BTN60802 柱式细菌DNA提取试剂盒

北京百奥莱博供应的柱式细菌DNA提取试剂盒用于科研试验，柱式细菌DNA提取试剂盒是我司众多优质DNA提取纯化之一，质量堪比同类进口产品，价格非常优惠，目前正热烈促销中，恭候您的咨询订购。...

特别提示：包括柱式细菌DNA提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：柱式细菌DNA提取试剂盒
英文名称：Column Bacterial DNA Isolation Kit
产品货号：BTN60802
产品规格：50次

本产品是在百奥莱博在"百无忧"细菌DNA提取试剂盒 基础上开发的柱式升级产品，可以用于大多数革氏阳性和阴性细菌基因组DNA的快速提取。

特点：
1. 操作简单，整个过程不到20分钟。
2. 产率一般在5-20μg/mL 过液培养的饱和菌液（10^8～10^9个细胞）。
3. OD260/280一般在1.8以上，可直接用于PCR、酶切、杂交等实验。
4. DNA片段长度一般在40-50 Kb左右。
5. 每次提取可以处理0.1-1.5mL的细菌，也可以使用菌落。
6. 价廉物美，与国外同类产品相比质量相当，但价格。
7. 安全，本试剂盒对人体无害，无腐蚀性和刺激性气味。

产品组成：

组分	编号	规格
溶菌酶干粉	BTN100406	600mg
溶液A	BTN60802A	15mL
溶液B	BTN60802B	7.5mL
溶液C	BTN60802C	30mL
离心吸附柱	BTN60911	50套
通用洗柱液	BTN60408	50mL
DNA洗脱液2.0	BTN111205	10mL

保存条件：常温(溶菌酶干粉需要4℃或-20℃保存)，有效期一年。

自备试剂：lǜ仿、自备无菌水

使用方法：
注意：溶液A和溶液B 容易产生沉淀，溶液B 十分粘稠，均需要放置在65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低，用前充分摇匀。

一、对革氏阴性细菌样品，不需用溶菌酶
1. 将0.1-1.5mL过夜培养的菌液转移到1.5mL塑料离心管中， 12,000rpm室温离心1分钟沉淀细菌，弃上清。
2. 加入300uL预热的溶液A 到细菌沉淀中，充分吹打均匀。
3. 再加入150uL预热的溶液B 到离心管中，颠倒数次混匀。此时溶液中可能有白色丝状悬浮物产生。由于溶液B 比较粘稠，可以采取称量方法取用，150μL约等于150-160 mg。也可以将1mL 枪头剪去一截再吸取。
4. 65℃放置3-5分钟。如果室温放置，DNA 产量会降低10-20%。
5. 加入200μl 自备lǜ仿，震荡混匀10-30 秒，此时溶液将呈乳白色。
6. 12,000rpm 室温离心2分钟。此时上清液将变得透明，中间层有白膜。小心转移上清液到一个新的1.5mL 塑料离心管中，避免触及中间层的白膜。
7. 加入1.5 倍体积(约0. 7mL)的溶液C，颠倒混匀后全部转移到离心吸附柱中，室温放置至少2分钟。
8. 12,000rpm 室温离心1分钟，DNA 将吸附在离心吸附柱的膜上，倒弃收集管中的穿透液。
9. 将0.5mL 通用洗柱液加入离心柱中，12,000rpm 室温离心1分钟，弃穿透液。
10. 重复上步操作一次。
11. 空甩半分钟去除残留液体,将离心吸附柱转移到新的1.5mL 离心管中。
12. 加50-100μl 通用洗脱液，室温放置3-5分钟。
13. 12,000rpm 室温离心1分钟即得DNA 溶液。
14. 由于本产品使用的离心吸附柱吸附DNA的能力较强，可以重复上步操作一次以便得到更多的DNA。
15. 直接取5-10μl 电泳检测DNA，其余放冰箱备用。

二、对革氏阳性细菌样品，需用溶菌酶
1. 将0.1-1.5mL 过夜培养的革氏阳性细菌12,000rpm 室温离心1分钟后, 重悬于0.6mL 溶菌液中（溶菌液配制:30mL 无菌水+600 mg 溶菌酶，配制后zuì好分装成小管并放-20℃长期保存，每次只用一小管)，颠倒混匀5-10 次后放37℃保温至少30分钟(有的革氏阳性菌种可能需更长时间，需要自己根据不同的细菌摸索)。
2. 12,000rpm 室温离心10分钟，小心弃上清。
3. 后续处理接上面的革氏阴性细菌提取步骤中的第2 步。

三、其他注意事项
1. 可以直接使用细菌菌落提取DNA，操作时直接将细菌菌落挑入到溶液A中，后续操作同上。
2. 从单个菌落中提取到的DNA 较少，所以只用30μl 通用洗脱液洗脱。

使用效果：

图注：用本产品提取1.0mL过夜培养的E.coli Tg1细菌，DNAzuì后溶于100μl TE中，取20μl上样。M表示全长的DNA,其余均为提取的样品DNA。

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货号	名称	规格
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BTN60801	柱式腐殖酸清除剂	30次
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SY0002	溶菌酶	5g|10×5g
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QN0903	质粒大量提取试剂盒	10T

