GL1242 P:C(1:1,pH﹤5.0)

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特别提示：包括P:C(1:1,pH﹤5.0)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：P:C(1:1,pH﹤5.0)
产品货号：GL1242
产品规格：100ml

用途：
提取RNA，从核酸样品中去除蛋白质。

注意事项：
P特指Tris饱和酚/平衡酚，含有抗氧化剂和保护层。

储存条件：4℃，避光，6个月

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货号	名称	规格
BTN81220	昆虫RNA柱式提取试剂盒	50次
BTN101121	软骨RNA柱式提取试剂盒	50次
BTN51102	细菌RNA提取试剂盒	100次
BTN3073	一管式病毒RNA提取试剂盒	100次
BTN130977	生物素化的Oligo(dT)	5μg
BTN3100	RNA长效保存液	1.5mL
BTN60604	DEPC处理水	250mL

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名称：粪便RNA柱式提取试剂盒
货号：BTN101109
规格：50次
由于粪便中有机质含量丰富，对RT-PCR等后续反应有大的抑制作用，所以从粪便中提取高纯度的RNA一直是十分棘手的问题。本产品是在粪便RNA提取试剂盒基础上开发的柱式粪便RNA提取产品。

试剂盒特点：
1. 操作比非柱式法更加简单快速，处理一个样品只需要约十几分钟。
2. 去污染效果好，RNA 纯度更高，平均OD260/280一般都在2.0左右。
3. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA 合成等实验。
4. 高于进口的柱式粪便RNA提取产品。
5. 试剂无害，环保。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	50ml
酸洗玻璃珠，400μm	25g
溶液B	15ml
溶液C	50ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
RNA洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期两年。

使用方法：
1.在自备的3-5mL离心管中称取0.5-1 g 粪便，加入0.5g 玻璃珠和1mL溶液A，盖紧离心盖后震荡器上剧烈震荡5-10分钟。注意：如果放置在低温，溶液A可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
2. 稍微静置后将上清液(一般呈棕色)转移至一个干净的1.5mL塑料离心管中。所取上清液不要超过1mL，否则后续操作没有足够空间。
3.在离心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自备lǜ仿，在振荡器上振荡30秒混匀。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
4.室温12000rpm离心3～5分钟。
5. 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中，下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质，避免触及或吸取。zuì好留下100μl上清液不取。
6.在上清液中加入等体积的溶液C，用手上下颠倒或振荡器振荡30秒混匀，此时溶液呈均匀的乳浊状。
7.室温12000rpm离心3分钟，两相间将有白色膜状物(蛋白质)形成。
8. 将一半的溶液转移到离心吸附柱中，套入收集管中厚12000rpm室温离心半分钟，弃收集管中的穿透液。
9. 将剩下的一半溶液转移到同一离心吸附柱中，套入收集管中后12000rpm室温离心半分钟，弃收集管中的穿透液。
10. 加0.7mL 通用洗柱液，套入收集管中后室温离心半分钟，弃收集管中的穿透液。
11. 加0.3mL 通用洗柱液，套入收集管中后室温离心半分钟，弃收集管中的穿透液。此步可以省略。
12. 将离心吸附柱套入收集管中后室温离心半分钟，弃含穿透液的收集管。此步干甩十分重要，否则残留的乙醇会影响RNA的使用。
13. 将离心吸附柱套入到一个自备的RNase-free 收集管中，加入30-100μL RNA洗脱液，室温放置1-2分钟。
14. 12000rpm室温离心半分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
15. RNA 完整性的电泳检测：如果需要做Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。
16. RNA产量产率测定：将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
17. RNA 纯度测定：无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响RT-PCR等反应。

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