SV1373 RNA 5′ 焦磷酸水解酶（Rp

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特别提示：包括RNA 5′ 焦磷酸水解酶（RppH）在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：RNA 5′ 焦磷酸水解酶（RppH）
产品货号：SV1373
产品规格：200U

特性:
将 5´ 三磷酸 RNA 转化为单磷酸 RNA
制备用于连接的 5´ 磷酸 RNA
分析 RNA 5´ 末端修饰
概述:
细菌 RNA 5´ 焦磷酸水解酶（RppH）能从 5´ 末端三磷酸化的 RNA 中去除焦磷酸盐产生 5´ 单磷酸 RNA。RppH 蛋白又叫 NudH/YgdP，可以将二腺苷五磷酸（diadenosine penta-phosphate）分解成 ADP 和 ATP。
来源:
纯化自携带有 RppH 基因的 E. coli 菌株。
反应条件:
1X BalbBuffer 2
[10 mM Tris-HCl，50 mM NaCl，1 mM DTT，10 mM MgCl2，( pH 7.9 @ 25℃ ) ]，37℃ 温育。
随酶提供的试剂:
10X BalbBuffer 2。
单位定义:
1 单位指 37℃ 条件下，30 分钟内将 1 μg 300-mer RNA 转录产物转化成 XRN-1 可消化的 RNA 所需要的酶量。
浓度:
5,000 units/ml。

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名称：Sulfolobus DNA聚合酶IV
货号：BTN131182
规格：100U
Sulfolobus DNA聚合酶IV是一种热稳定的Y家族DNA聚合酶，能在复制过程中绕过DNA损伤，因而能以多种损伤DNA为模板合成DNA。

产品特点：
1．以损伤DNA为模板合成DNA。
2．DNA修复。

产品组成：

成份	规格
Sulfolobus DNA聚合酶IV(2000U/mL)	50μL
10×Buffer	1.5mL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

名称：Tth DNA聚合酶
货号：BTN90501
规格：250U
本酶来源于嗜热菌Thermus thermophilus HB8。在有Mg2+等二价阳离子存在的情况下，具有DNA多聚酶活性。它与Taq酶一样被广泛用于PCR反应，但耐热性比Taq酶高，因此对高GC含量模板的PCR 也有较好的效果。本酶基本上没有3′→5′外切酶活性及5′→3′外切酶活性，所以也可用于双脱氧法测序。另外，本酶具有RTase活性，在Mn2+存在的情况下，RTase活性会得到强化。利用该特性，可以用来在同一管中进行逆转录反应和PCR反应，即一步法RT PCR。(但是，在Mn2+存在时，RT-PCR的准确性不高)此外，本酶与Taq DNA多聚酶一样，PCR产物可通过T载体进行TA克隆。

产品特点：
1．RT-PCR反应的特异性增加：在较高的温度下进行逆转录，增加了引物杂交和延伸的特异性。
2．二级结构减少：在较高的温度下进行逆转录，减少了由于RNA二级结构引起的问题。

产品组成：

成分	规格
Tth DNA聚合酶(5U/μL)	50μl
10×Tth Buffer	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
以λDNA为模板，以10×Tth Buffer(+MgCl2)作为缓冲液进行体积为50μL的PCR扩增反应为例

1．按下列组份配制PCR反应液。

成分	终浓度	用量
Tth DNA聚合酶(5U/μL)	1.25U	0.25μl
10×Tth Buffer(+MgCl2)	1×	5μl
dNTP Mixture(各2.5mM)	各0.2mM	4μl
模板DNA	50pg～1μg	详见下表
引物1(10μM)	0.1～1μM	zuì多到1μL
引物2(10μM)	0.1～1μM	zuì多到1μL
灭菌蒸馏水		加到50μL

推荐50μL PCR反应体系中模板DNA推荐使用量：

哺乳动物基因组DNA	0.5～1μg
酵母基因组DNA	5～500ng
细菌基因组DNA	0.5～50ng
质粒DNA	5～500pg
PCR回收片段	1～100pg

2．PCR反应条件
以λDNA为模板，扩增1kbp的DNA片段的PCR反应条件如下：

注：PCR反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况，设定zuì佳的反应条件(温度、时间等)。

注意事项：
1．循环测序：该酶为耐热性酶，可通过与PCR 同样的温度条件进行测序反应。由于其高温稳定性好，对于复杂结构的模板效果较好。
2．引物：用于耐热性酶测序的引物需比用于非耐酶测序的引物设定更长的时间。采用较短的引物时，可能会出现不能获得条带变淡的情况。

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