WE0179 口腔拭子基因组DNA提取试剂盒

产品简介
口腔拭子基因组DNA提取试剂盒的品牌是百奥莱博,是优质的DNA提取纯化产品,本制品仅用于生物化学研究方面,口腔拭子基因组DNA提取试剂盒是我司众多优质DNA提取纯化之一,质量堪比同类进口产品,价格非常优惠,目前正热烈促销中,恭候您的咨询订购。...
产品详细介绍
特别提示:包括口腔拭子基因组DNA提取试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:口腔拭子基因组DNA提取试剂盒
英文名称:Swab Genomic DNA Extraction Kit
产品货号:WE0179
产品规格:50次|200次
本试剂盒提供一种简单快速分离纯化口腔拭子样本总DNA的方法。该试剂盒采用可特异性结合DNA的硅基质膜和独特的缓冲系统,专一吸附DNA,每个拭子可得到0.5-3.5μg基因组DNA,提取的DNA片段大、纯度高、质量稳定可靠。适用于酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 | 200次 |
| Buffer GR | 25ml | 120ml |
| Buffer GL | 25ml | 120ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 13ml | 52ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml | 75ml |
| Buffer GE | 15ml | 60ml |
| 蛋白酶K | 25mg | 90mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 1.25ml | 5ml |
| 吸附柱DS及收集管 | 50套 | 200套 |
| 离心管(1.5ml) | 50个 | 200个 |
产品特点:
1、采用硅基质膜原理,简单、快速从口腔拭子中提取基因组DNA。
2、提取的基因组DNA片段大、纯度高。
3、单个拭子样本得率达到0.5-3.5μg。
自备试剂:无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项:
1、向蛋白酶K 中加入用量(1.25ml/5ml)的蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
2、次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
3、使用前若发现Buffer GL有沉淀,请将Buffer GL于56℃水浴溶解。
4、全部离心步骤可在室温下进行。
5、取样:使用口腔拭子在口腔内壁擦拭6次,晾干2小时保存,为确保样本不被食物或饮料污染,取样前30分钟内请勿进食和饮水。
操作步骤:
1.将口腔拭子的棉签用剪刀从杆上剪下,置于2ml的离心管(自备)中,加入400μl Buffer GR。
注意:如需无RNA污染的基因组DNA,可加入4μl浓度为100 mg/ml 的RNase A溶液(货号:WE0225S),震荡混匀。
2.加入20μl 蛋白酶K 和 400μl Buffer GL,立即涡旋震荡15秒,充分混匀。
注意:加入Buffer GL后立即充分混匀;不可将蛋白酶K 直接加入Buffer GL中使用。
3.56℃放置10分钟,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
4.加入400μl无水乙醇,涡旋震荡充分混匀,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
注意:加入无水乙醇后可能会产生白色沉淀,不会影响后续实验。
5.将上步所得溶液和沉淀分两次加入到已装入收集管的吸附柱中,一次zuì多不超过700μl 。12000rpm(~~13400×g)离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
6.向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7.向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心3分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:如需进一步提高DNA纯度,可重复步骤7。
8.12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
9.将吸附柱置于一个新的1.5ml离心管中,向吸附柱的中间部位悬空加入50μl Buffer GE或灭菌水,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)若需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件:室温(15~30℃)。
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