WE0227 人类cDNA

人类cDNA由北京百奥莱博供货并提供相关技术服务支持，本品用于科研目的，本品质量稳定，价位合理，需要人类cDNA等分子生物学试剂产品的客户，请到我公司官网联系我们。...

特别提示：包括人类cDNA在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：人类cDNA
英文名称：Human Placenta cDNA
产品货号：WE0227
产品规格：100μl(20次反应)

  本产品是以人胎盘组织RNA为模板，Oligo(dT)以及Random为引物, 用百奥莱博的高灵敏度的逆转录酶反转录得到的PCR即用型cDNA，可用于PCR实验的阳性对照。纯度：OD260/280≈1.8

使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系：

试剂	50μl体系	终浓度
10×Taq PCR Buffer with Mg2+	5μl	1×
dNTP Mix，2.5 mM each	4μl	200μM each
Forward Primer，10μM	2μl	0.4μM
Reverse Primer，10μM	2μl	0.4μM
Human Placenta cDNA	5μl
Taq DNA Polymerase，2.5 U/μl	0.5μl
RNase-Free Water	补水至50μl

注意：
1)引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。
2)镁离子浓度请以终浓度1.5-3 mM作为设定范围的参考。本产品的10×PCR Buffer中已经含有15 mM镁离子，可根据丌同的引物对和模板来调节镁离子浓度，由此优化反应体系。

2、将混合好的液体进行PCR反应。
3、结果检测：反应结束后取5μl反应产物，加入适量上样缓冲液后进行琼脂糖凝胶电泳检测。

储存条件：-20℃，避免反复冻融

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名称：Klenow 片段（3"→5" exo-）
货号：SV0957
规格：1KU|1KU|200U|100U
特性:
用随机引物制备探针
随机引物法标记
cDNA 第二条链的合成
概述:
Klenow 片段（3´→5´ exo-）是 DNA 聚合酶 I 的 N 末端截短物，它保留了 DNA 聚合酶活性，但失去了 5´→3´ 核酸外切酶活性。该酶经突变（D35，E357A）去除了其 3´→5´ 的核酸外切酶活性（1）。
来源:
重组 E. coli 菌株，其携带的质粒上含有 E.coli polA (D35，E357A)基因的片段，片段起始位置在密码子 324 处。
浓度:
5,000 和 50,000 units/ml。
热失活:
75℃ 20 分钟。
使用注意事项:
Klenow 片段（3´→5´ exo-）因去除了 3´→5´ 核酸外切酶的活性，故不适用于生成平末端的反应。

名称：快速末端平齐化 试剂盒
货号：SV1006
规格：100次|20次
特性:
30 分钟内可完成限制性内切酶消化后 DNA 的末端平齐化
即用型预混液在室温即可进行反应
适用于限制性内切酶消化后的 DNA，已剪切或雾化的 DNA 或 PCR 产物
概述:
快速末端平齐化试剂盒将不匹配的 DNA 5´ 或 3´ 突出末端转变为带有 5´ 磷酸的平末端，以便有效地与平末端 DNA 克隆载体连接。用 T4 DNA 聚合酶（M0203）使 DNA 末端平齐化，该酶同时具有 3´ →5´ 外切酶活性和 5´ →3´ 聚合酶活性。酶混合液中的另一成分是 T4 多聚核苷酸激酶（M0201），可将平末端 DNA 的 5´ 端磷酸化，以用于与克隆载体的连接反应。本试剂盒经过优化，可在单次反应中将 5 μg 的 DNA 末端平齐化。
应用:
• 对已剪切、雾化、或经限制性内切酶消化的 DNA 进行末端平齐化，便于与质粒、cosmid、fosmid 和 BAC 载体连接
• PCR 产物在进行平末端克隆前进行末端平齐化
快速末端平齐化TM试剂盒组份
- 平齐化酶混合液
- 10X 平齐化反应缓冲液
- 1 mM dNTP 混合液
质保声明:
快速末端平齐化试剂盒经过严格的质控检测，确保该产品具有zuì高的活性和纯度。详情请联系我们咨询。
热失活:
70℃ 加热 10 分钟。
注意事项:
PCR 产物在进行末端平齐化之前必须纯化，可采用商业纯化试剂盒、酚抽提/乙醇沉淀法或者凝胶电泳的方法纯化 DNA。经限制性内切酶消化的 DNA 无需纯化可直接进行末端平齐化反应。

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货号	名称	规格
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SV1443	50 ml 磁性分离架	4孔(50ml)
SV1570	CDK1-细胞周期蛋白 B	1KU|200U
SV1607	CoA-Biotin	50 nmol

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