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名称：白细胞裂解液
货号：BTN130989
规格：250mL
本品为即用型白细胞裂解溶液，可以用于裂解分离纯化好的血液白细胞，用于DNA提取、RNA提取等后续实验。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：(以DNA提取为例)
1. 取新鲜抗凝血5mL，在10mL或15mL的塑料离心管中用红细胞裂解液裂解红细胞(红细胞裂解液有几种配方，用户需要根据所选产品的使用手册进行操作，这里不列出每种的详细步骤)，也可以直接2500rpm离心5分钟后取白细胞层到一新的10mL或15mL的塑料离心管中。
2.在所得的白细胞沉淀中或所得白细胞层溶液中加自备的生理盐水使得白细胞的终体积为2mL。
3. 加1mL的本产品，混匀后55℃ 保温3小时，其间轻轻振摇数次。
4. 加入3mL自备的Tris饱和酚，轻轻震摇5分钟，使得水相和酚相充分分开。
5. 3500rpm离心15分钟，上层水相含DNA，中间白色层为蛋白质，下层为酚相。
6. 将非常粘稠的含DNA的上清液转移到一干净的10mL或15mL的塑料离心管中。
7. 再用Tris饱和酚重复上面的抽提步骤，直到离心后中间层没有白色的蛋白出现为止。
8.在上清液中加入等体积的自备的lǜ仿，轻轻震摇5分钟，3500rpm离心5分钟，转移上清液到一干净的10mL或15mL的塑料离心管中。此步可以除去残留的酚。
9.在上清液中加入0.1倍体积的自备的3 M 乙酸钠溶液(pH5.2)和2倍体积的无水乙醇，轻柔颠倒混匀，将出现絮状的DNA沉淀。
10. 用移液枪头将DNA沉淀挑取出来，转移到1.5mL的塑料离心管中，用75%的乙醇浸泡2次。此操作可以去除DNA中残留的盐离子。
11.转移DNA沉淀到一个1.5mL的塑料离心管中，空气中放置10分钟左右待乙醇挥发后，加入0.5mL自备的TE缓冲液溶解DNA，4℃放置待用。

名称：痰液采集器
货号：BTN130938
规格：1个

名称：植物DNA提取试剂盒
货号：BTN3672
规格：50次
本试剂盒是根据经典的方法改良得到的专门用于提取新鲜或冷冻植物组织基因组DNA(包括叶绿体DNA和线粒体DNA)的试剂盒。

产品特点：
1. 操作快速，整个过程在30分钟内即可完成。
2. 纯度高，A260/A280在1.9左右，可直接用于PCR、酶切、杂交等分子生物学实验。提取得到的DNA大小在30-50Kb 之间。
3.产率高，高于大多数同类产品(尤其是基于离心柱的提取产品)。
4. 安全，本试剂盒对人体，无腐蚀性和刺激性气味。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	40ml
溶液B	20ml
RNase A溶液(10mg/mL)	0.75ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，RNase A溶液4℃保存，有效期一年。

使用方法：
注意：溶液A和溶液B容易产生沉淀，溶液B比较粘稠，用前均需要放置在65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低，用前充分摇匀。

1. 65℃预热溶液A，待其沉淀溶化后，充分混匀，取0.75mL 加入到10-15mL塑料离心管(常用于培养细菌用)中并放置于65℃待用。
2. 称取植物组织0.1-0.3g左右，剪成微小的碎片，转移到装有溶液A的离心管中短暂匀浆。匀浆过程中将产生大量泡沫，属于正常现象。也可以液氮研磨后将粉末加入到预热的溶液A中(建议不要在陶器或玻璃研钵中破碎细胞，因为其中的主要成分二氧化硅会非特异地吸附DNA，降低DNA 回收量。但可以在塑料研钵中研磨)。
3. 将匀浆液(包括植物碎片)全部转移到新的1.5mL塑料离心管中。注意：匀浆液较为粘稠，可将1mL 枪头剪去一截后用于转移匀浆液，不能吸取的植物碎片可倒入。
4.在匀浆液中加入0.5倍体积 65℃预热的溶液B，颠倒数次混匀。由于溶液B比较粘稠，可以将1mL 枪头剪去一截再吸取。
5. 加入15μl的RNase A溶液(10mg/mL)。
6. 65℃放置3～5分钟。如果室温放置，DNA产量会降低10-20%。
7. 加入200μl自备lǜ仿，震荡器上充分震荡混匀30秒。
8. 12000～15000g室温离心2分钟，此时两相交界面将有白色膜状物，小心转移上清液到一个新的1.5mL塑料离心管中，避免触及中间层的白膜。
9. 加入1倍体积(约750μl)的自备的异丙醇到上清液中，盖紧盖子后用手上下颠倒30秒混匀。此时一般将有絮状DNA沉淀出现。
10. 12000～15000g室温离心3分钟。此时管底将有微小DNA沉淀，小心弃上清，注意不要丟弃DNA沉淀。
11.在离心管中加1mL 75%乙醇，短暂震荡，12000～15000g室温离心3分钟，弃上清。
12. 重复上述操作一次。
13. 短暂离心，小心吸弃残留的液体(此步不要省略，否则残留的液体含乙醇将会影响DNA电泳、酶切和PCR等反应)，室温晾干。
14. 加入50-100μl自备的TE缓冲液充分溶解DNA沉淀。直接取5-10μl电泳检测DNA，其余放冰箱备用。

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