，共4次。
5. 15000×g、4℃离心10分钟，将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中，放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意：如果用于免疫沉淀，zuì好新鲜使用。
6. 使用前zuì好先测定上清液的蛋白浓度，然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。

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储存条件：室温，有效期一年。

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Bradford蛋白质浓度测定试剂盒是根据考马斯亮蓝G-250法研制而成，其原理是考马斯亮蓝G-250在酸性条件下和蛋白质结合，使得染料zuì大吸收峰从465nm变为595nm，在一定的线性范围内，反应液595nm处吸光度的变化量与反应蛋白量成正比，测定595nm处吸光度的增加即可进行蛋白定量。每个试剂盒可以检测1000个样品(使用微孔板)

试剂盒组成：

组份	包装	贮存方式
考马斯亮蓝G-250染色液	200 ml	4℃
牛血清白蛋白(BSA)标准溶液(5 mg/ml)	2×1 ml	-20℃
PBS溶液	10 ml	4℃
说明书	1份

产品特点：
1、检测速度快，10个样品只需不足10分钟即可完成。
2、灵敏度高，检测浓度下限可达25μg/ml (测定浓度范围在50-1000μg/ml内有较好的线性关系)，zuì小检测蛋白量可达0.5μg，待测样品体积为1-20μl。
3、Bradford法测定蛋白浓度不受大部分样品中的化学物质的影响。样品中β-巯基乙醇的浓度可高达1M，DTT的浓度可高达5mM。然而，此方法测定蛋白浓度受高浓度的去垢剂影响，故不能适用膜蛋白样品的浓度测定。需确保测定样品中SDS浓度低于0.01%，Triton X-100浓度低于0.05%，Tween 20, 60, 80浓度低于0.015%。测定含去垢剂的样品推荐使用BCA蛋白浓度测定试剂盒

储存条件：室温，有效期12个月。

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