MQ0047 OrigamiB化学感受态细胞

OrigamiB化学感受态细胞是高品质的克隆与表达产品，由北京百奥莱博供应，本产品仅用于生物化学研究方面，我公司专注于克隆与表达产品的研发、生产和供应，为您提供的OrigamiB化学感受态细胞质量可靠，批间差小，且价格公道，热切盼望您选购我们的产品。...

特别提示：包括OrigamiB(DE3)化学感受态细胞在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：OrigamiB(DE3)化学感受态细胞
英文名称：OrigamiB(DE3)Chemically Competent Cell
产品货号：MQ0047
产品规格：10×100μl/50×100μl

OrigamiB(DE3)感受态细胞包含突变的硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase)(trxB)和谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase)(gor)基因，表达主要还原途径的两个关键酶。有利于形成正确折叠的含有二硫键的蛋白，增强蛋白的可溶性。
该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区(DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶)，可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达，具有卡那霉素和四环素抗性，不能用于具有卡那霉素抗性质粒的表达。
OrigamiB(DE3)感受态细胞由特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率达108cfu/μg。
保存条件：-80℃
基因型：
F-ompT hsdSB(rB-mB-)gal dcm lacY1 ahpC(DE3)gor522::Tn10 trxB(KanR,TetR)
操作说明：
1.取100μl冰上融化的OrigamiB(DE3)感受态细胞，加入目的质粒并轻轻混匀，冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB)，混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项：
1.感受态细胞zuì好在冰上融化。
2.混入质粒时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒可相应减少zuì终用于涂板的菌量。
4.诱导时，IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。
5.为获得需要量的蛋白，zuì佳诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化。
6.具有卡那霉素抗性，不能用于具有卡那霉素抗性质粒的表达。

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