QN1049 X-gal(20mg/ml)

产品简介
X-gal(20mg/ml)由北京百奥莱博供货并提供相关技术服务支持,本品用于生化实验研究等领域,X-gal(20mg/ml)是我司众多优质克隆与表达之一,质量堪比同类进口产品,价格非常优惠,目前正热烈促销中,恭候您的咨询订购。...
产品详细介绍
特别提示:包括X-gal(20mg/ml)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:X-gal(20mg/ml)
产品货号:QN1049
产品规格:5ml
IPTG为安慰性诱导物,X-gal为生色底物,二者共同用于蓝白斑筛选。IPTG可诱导载体Lac操纵子DNA区段合成β-半乳糖苷酶氨基端片段,该片段可与宿主细胞编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内互补(α 互补)。实现α互补的细菌铺在含有X-gal生色底物的培养基上,可形成蓝色菌落。外源DNA插入质粒的多克隆位点后可破坏α互补作用,将产生白色菌落。此产品为X-gal用DMF溶解过滤后配成的无菌溶液。
储存条件:-20℃
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| 货号 | 名称 | 规格 |
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| YT449 | pression/YT449.html" target="_blank">ISRE荧光素酶报告基因质粒(干扰素激活反应元件) | 1μg |
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| JN0108 | pression/JN0108.html" target="_blank">pBalbTrx-Tev质粒 | 20次(1μg) |
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名称:单细胞裂解液(RNA提取)
货号:BTN130804
规格:1mL
本产品为单细胞RNA提取专用裂解液,本裂解液经多次优化,含有多种去污剂、变性剂和盐,可有效抑制核酸酶在裂解过程中对核酸的破坏,维持核酸结构的稳定含有常用。纯化所得RNA可用于测序、单细胞PCR等实验。本产品足够使用200次以上。
储存条件:低温运输,4℃保存,有效期两年。
名称:单细胞悬浮液
货号:BTN130805
规格:1mL
本产品是单细胞悬浮溶液,本产品与后续各种单细胞分析实验、单细胞扩增实验兼容。
储存条件:低温运输,4℃保存,有效期一年。
名称:大肠杆菌DH5α化学感受态细胞
货号:BTN81024
规格:0.1mL*10
本产品是采用大肠杆菌DH5α菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的热击转化。DH5α是一种常用于质粒克隆的菌株,其φ80lacZΔM15基因产物可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补,可用于蓝白斑筛选。recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。使用pUC19质粒检测,转化效率不低于107,适用于的质粒DNA克隆并能保证高拷贝质粒的稳定复制。
本菌种来源于Hoffman-Berling 1100菌种。
| 基因型 | 表现型 |
| deo R | 组成型合成脱氧核糖 |
| end A1 | 核酸内切酶I缺失 |
| gyr A96 | 具有萘啶酮酸抗性 |
| hsd R17 | 限制性酶EcoK缺失 |
| △(lac)U169 | lac基因缺失 |
| rec A1 | DNA重组活性降低 |
| Rel A1 | 允许在无蛋白质合成时有RNA合成 |
| sup E44 | 抑制琥珀突变突变,为某些噬菌体必需 |
| thi-1 | 不能自身合成硫氨 |
| φ80(lac ZΔM15) | 提供α-互补所需的ω片断 |
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl,可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击90秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入800μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,200rpm(小于225rpm)振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意事项:
1、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm ,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2、新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3、涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
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